APPLICATIONS
-DNApolymerasehavingbothreversetranscriptionandDNAamplificationactivity,excellent foronestepRT-PCRandreal-timequantitativePCR;-ForhightemperaturereversetranscriptionthatallowshighlyspecificprimingofCDNAsynthesisandovercomesproblemswithsecondarystructure.
DESCRIPTION
TthPlusDNApolymeraseisisolatedfromtheThermusThermophilusstrain.TthPlusDNApolymeraseisasingle92kDapolypeptideshowinga5′-3′exonucleaseactivitybutlacking3′-5′exonucleaseactivity.Itcatalyzesthepolymerizationofnucleotidesintodouble-strandedDNAinthepresenceofMgCl2.ItsefficiencyhasbeenshownmoreparticularlyonlargeDNAfragmentsupto12kb(usinglamBDaphageDNAasatemplate).TthPlusDNApolymeraseisalsocapableofcatalyzingthepolymerizationofDNAusingaRNAtemplateinthepresenceofMn2+.TheABIlityofTthPlusDNApolymerasetoreversetranscribeatelevatedtemperatures(70°C)minimizestheproblemsencounteredwithstrongsecondarystructuresinRNAsincetheyareunstableathigherreactiontemperatures.Highertemperaturesalsoresultinincreasedspecificityofprimerhybridizationandextension.IncoupledRT/PCRassays,TthPlusisabout50-100timesmoreefficientthanregularTaqDNApolymerase.
TthPlusDNApolymeraseisdeliveredwithaone-tube10xbuffer.Bothreactions(RTandPCR)arecarriedoutinthesamebufferandsametubewiththesameenzyme(TthPlus).The10xonetubebufferdoesnotcontainMn(OAc)2.Mn(OAc)2isprovidedextraandhavetobeaddedatafinalconcentrationof3.5mM.
SIZEandCONCENTRATION
500Units,5units/µl
FEATURES
-thermostable;-TaqDNApolymeraseactivity;
-reversetranscriptaseactivityat70°C.
UNITDEFINITION
Oneunitisdefinedastheamountofenzymethatincorporates10nmolesofdNTPsintoacid-insolubleformin30minutesat72°Cunderthefollowingreactionconditions:25mMTAPSbuffer(Tris-(hydroxymethyl)-methyl-amino-propanesulfonicacid,sodiumsalt)pH9.3(25°C),50mMKCl,2mMMgCl2,1mMβ-mercaptoethanol,200µMdNTPsand10µgofcalfthymusDNAinafinalreactionvolumeof50µl.
STORAGEBUFFER
10mMK-phosphatebufferpH7.0(25°C),100mMNaCl,0.5mMEDTA,1mMDTT,50%glycerol(v/v),0,1mg/mlBSA.
STORAGETEMPERATURE
StoreTthPlusDNApolymerasepreferablyat-20°Cinaconstanttemperaturefreezer.
COMPONENT
-TthPlusDNApolymerase
-5xOneTubebuffer
-50mMMn(OAc)2
Theoptimalexperimentalconditionsdependonthesystemusedandtheyshouldbeindividuallydetermined.TheMn2+concentrationsandtheenzymeamountarethelimitingfactorsforanaccurateresult.TrADItionally5unitsofenzymeandaMn-acetateconcentrationof3.5mMareusedforthereversetranscriptioninafinal50µlreactionvolume.
AdditionalInformation
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eEnzyme是一家美国高质量生物学试剂及检测试剂盒品牌供应商,其与美国国立卫生研究院合作紧密,在全球范围内为广大科研客户提供高品质的产品与技术服务,其主要生产销售高质量的抗体和用于传染病研究的抗体/抗原,细胞因子蛋白,pcr产品等用于分子和细胞生物学研究的生物试剂,产品应用于生物技术研究,制药,药物发现,癌症研究,传染性疾病,微生物和分子诊断等众多生命科学技术领域
eENZYME为科学界生产和销售高质量的生物试剂盒和生物分析试剂盒。与NIH密切合作以保证产品在生命科学研究的多个领域成功地使用。努力提供新颖价廉且有效的工具,使实验更容易成功。产品在科研、生物技术、制药和政府的研究实验室中得到广泛的应用,包括药物发现、癌症研究、传染病研究、微生物学和分子诊断。
【简单介绍】eENZYME生产销售高质量的抗体和用于传染病研究的抗体/抗原,细胞因子蛋白,PCR产品等用于分子和细胞生物学研究的生物试剂,产品应用于生物技术研究,制药,药物发现,癌症研究,传染性疾病,微生物和分子诊断等众多生命科学技术领域。【详细说明】欢迎eENZYMEeENZYME生产销售高质量的抗体和用于传染病研究的抗体/抗原,细胞因子蛋白,PCR产品等用于分子和细胞生物学研究的生物试剂,产品应用于生物技术研究,制药,药物发现,癌症研究,传染性疾病,微生物和分子诊断等众多生命科学技术领域。 Ë ENZYMEis的高品质生物试剂及实验室设备科学界一个制造商和分销商。我们密切合作,与美国国立卫生研究院的社区,以保证我们的产品生命科学研究在广泛领域的成功表现。我们致力于提供创新和具有成本效益的工具,使您更容易取得成功。我们的产品用于在学术,生物技术,制药和政府研究实验室,包括药物发现,癌症研究,传染病研究,微生物学和分子诊断许多不同的应用。公司网站:www.eenzyme.com 目录号描述产品类型应用单位供应商IA-01SW-0100抗HA(A/California/06/09)(甲型H1N1流感)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-011-0100抗H1(H1N1/Pan)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-001-0100抗HA1(A/新喀里多尼亚)(甲型H1N1流感)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-023-0100抗-NP(A/新Caledonia/20/1999)(甲型H1N1流感兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-022-0100抗M2型(H1N1/A/新喀里多尼亚(H1N1))兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-004A-0100抗-H3(H3N2)(A/WIS/2005)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0100抗-M1(H3N2)[A/Wyoming/3/03)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-004-0100抗HA(H3N2)[A/Wyoming/3/03)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-020-0100抗-NA(H3N2)[A/Wyoming/3/03)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-005H-0100抗H5(A/香港Kong/483/97)(H5N1)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-005-0100抗HA1(H5N1)(A/Vietnam/1203/2004)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-006-0100抗HA1(H5N1,禽流感)(A/斑头雁/Qinghai/12/05)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-010-0100抗-HA2(A/Vietnam/1203/2004)(H5N1)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-012-0100抗-M1(A/Vietnam/1203/2004)(H5N1)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-021-0100抗-NA(A/Vietnam/1203/2004)(H5N1,人)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-025-0100抗NS1(A/Vietnam/1203/2004)(H5N1)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0100抗HA1(A/Chicken/NY/29878/91)(H2N2)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-009-0100抗HA1(A/chicken/HongKong/NT366/03)(H9N2)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-027-0100抗-NA(A/Chicken/HongKong/NT366/03)(H9N2)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-007-0100抗HA1(A/duck/Hainan/6/2004)(H6N2)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-008-0100抗HA1(A/鸡/荷兰/2/03)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-028-0100抗-NA(A/Chicken/Netherlands/1/03)(H7N7)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-0015-0100抗-H11(A/duck/Yangzhou/906/02)(H11N2)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0031抗B型流感(NP)的多克隆兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0032抗B型流感(医管局)多克隆兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-013-0100抗-H12(A/pintail/Alaska/102/05)(H12N5)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-014-0100抗-H4(A/environment/Maryland/1101/06)(H4N6)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-018抗-H15(A/Australia/83/00(H15N8))兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-019抗-H16(A/Sweden/99(H16N3))兔多克隆抗体WB等100微克eENZYME目录号描述产品类型应用单位供应商IA-01SW-0100抗HA(A/California/06/09)(甲型H1N1流感)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-011-0100抗H1(H1N1/Pan)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-001-0100抗HA1(A/新喀里多尼亚)(甲型H1N1流感)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-023-0100抗-NP(A/新Caledonia/20/1999)(甲型H1N1流感兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-022-0100抗M2型(H1N1/A/新喀里多尼亚(H1N1))兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-004A-0100抗-H3(H3N2)(A/WIS/2005)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0100抗-M1(H3N2)[A/Wyoming/3/03)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-004-0100抗HA(H3N2)[A/Wyoming/3/03)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-020-0100抗-NA(H3N2)[A/Wyoming/3/03)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-005H-0100抗H5(A/香港Kong/483/97)(H5N1)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-005-0100抗HA1(H5N1)(A/Vietnam/1203/2004)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-006-0100抗HA1(H5N1,禽流感)(A/斑头雁/Qinghai/12/05)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-010-0100抗-HA2(A/Vietnam/1203/2004)(H5N1)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-012-0100抗-M1(A/Vietnam/1203/2004)(H5N1)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-021-0100抗-NA(A/Vietnam/1203/2004)(H5N1,人)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-025-0100抗NS1(A/Vietnam/1203/2004)(H5N1)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0100抗HA1(A/Chicken/NY/29878/91)(H2N2)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-009-0100抗HA1(A/chicken/HongKong/NT366/03)(H9N2)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-027-0100抗-NA(A/Chicken/HongKong/NT366/03)(H9N2)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-007-0100抗HA1(A/duck/Hainan/6/2004)(H6N2)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-008-0100抗HA1(A/鸡/荷兰/2/03)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-028-0100抗-NA(A/Chicken/Netherlands/1/03)(H7N7)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-0015-0100抗-H11(A/duck/Yangzhou/906/02)(H11N2)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0031抗B型流感(NP)的多克隆兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0032抗B型流感(医管局)多克隆兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-013-0100抗-H12(A/pintail/Alaska/102/05)(H12N5)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-014-0100抗-H4(A/environment/Maryland/1101/06)(H4N6)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-018抗-H15(A/Australia/83/00(H15N8))兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-019抗-H16(A/Sweden/99(H16N3))兔多克隆抗体WB等100微克eENZYME目录号描述产品类型应用单位供应商IA-01SW-0100抗HA(A/California/06/09)(甲型H1N1流感)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-011-0100抗H1(H1N1/Pan)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-001-0100抗HA1(A/新喀里多尼亚)(甲型H1N1流感)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-023-0100抗-NP(A/新Caledonia/20/1999)(甲型H1N1流感兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-022-0100抗M2型(H1N1/A/新喀里多尼亚(H1N1))兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-004A-0100抗-H3(H3N2)(A/WIS/2005)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0100抗-M1(H3N2)[A/Wyoming/3/03)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-004-0100抗HA(H3N2)[A/Wyoming/3/03)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-020-0100抗-NA(H3N2)[A/Wyoming/3/03)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-005H-0100抗H5(A/香港Kong/483/97)(H5N1)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-005-0100抗HA1(H5N1)(A/Vietnam/1203/2004)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-006-0100抗HA1(H5N1,禽流感)(A/斑头雁/Qinghai/12/05)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-010-0100抗-HA2(A/Vietnam/1203/2004)(H5N1)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-012-0100抗-M1(A/Vietnam/1203/2004)(H5N1)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-021-0100抗-NA(A/Vietnam/1203/2004)(H5N1,人)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-025-0100抗NS1(A/Vietnam/1203/2004)(H5N1)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-003-0100抗HA1(A/Chicken/NY/29878/91)(H2N2)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-009-0100抗HA1(A/chicken/HongKong/NT366/03)(H9N2)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-027-0100抗-NA(A/Chicken/HongKong/NT366/03)(H9N2)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-007-0100抗HA1(A/duck/Hainan/6/2004)(H6N2)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-008-0100抗HA1(A/鸡/荷兰/2/03)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-028-0100抗-NA(A/Chicken/Netherlands/1/03)(H7N7)兔多克隆抗体WB等100微克eENZYMEIA-0015-0100抗-H11(A/duck/Yangzhou/906/02)(H11N2)兔多克隆抗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不同点:
1、作用底物不同。RNA聚合酶底物是NTP;DNA聚合酶底物是dNTP。
2、RNA聚合酶作用不需要引物,而DNA聚合酶作用需要引物。
3、RNA聚合酶本身具有一定的解旋功能,而DNA聚合酶没有,当需要解开双链的时候要解旋酶和拓扑异构酶的帮助。
4、RNA聚合酶只具有5‘到3’端的聚合酶活性,而DNA聚合酶不仅有5‘到3’端的聚合酶活性,还具有3‘到5’端的外切酶活性。保证DNA复制时候校对,所以复制的忠实性高于转录的。
5、RNA聚合酶通常作用于转录过程;DNA聚合酶通常作用于DNA复制过程。
B、酶大部分是蛋白质、少量是RNA,故某种酶的基本组成单位是氨基酸或核糖核苷酸,B错误;
C、内分泌细胞能产生激素,活的细胞能产生酶,故能产生激素的细胞就能产生酶,C正确;
D、酶通常是蛋白质,蛋白质在低温条件下更加稳定,利于保存,而且低温不会使酶失活,因此在最适温度保存没有意义,D错误.
相同点:都能以DNA为模板,从5'向3'进行核苷酸或脱氧核苷酸的聚合反应。
不同点
1、作用底物不同。RNA聚合酶底物是NTP;DNA聚合酶底物是dNTP。
2、RNA聚合酶作用不需要引物,而DNA聚合酶作用需要引物。
3、RNA聚合酶本身具有一定的解旋功能,而DNA聚合酶没有,当需要解开双链的时候要解旋酶和拓扑异构酶的帮助。
4、RNA聚合酶只具有5‘到3’端的聚合酶活性,而DNA聚合酶不仅有5‘到3’端的聚合酶活性,还具有3‘到5’端的外切酶活性。保证DNA复制时候校对,所以复制的忠实性高于转录的。
5、RNA聚合酶通常作用于转录过程;DNA聚合酶通常作用于DNA复制过程
最近,我看了很多这方面的资料,但是我对这个方面不是很了解,所以现在搞得头昏眼花的,不知道该选什么酶和载体,希望大家多多帮忙
在此十分感谢
可分为以下几个类群:(1)依赖DNA的DNA聚合酶;(2)依赖RNA的DNA聚合酶;(3)依赖DNA的RNA聚合酶;(4)依赖RNA的RNA聚合酶。前两者是DNA聚合酶,它使DNA复制链按模板顺序延长。如在原核生物中仅就大肠杆菌中已被发现的就有三种(分别简称为PolⅠ,PolⅡ和PolⅢ等);DNA聚合酶只能在有引物的基础上,即在DNA或RNA引物的3′-OH延伸,这DNA的合成方向记为5′→3′。换言之DNA聚合酶催化反应除底物(αNTP)外,还需要Mg2+ 、模板DNA和引物,迄今细胞内尚无发现可从单体起始DNA的合成。同样,上述(3)和(4)是催化RNA生物合成反应中最主要的RNA合成酶,它们以四种三磷酸核糖核苷(NTP)为底物,并需有DNA模板以及Mn2 及Mg2 的存在下,在前一个核苷酸3′-OH与下一个核苷酸的5′-P聚合形成3′,5′-磷酸二酯键,其新生链的方向也是5′→3′。RNA聚合酶也大量存在于原核和真核生物的细胞中。如大肠杆菌RNA聚合酶分子量4.8×105,由5条多肽链组成,分别命名为α,α,β,β′,和γ,全酶可用α2ββ′λ表示。真核生物RNA聚合酶分子大于5×105,由10~12个大小不等亚基组成。聚合酶除作为自然界生命活动中不可缺少的组分外,在实验室中大多用作生命科学研究的工具酶类之一。
再来说真核生物,真核生物的DNA聚合酶分为α,β,γ,δ,ε,.首先我来说三个和原核生物中的Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ功能相同的酶.ε类似于原核生物DNA聚合酶Ⅰ,β类似于原核生物DNA聚合酶Ⅱ,δ类似于原核生物DNA聚合酶Ⅲ.α具有引物酶活性,而γ则是作为复制真核生物线粒体内的DNA所需要的酶.
可分为以下几个类群:(1)依赖DNA的DNA聚合酶;(2)依赖RNA的DNA聚合酶;(3)依赖DNA的RNA聚合酶;(4)依赖RNA的RNA聚合酶。前两者是DNA聚合酶,它使DNA复制链按模板顺序延长。如在原核生物中仅就大肠杆菌中已被发现的就有三种(分别简称为PolⅠ,PolⅡ和PolⅢ等);DNA聚合酶只能在有引物的基础上,即在DNA或RNA引物的3′-OH延伸,这DNA的合成方向记为5′→3′。换言之DNA聚合酶催化反应除底物(αNTP)外,还需要Mg2+ 、模板DNA和引物,迄今细胞内尚无发现可从单体起始DNA的合成。同样,上述(3)和(4)是催化RNA生物合成反应中最主要的RNA合成酶,它们以四种三磷酸核糖核苷(NTP)为底物,并需有DNA模板以及Mn2 及Mg2 的存在下,在前一个核苷酸3′-OH与下一个核苷酸的5′-P聚合形成3′,5′-磷酸二酯键,其新生链的方向也是5′→3′。RNA聚合酶也大量存在于原核和真核生物的细胞中。如大肠杆菌RNA聚合酶分子量4.8×105,由5条多肽链组成,分别命名为α,α,β,β′,和γ,全酶可用α2ββ′λ表示。真核生物RNA聚合酶分子大于5×105,由10~12个大小不等亚基组成。聚合酶除作为自然界生命活动中不可缺少的组分外,在实验室中大多用作生命科学研究的工具酶类之一。向左转|向右转
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