抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色
| 货号： | M071 |
| 供应商： | 上海歌凡生物科技有限公司 |
| 数量： | 大量 |
| 保存条件： | 4℃ |
| 规格： | ≥100T |
货号：M071
原理:
TRAP染色反应抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)为破骨细胞的特异性标志酶，应用偶氮偶联组化分析法酶活性部位显示红色反应。以萘酚二磷酸盐为底物，偶氮副品红为显色剂，TRAP在酒石酸钾钠存在条件下将萘酚AS-BI磷酸盐水解为萘酚AS-BI，与显色剂结合形成红色沉淀。
- 80%酒精固定；福尔马林或者4%多聚甲醛固定时间16小时到4天，4℃下进行。也可以用切片前不固定，用2.5%戊二醛二次固定10分钟。
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| M071A | 磷酸盐缓冲液 | 50ml |
| M071B | 亚硝酸盐溶液 | 20ml |
| M071C | 副品红溶液 | 20ml |
| M071D | 萘酚AS-BI磷酸盐 | 1ml |
| M071E | 苏木素 | 50ml |
| M071F | 酒石酸钾钠 | 5g |
- 石蜡切片4～5um,脱蜡至水洗；细胞爬片或者冰冻切片用80%酒精或戊二醛固定后蒸馏水水洗3次，每次3分钟。
- 配制六偶氮副品红溶液（亚硝酸钠溶液和副品红溶液等比例混合，即为六偶氮副品红，现配现用）
- 配制孵育液：取1ml六偶氮副品红加到18ml醋酸盐溶中，再加入1ml萘酚AS-BI磷酸盐溶液，再加酒石酸钾钠282mg。调pH值5.0，过滤备用；
- 阴性对照孵育液：取1ml六偶氮副品红加到18ml醋酸盐溶中，再加酒石酸钾钠282mg。调pH值5.0，过滤备用
- 切片入37℃蒸馏水水洗30秒；
- 入孵育液37℃孵育50-60分钟；
- 去离子水水洗3分钟；
- 入苏木素复染40秒；
- 自来水水洗10分钟返蓝；
- 甘油明胶封片。
- 。
- 骨组织切片易脱片，操作过程中水洗要轻；
- 骨组织脱钙宜用柠檬酸脱钙或者EDTA脱钙，禁用强酸脱钙；
- 切片以3-4um为宜，切片过厚就会有酶扩散现象；
- 孵育液要新鲜配制，现用现配；pH值对染色影响比较大，pH值5.0为最佳；
- 37℃孵育时要防止水分蒸发，染色液干凅。
温馨提示：不可用于临床治疗。
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发布于 ： 2021-07-26
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