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2024-03-29
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detaibio
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Taq DNA聚合酶的化学修饰?这其实就不能成为Taq DNA聚合酶了,而是热启动Taq聚合酶,PCR扩增的酶有很多种常用的普通Taq酶,热启动Taq聚合酶,高保真酶,长片段扩增酶,其中热启动酶是能够通过热启动的方式避免低温下体系中发生错配,原理就是采用化学修饰或者抗体修饰的方法封闭酶的活性中心,化学修饰使利用一些分子基团和酶活性中心结合,温度到达一定温度时(一般是退火温度之前),小分子离开酶的活性中心,酶活性中心暴露,此时发挥活性,指导体系扩增,而抗体修饰是一种动态平衡没有化学修饰的稳定,而且抗体修饰易带来外源DNA的污染,因此,化学修饰的热启动Taq聚合酶效果比较好
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flq5666
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非常感谢detaibio战友的回复,我最终的目的是通过化学修饰taq酶达到热启动的目的,减少荧光定量PCR在低温时产生的非特异性扩增,不知道您那里有没有相关的文献或者相关的实验分享?非常感谢!
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Szrswf
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学习了~
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爱恋lily
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请问楼主,现在找到合适的方法了吗?我现在也要做这方面的实验,正在迷茫中。
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