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Excellgen/T4 RNA Ligase 2, dsRNA Ligase/EG-1052/250 Units
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Excellgen/T4 RNA Ligase 2, dsRNA Ligase/EG-1052/250 Units
品牌 / 
Excellgen
货号 / 
EG-1052-250Units
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DescriptionT4RNALigase2,alsoknownasT4Rnl2(gp24.1),hasbothintermolecularandintramolecularRNAstrandjoiningactivity.T4RNALigase2ismuchmoreactivejoiningnicksondoublestrandedRNAthanonjoiningtheendsofsinglestrandedRNA.Ligationofsingle-strandedRNAsubstratesgenerateseitherintramolecularorintermolecularproducts.Theenzymerequiresanadjacent5´phosphateand3´OHforligation.Theenzymecanalsoligatethe3´OHofRNAtothe5´phosphateofDNAinadoublestrandedstructure.Thenon-ligatedstrandoftheduplexcanbeeitherRNAorDNA.T4RNAligase2requiresATPforactivityunlessthesubstrateispreadenylatedonthe5′end.
Applications
  • LigateanickindsRNA
  • Ligatethe3´OHofRNAtothe5´phosphateofDNAinadoublestrandedstructure
Source

PurifiedfromarecombinantE.colistraincarryingtheT4phageRNALigase2(gp24.1)gene

Components
  • T4RNALigase2:30,000U/mlinstoragebuffer:10mMTris-HCl,100mMNaCl,0.1mMDTT,0.1mMEDTA,50%glycerol,pH7.5@25°C
  • 10XT4RNALigase2Buffer:500mMTris-HCl,100mMMgCl2,50mMDTT,10mMATP,pH7.6@25°C
UnitDefinition

Oneunitisdefinedastheamountofenzymerequiredtoligate50%of0.4µgofanequimolarmixofasingle-stranded5′FAM-labeled17-merRNAtothe5′phosphorylatedendofa18-merDNAwhenbothstrandsareannealedtoacomplementary35-merDNAstrandin20µLat37°Cfor30minutes.

QualityControl
  • Theabsenceofendo-,exodeoxyribonucleases,phosphatases,andribonucleasesconfirmedbyappropriatequalitytests.
  • Functionallytestedforthecapacitytojoincohesive-andblunt-endDNAfragments.
Storage-20°C.
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T4 DNA连接酶作为工具酶种重要的连接酶,本文将就其来源、用途和保存等方面对其进行详细介绍。一、简介 T4 DNA连接酶催化dsDNA平末端或粘性末端相邻核苷酸的5-磷酸和3-OH的连接反应。依赖ATP将ssRNA或ssDNA连接到ssRNA或ssDNA分子的5-P末端, 还能将 [5-32P]核苷酸、3,5-双(磷酸)加入到RNA上,但不能和全单链核苷酸连接。本公司所生产T4 DNA连接酶比一般T4 DNA连接酶连接效率要高2-4... 查看更多>
T4RNA 连接酶已经用来生成很多位点特异修饰的 RNA,尤其是寡核苷酸修饰和用反义密码 tRNA 修饰的 RNA。另外,T4RNA 连接酶还可用于 RNA/DNA 分子内/分子间连接、甲链寡脱氧核苷酸的连接、克隆全长 cDNA 及将非天然氨基酸掺入蛋白分子中。 查看更多>
所有产品都有正品保障,透析袋现货,为美国spectrumlabs、viskase、cellu.sep三大公司生产。 T4 DNA 连接酶 货号 规格 价格 库存 #M0202L 100,000 unit... 查看更多>
北京益奥柏科贸有限公司在发布的T4 DNA Ligase T4 DNA 连接酶(货号M0202S)供应信息,浏览与T4 DNA Ligase T4 DNA 连接酶(货号M0202S)相关的产品或在搜索更多与T4 DNA Ligase T4 DNA 连接酶(货号M0202S)相关的内容。 查看更多>
在pUC18载体基础上构建而成,具有pUC18载体的相似功能。 克隆效率高,阳性率在90%以上,缩短了筛选过程。 组分说明: 组分 含量储存 pUC-T(50 ng/µl)20 μl-20℃ Solution Buffer,2× 150 μl -20℃ Conctrol Insert (50 ng/µl) 10 μl-20℃ DH5α 查看更多>
DNA连接酶(DNA Ligase)也称DNA黏合酶,在分子生物学中扮演一个既特殊又关键的角色,那就是连接DNA链3‘-OH末端和,另一DNA链的5’-P末端,使二者生成磷酸二酯键,从而把两段相邻的DNA链连成完整的链。连接酶的催化作用需要消耗ATP。... 查看更多>
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B. 图二所示的DNA片段被限制酶切割后获得的末端形式与图一下端相同 C. T4DNA连接酶可以将两个图一所示结构连接成为一个DNA片段 D. 基因工程的载体必须具有图二... 查看更多>
特性 Okayama 和 Berg 用于 cDNA 克隆 概述催化双链 DNA 粘性末端的 5´-磷酸和 3´-羟基形成磷酸二酯键。 来源纯化自重组 E.coli 594(su-)菌株,该菌株携带有噬菌体 λgt4 lop11 lig + Sam 7。 反应条件1 XE. coliDNA连接酶缓冲液 [30 mM Tris-HCl(pH 8.0),4 mM MgCl2,1 mM DTT,26 μM NAD+,50 μg/ml BSA]。最适反应温度为16 ℃。 质保声明E. coli 查看更多>
2021-07-23
本酶在以ATP作辅酶的情况下,可以催化相邻DNA链的5’磷酸基团和3’羟基之间的连接反应。平末端和粘性末端均可,此酶也可以催化双链RNA与双链DNA连接,但不能催化单链核酸的连接。 储存条件: T4 DNA连接酶和10×T4 DNA ligase Buffer必须放置于-20℃保存,避免反复冻融,10×T4 DNA ligase Buffer建议分装使用。 查看更多>
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DNA连接酶 123
2017-10-03
DNA连接酶用来连接具有互补末端的双链DNA,其最适温度是37℃,但由于其在高温不稳定,所以一般是16℃连接过夜。DNA聚合酶是用来复制DNA的,在体内的最适温度是37℃,我们做PCR常用的酶也是聚合酶,其最适扩增温度是72℃。
DNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的,最初是在大肠杆菌细胞中发现的.

DNA连接酶主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键最初从原核生物(大肠杆菌)分离得到的.现在生物基因工程主要是从T4噬菌体中分离得到的,
所有的DNA连接酶都具有专一性
酶对所作用的底物有严格的选择性。一种酶仅能作用于一种物质,或一类分子结构相似的物质,促其进行一定的化学反应,产生一定的反应产物,这种选择性作用称为酶的专一性。
E.coliDNA连接酶和T4连接酶的区别:E·coliDNA连接酶是从大肠杆菌中获得的DNA 连接酶 只能连接粘性末端,而平末端则要交给T4DNA连接酶了 它可以连接粘性末端也可以连接平末端。
  连接酶通常是包括“连接酶”这个字,就如DNA连接酶是将脱氧核糖核酸(DNA)片段连接。其他普遍的名称包括“合成酶”,因为这些酶是用作合成新的分子,或当它们是将二氧化碳加入一个分子时则称为“羧化酶”。

菌体构建时,目的基因连接在T载体上,测序也正确,但是将目的基因还有载体分别双酶切后总是连接不上,将连接后产物跑核酸胶,什么也没有,不知道是什么原因?我的目的基因浓度为9ng/ul,载体回收后的浓度为6ng/ul,是因为浓度太低的原因吗?还有就是连接有目的基因的T载体双酶切后出现了三条带,这个又是什么原因呢?希望得到解答


大家有用过Invitrogen的T4连接酶吗?说明书上是23-26度连接,一般的连接酶不都是16度吗?应该用多少度呢?另外,说明书上还说连接后为了达到更好的转化效率,应将连接反应液至少稀释5倍再转化,是这样吗?谢谢大家帮忙啊
SNP检测方法汇总123
拜仁的饺子2021-08-01
我找公司做了iMLDR法,实验报告中链接反应每个位点有三个引物
例如rs1492100FA:
TCTCT…GGCAATT
rs1492100FP:
…TTTAGAGAGAAACTCCATG
rs1492100FT:
…GAGCTCAGCGTGGGTT
这里的FA/FP/FT是什么涵义,有的是RC/RP/RT,有的是RA/RG/RP
F/R应该是正向/反向,后面的字母什么涵义就不懂了?谢大神
T4DNA连接酶 123
曾小峰2021-07-21
各位大侠,我的目的基因大约1.7KB,载体大约4.7KB,做了几次连接实验均为成功,不知哪个公司的T4连接酶的连接效率较高.请大家帮忙,我很急.
它是一种封闭DNA链上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外),而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷酸二酯键。
连接酶有T4噬菌体DNA连接酶、T4噬菌体RNA连接酶、大肠埃希菌DNA连接酶等。DNA连接酶可连接平端,也连接粘端。反应需有Mg2+和ATP存在,pH7.5-7.6。最适温度37℃,30℃以下活性明显下降,但考虑到被连接DNa 的稳定性和粘性末端的退火温度,一般平端连接用20-25℃,粘端连接用12℃左右。
聚合酶有DNA聚合酶(以DNA为模板合成DNA大肠埃希菌DNA聚合酶Ⅰ,大肠埃希菌DNA聚合酶Ⅰ大片段(Klenow大片段),T4或T7噬菌体DNA聚合酶等);RNA聚合酶(以DNA为模板合成RNA,T7或T3噬菌体RNA聚合酶);逆转录酶(以RNA为模板合成DNA,除RNA病毒中发现外,发现大肠埃希菌DNA聚合酶Ⅰ和Taq DNA聚合酶都有逆转录活性)。
大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ具有5′→3′聚合酶活性和5′→3′,3′→5′外切酶活性。Klenow片段是DNA聚合酶Ⅰ被枯草杆菌酶作用产生的一个大片段,有5′→3′聚合酶和3′→5′外切酶活性,无5′→3′外切酶活性。可用于缺口翻译(Nick translation)法标记核酸,也可用于DNA序列测定,修补DNA链等。向左转|向右转
不需要识别特定的碱基序列吗?例如用不同的限制酶切出的平末端用T4DNA连接酶都能连起来吗?
加入PEG8000,反应体系终浓度5%