RescuecloningofEZ-Tn5™transposedelements
- RescuetranspositionmutantscreatedusingtheEZ-Tn5™R6KɣoriKan-2>InsertionKit
orTnpTransposome™Kit
- PropagateplasmidstaggedwiththeEZ-Tn5™R6KɣoriKan-2>InsertionKit
TheTransforMax™EC100D™pir+ElectrocompetentE.coliandTransforMax™EC100D™pir-116ElectrocompetentE.colieachconstitutivelyexpresstheπprotein(thepirgeneproduct)forreplicationofplasmidscontainingtheR6Kγoriginofreplication(R6Kγori).ThecellsarederivedfromEpicentre'sTransforMax™EC100™ElectrocompetentE.colibyP1phagetransductionwithastraincontainingthepir+orpir-116genelinkedtoadihydrofolatereductase(DHFR)Marker.
TheTransforMaxEC100Dpir+cellswillmaintainR6Kγoricontainingplasmidsatapproximately15copiespercell,1forcloningofpotentiallytoxicorunstableDNAsequences.TheTransforMaxEC100Dpir-116cellsareforhigh-copypropagationofupto250rescueplasmidcopiespercell.1
Benefits
- AcceptslargeclonesforunbiasedpropagationandstABIlityoflargerescueclones.
- lacZΔM15forblue/whitescreeningofrecombinants.
- Restrictionminus[mcrA,Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)]enablesefficientcloningofmethylatedDNA.
- Endonucleaseminus(endA1)toensurehighyieldsofDNA.
- Recombinationminus(recA1)forgreaterstabilityoflargeclonedinserts.
Genotypes
TransforMaxEC100Dpir+ElectrocompetentE.coli:
F-mcrAΔ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80dlacZΔM15ΔlacX74recA1endA1araD139Δ(ara,leu)7697galUgalKλ-rpsL(StrR)nupGpir+(DHFR)TransforMaxEC100Dpir-116ElectrocompetentE.coli:
F-mcrAΔ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80dlacZΔM15ΔlacX74recA1endA1araD139Δ(ara,leu)7697galUgalKλ-rpsL(StrR)nupGpir-116(DHFR)
TransformationEfficiency
Greaterthan5×109colonyformingunits(cfu)/µgwithpR6KancontrolDNA.
References
- Metcalf,W.W.etal.(1994)Gene138,1.
ORDERINFORMATION
Eachproductcontains5tubeseachcontaining100µLofelectrocompetentcells,whichisenoughcellsfor10electroporations.AcontrolvectorcontainingandR6Kγoriisalsoincludedwitheachproduct.ebiomall.com
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
质粒转染一般是说DNA转染，用常用的sinofection等转染试剂就可以；
小干扰RNA（Small interfering RNA；siRNA）有时称为短干扰RNA（short interfering RNA）或沉默RNA（silencing RNA），是一个长20到25个核苷酸的双股RNA，这种RNA的转染需要用专门的RNA转染试剂。
如题，PolyplusTransfection转染试剂在中国区的代理商有哪些？求推荐1-2个靠谱的，谢谢！
想用RNAiMAX或者lipo2000转染siRNA，但是看了下转染试剂的说明书和锐博的siRNA说明书，觉得分别对siRNA的用量描述差别挺大的呀，不知道到底该参考哪个呢。
以24孔板为例在siRNA说明书中写到，siRNA终浓度是50nM的话，加入浓度为20μM的siRNA1.25ul，每孔体积是500ul，那这样的话，每孔最终siRNA的量是25pmol。
但是在RNAiMAX或者是lipo2000说明书中，一个写的每孔siRNA用量是5pmol，一个是500ng，这与siRNA厂家所提供的量相差也太多了吧。
到底该看哪一个呢。
ps.一旦siRNA的量和体积确定下来之后，转染试剂的量和siRNA1:1的加就可以了吗？
请各位大神解答。
1.siRNA说明书中的用量，红线圈出
2.RNAIMAX说明书中siRNA的用量。
3.lipo2000说明书中siRNA用量
对重复性要求不高的试验，一般没有问题的，只不过可能需要增加一些转染试剂用量了。
为了避免这个问题，推荐收到货之后，进行适当分装，用多少，拿出来多少最好。
但是在选择的时候，也需要注意其他的一些问题。
1、采用何种原料和抗体，是否高效、灵敏、特异
2、规范包被操作，吸附是否均匀
3、重复性、可靠性
6、是否提供技术服务
7、适用于血浆、血清、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本
8、可检测动物类型是否丰富
9、可检测指标是否齐全
elisa试剂盒就查下博欧特生物
使用方法：
1、 血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液：1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液。
5、 保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁(cellwall)上的特有成分，主要是脂多糖中的类脂A，在细菌被裂解时被释放出来，由于其化学结构和特性，在质粒的纯化过程中很容易混入质粒DNA一同提取出来。内毒素的存在会严重的影响质粒转染细胞的效率，此外会激活造血细胞（如B细胞、巨噬细胞等）的非特异免疫反应，造成实验的假阳性，所以转染级质粒的提取纯化必须去除内毒素。
暂无品牌问答
© 2005- 苏州蚂蚁淘生物科技有限公司 版权所有。
苏ICP备17049038号-11
苏公网安备 32059002001627号
声明：本网站部分产品受外界条件影响（包含但不限于进口国出口国政策限制等因素），无法提供销售服务，下单后，会由客服人员联系厂家确认后另行通知。部分危险品无法清关，请勿下单