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贤的小石子儿
用户
有引物二聚体，产物跑下胶就知道了
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小新2018
用户贤的小石子儿有引物二聚体，产物跑下胶就知道了跑胶了呢，结果好像引物二聚体不是很明显，像这样的话需要换引物吗？谢谢您~
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贤的小石子儿
用户小新2018跑胶了呢，结果好像引物二聚体不是很明显，像这样的话需要换引物吗？谢谢您~有两个方法，一是减少引物的量。二是换引物了
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小新2018
用户贤的小石子儿有两个方法，一是减少引物的量。二是换引物了还想再请教您一个问题，当时因为时间紧张，没来得及直接做标准曲线，直接扩增了，后来师兄根据上机结果直接选了一个模板的稀释浓度，出来的结果是这样的，现在还需要再做一个标准曲线吗，这样出来的结果是不是不能去做△△T计算，谢谢您~
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贤的小石子儿
用户小新2018还想再请教您一个问题，当时因为时间紧张，没来得及直接做标准曲线，直接扩增了，后来师兄根据上机结果直接选了一个模板的稀释浓度，出来的结果是这样的，现在还需要再做一个标准曲线吗，这样出来的结果是不是不能去做△△T计算，谢谢您~呵呵，太客气了，相互学习～你是做相对定量么？相对定量如果不是医学应该还好，是做医学相关的话那就最好严谨一点吧，这是我的个人看法。
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小新2018
用户贤的小石子儿呵呵，太客气了，相互学习～你是做相对定量么？相对定量如果不是医学应该还好，是做医学相关的话那就最好严谨一点吧，这是我的个人看法。还是很谢谢您的，是医学相关的，师兄说我的不需要做标准曲线看扩增效率，所以就没有做了
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贤的小石子儿
用户小新2018还是很谢谢您的，是医学相关的，师兄说我的不需要做标准曲线看扩增效率，所以就没有做了我做相对定量的话，首先是看rna提取完整性，跑胶三条带，然后，是引物特异性，直接pcr扩增看效果，都可以就上机。
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小新2018
用户贤的小石子儿我做相对定量的话，首先是看rna提取完整性，跑胶三条带，然后，是引物特异性，直接pcr扩增看效果，都可以就上机。并且内参和目的基因的ct值有区间吗？现在出的结果内参16左右，一个目的基因ct值27左右，另外一个目的基因21左右，两个目的基因的表达是正相关的
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贤的小石子儿
用户不能发私信了，我先休息了，明天再说吧。
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小新2018
用户贤的小石子儿不能发私信了，我先休息了，明天再说吧。好的，谢谢您！
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贤的小石子儿
用户小新2018好的，谢谢您！你好，定量引物设计跨内含子的目的就是为了排除DNA污染的干扰，所以最好是跨外显子的，但是在特殊情况下，不夸也可以。
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小新2018
用户贤的小石子儿你好，定量引物设计跨内含子的目的就是为了排除DNA污染的干扰，所以最好是跨外显子的，但是在特殊情况下，不夸也可以。好的，我明白了，您指导我解决了很多的困惑，非常感谢您的耐心解答！
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小新2018
用户贤的小石子儿你好，定量引物设计跨内含子的目的就是为了排除DNA污染的干扰，所以最好是跨外显子的，但是在特殊情况下，不夸也可以。抱歉，还想再请教您最后一个问题，就是内参和目的基因的ct值有区间吗？现在出的结果内参16左右，一个目的基因ct值27左右，另外一个目的基因21左右，两个目的基因的表达是正相关的，这样的结果可以吗？
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贤的小石子儿
用户小新2018抱歉，还想再请教您最后一个问题，就是内参和目的基因的ct值有区间吗？现在出的结果内参16左右，一个目的基因ct值27左右，另外一个目的基因21左右，两个目的基因的表达是正相关的，这样的结果可以吗？大家互相交流，我自己也可以复习，双赢。Ct值是有区间的，一般认为内参在15～25都是可信的，目的基因在35之内，超过了可以认为是不表达。当然这个也是众说纷纭，我现在的基准是这个。
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小新2018
用户贤的小石子儿大家互相交流，我自己也可以复习，双赢。Ct值是有区间的，一般认为内参在15～25都是可信的，目的基因在35之内，超过了可以认为是不表达。当然这个也是众说纷纭，我现在的基准是这个。好的呢，非常感谢您！
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贤的小石子儿
用户小新2018好的呢，非常感谢您！不客气。
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