【求助】Takara 的cDNA文库构建试剂盒??
2007-05-22
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li_ziang
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我做cDNA文库,购买的就是TaKaRa的.但我是单个买的.单买的AMV,单买的RNase Inhibitor..........没买试剂盒用.根据前届学长讲试剂盒没有单买的好用.
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wxg402
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我也准备单买,比较便宜。。
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applepie118
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做酵母双杂交吧,这个试剂盒还可以,但是应用的SMART技术虽然可以得到全长CDNA,缺点是缺乏大片断,在VIP数据库中有一篇文章,是使用一定的方法,改善SMART技术以提高大片断的含量,我试过觉得非常不错,你可以试一试,而且做SMART技术对于温度的准确性要求很高,一定要找一台号的PCR仪器,而且这个PCR中有一步骤是LD-PCR,有的PCR仪器可以直接设置每一次循环增加5分钟,有的却不可以
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txm1021
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很感谢各位的指导,我要构建的是植物CDNA噬菌体文库,而TAKARA的是质粒文库,看过不少文献报道用得最多是SMART技术构库,但由于当前该技术涉及专利问题,全世界都停止销售。还有的是用Stratagene公司文库构建试剂盒,但贵得可怕,八折后也要1.8万,还不算MRNA纯化试剂,我们实验室目前还没有人构过文库,我现在不知道是买试剂盒还是自己单买试剂做?老板说给我两万元,对一个硕士来说,已算多了。总RNA要先纯化才用于构库,mRNA纯化试剂盒我又该如何选择?我学的是发酵专业,但做的是分子生物学方面的东东,烦请各位战友给我指点一下......谢谢大家
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vivien76
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用TaKaRa的试剂盒发表的文章很少啊,在国际上能被承认吗?
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gushaohua007
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我建的是昆虫触角的CDNA文库用的是Clontech的SMATRcDNALibraryConstruction试剂盒货号634903另外再加上做LD-PCR的试剂盒Advantage2PCRKit就行了货号639207两个加起来我花了大概是不到8000块钱吧
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gushaohua007
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另外,SMART建CDNA文库是可以直接用总RNA,不必纯化mRNA.
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