Thawing Cells (Schreiber's protocol)
来自 : 蚂蚁淘
ThawingCells(Schreiber"sprotocol)
- Thawvialquicklyin37°Cwater.Caution-vialcanexplode.
- Transfercellstosterile,15mLcentrifugetube.
- Add50µlwarmFBS(fetalbovineserum,heatinactivated),wait1minute.
- Add100µlFBS,wait1minute.
- Add200µlFBS,wait1minute.
- Add400µlFBS,wait1minute.
- Add800µlFBS,wait1minute.
- Centrifugefor5minutesat1000rpm.
- Afteraspiratingsupernatant,resUSPendin5-6mLwarmmedia.
- TransfertoT25(25cm2flask).
- Incubateat37°Cand5%CO2withtopofflaskloose.
- Nextday,checkthatcellsareviableandattached.Pourofforaspiratemedia.Add5-6mLfreshwarmmedia.
- PassageintoT75whencellsbecomeconfluent(somecells,likeRCHO-1neverbecomeconfluent)
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