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Altogen/Neuro-2a Transfection Kit (Neuroblastoma, CCL-131)/8.0 ml/7073
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Altogen/Neuro-2a Transfection Kit (Neuroblastoma, CCL-131)/8.0 ml/7073
品牌 / 
Altogen Biosystems
货号 / 
7073
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Transfection Reagent for Neuro-2a Cells (Neuroblastoma Cells, CCL-131)

  • Proprietary cationic lipids formulation
  • Effective and robust intracellular delivery
  • Kit includes Transfection Enhancer reagent
  • Produces consistent results, lot-to-lot, plate-to-plate, and well-to-well
  • Work in the presence of serum
  • A proven reagent for establishing stable cell lines
  • Download in vitro Neuro2a transfection protocol: [PDF]
  • Download Neuro2a CRISPR/Cas9 transfection protocol: [PDF]
  • Download PowerPoint presentation for Neuro2a cells transfection kit: [PPT]
  • Developed and manufactured by Altogen Biosystems

Transfection Efficiency:

Reagent exhibits at least 71% transfection efficiency of siRNA delivery. Transfection efficiency was determined by qRT-PCR.

Transfection Protocol and MSDS:

Download Altogen Biosystems Neuro2a Transfection Protocol: [PDF]

Download MSDS: [PDF]

Neuro-2a Cell Line:

Neuroblastoma is the most frequent extracranial solid tumor in children, and roughly half of the patients experience bone metastasis accompanied by bone pain, leading to poor prognosis for those affected. The Neuro-2a cell line was established from brain tissue of an albino house mouse (Mus musculus) with neuroblastoma. These cells exhibit neuronal and amoeboid stem cell morphology, making them uniquely useful for scientific study. Also, the Neuro-2a cell line is susceptible to herpes simplex virus, human poliovirus 1, and vesicular stomatitis virus. Neuro-2a cells have been known to create large amounts of microtubular protein. Neuro-2a cells make for reliable transfection hosts due to their neuronal and amoeboid morphology. Altogen Biosystems offers in vitro transfection reagents delivering satisfactory results, including a liposome formulation Neuro-2a transfection reagent kit for neuroblastoma cells that yields high transfection efficiency and is considered an appropriate host for studying brain tumors.

Data:

Neuro2a Transfection Kit

Figure 1. Cyclophilin B silencing efficiency was determined by qRT-PCR in Neuro2a cells transfected by Cyclophilin B siRNA or non-silencing siRNA control following the recommended transfection protocol. Cyclophilin mRNA expression levels were measured 48 hours post-transfection. 18S rRNA levels were used to normalize the Cyclophilin B data. Values are normalized to untreated sample. Data are presented as means ± SD (n=6).

Neuro2a-cells-transfection-protocol

Figure 2. Protein expression of Cyclophilin B in Neuro-2a cells. DNA plasmid expressing Cyclophilin B or siRNA targeting Cyclophilin B were transfected into Neuro-2a cells following Altogen Biosystems transfection protocol. At 72 hours post-transfection the cells were analyzed by Western Blot for protein expression levels (normalized by total protein, 10 µg of total protein loaded per each well). Untreated cells used as a negative control.

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Neuro-2a Transfection Kit

Altogen Biosystems:
Altogen Biosystems is a life sciences company that manufactures over 100 cell type specific and pre-optimized transfection kits, electroporation buffers, and targeted in vivo delivery kits and reagents. Advanced formulation of reagents and optimized transfection protocols provide highly efficient intracellular delivery of biomolecules (proteins, DNA, mRNA, shRNA and siRNA, and small molecule compounds). Read more about transfection technology at Altogen’s Transfection Resource.

Altogen Labs Research Services:

Altogen Labs provides GLP-compliant contract research studies for pre-clinical research, IND applications, and drug development. Biology CRO services include: Xenograft models (30+), development of stable cell lines, ELISA assay development, cell-based and tissue targeted RNAi studies, safety pharm/tox assays, and other studies (visit AltogenLabs.com).

Volume Options:

  • 0.5 ml (Catalog #6872)
  • 1.5 ml (Catalog #6873)
  • 1.5 ml CRISPR (Catalog #2184)
  • 8.0 ml (Catalog #7073)

AltogenBiosystems是一家开发和制造用于生命科学研究,药物发现和开发的转染试剂盒的生物技术公司。转染试剂盒针对特定癌细胞系和原代细胞培养进行了优化,可将生物分子有效递送到靶组织中。通过先进的试剂配方和优化的转染方案实现体外(癌细胞系)和体内(动物组织靶向试剂、癌细胞系)递送货物分子,包括质粒DNA,各种类型的RNA(mRNA,siRNA,shRNA,microRNA),蛋白质和小分子研究。 


Altogen生命科学公司致力于研发,生产和销售特定细胞系的转染试剂,用于细胞间生物分子的传递,并通过对转染试剂类型的设计将siRNA和质粒DNA有效地转入不同的细胞系和原代细胞内。Altogen公司开发的聚合物,脂质体,纳米粒子为基础的转染技术分别针对分子生物学,组合化学,和细胞生物学而分别应用。Altogen定制服务提供符合GLP要求定制研究服务,包括代稳定的细胞系,细胞银行和冷冻保存,焦磷酸测序,克隆,RNA干扰(RNAi)和基因沉默服务,发展分析,siRNA文库筛选,并转染服务。稳定的肿瘤细胞株和原代细胞的产生,可以是非常昂贵和费时。该公司的细胞培养科学家的细胞株的选择,无论是利息或shRNA表达载体的稳定表达的基因改造。标准的RNAi技术服务,包括设计与合成的siRNA的利益,验证siRNA的沉默效率,siRNA转染条件的优化,使高效的基因沉默细胞系或原代培养细胞的靶基因。转染培养细胞的瞬时或稳定的引入外源性分子和遗传物质(即RNA或DNA),通常是在生物实验室用来研究基因功能,基因表达的调节,生化映射,突变分析,和蛋白质的生产。科学家利用各种载体分子,这种分子,使质粒DNA(PDNA),信使RNA(mRNA),短干扰RNA(siRNA),小分子RNA(miRNA)的,并进入肿瘤细胞株和原代细胞的蛋白质的基因交付。不幸的是,无单提货的方法或转染试剂,可以适用于所有类型的细胞,细胞的细胞毒性和转染效率显着不同,取决于试剂,协议,并正在利用细胞类型。Altogen生物系统公司提供超过60种类型的细胞的预优化转染试剂盒。纳米粒子,脂质和聚合物基ALTOGEN®在体内转染试剂,使交付功能的RNA和DNA分子在体内。PEG脂质体在体内输送系统减少由于PEG修饰的先天免疫反应,并提供高效的siRNA转染的DNA,并在体内的蛋白质。由科学“杂志(2010年12月17日):PEG脂质体在体内转染试剂盒siRNA的特色Altogen生物系统功能的特定细胞系转染试剂盒


120+细胞转染试剂和活体组织靶向试剂盒制造商AltogenBiosystems是一家生物技术公司,开发和制造用于生命科学研究、药物发现和开发的转染试剂盒。Altogen®体内转染试剂可有效地将生物分子导入靶组织。细胞转染试剂盒针对特定的癌细胞系和原代细胞进行了优化。通过先进的试剂配方和优化的转染方案实现货物分子(DNA、RNA、蛋白质)的高效传递。AltogenBiosystems利用高分子化学、分子和细胞生物学的专业知识,开发了新的体内外给药技术。转染是将外源分子导入培养细胞中,常用于研究基因功能、基因表达调控、生化定位和蛋白质生产。不幸的是,由于细胞毒性和转染效率的差异很大,并且取决于所使用的试剂、方案和细胞类型,因此没有一种单一的传递方法或转染试剂可应用于所有类型的细胞。AltogenBiosystems为120多个癌细胞系和原代细胞类型提供优化的转染试剂盒和电穿孔产品。体内转染试剂可实现组织靶向给药。Altogen的转染试剂盒包括用于体外(癌细胞系)和体内(用于动物研究的组织靶向试剂)转染的转染增强剂试剂和转染复合物冷凝器。Altogen实验室提供符合GLP的实验室合同研究服务。我们的生物CRO服务包括异种移植物的疗效、IND应用的pharm/tox研究和安全性测试、分析开发(ELISA、IC-50、qPCR)、90多个异种移植物动物模型、RNAi和基因沉默服务。Altogen的细胞培养科学家通过在28天内培育出稳定的细胞系,将选择的细胞系转化为稳定表达感兴趣的基因。

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Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。原理与Sou 查看更多>
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SABC(Strept Avidin-Biotin Complex)法是一种显示组织和细胞中抗原分布的简便而敏感的免疫组化染色方法,是众多免疫组织化学方法的一种。... 查看更多>
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1、问:免疫荧光:用免疫荧光方法做同样的内容,组织切片和培养细胞,两者操作过程中有哪些不同?参考见解:只是固定方法不同,细 查看更多>
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免疫组化和免疫荧光的区别 123
╭⌒°1285____2017-10-02
免疫组化和免疫荧光都是蛋白定位的检测(也就是确定蛋白是表达在细胞核/浆/膜)。
免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜的现像和放大作用,在细胞,亚细胞水平检测各种抗原物质,并可在原位显示相应的基因和基因表达产物。免疫组织化学技术现已有:免疫荧光组织(细胞)化学技术、免疫酶组织(细胞)化学技术、亲和组织化学技术、免疫金银及铁标记免疫组织化学技术等。免疫荧光组织(细胞)化学技术是采用荧光素标记的已知抗体(或抗原)作为探针,检测待测组织、细胞标本中的靶抗原(或抗体),形成的抗原抗体复合物上带有荧光素,在荧光显微镜下,由于受高压汞灯光源的紫外光照射,荧光素发出明亮的荧光,这样就可以分辨出抗原(或抗体)的所在位置及其性质,并可利用荧光定量技术计算抗原的含量。以达到对抗原物质定位、定性、定量测定的目的。
免疫组化中,所染色的蛋白的位置与该蛋白的特性有关系。在现有所研究的蛋白中,不少蛋白存在核转位的情况, 也就是说当细胞培养的环境或者刺激的因素不同,该蛋白会出现从胞浆到细胞核的表达位置的改变。有时候表达不变仅仅是从胞浆转位到细胞核,有时候还伴有表达的上调,比如nf-kb。
两个作用。一是保湿。在BSA封闭之后,加一抗,一般是37°C一小时,或者室温2小时,或者4°C过夜。无论怎样,时间都比较长,抗体容易干掉,干掉之后染色或者荧光就标不出了。所以,加入一抗之后,放入一个可以密封的盒子里,再放一些湿的滤纸或者海绵,可以有效的防止片子干掉。二抗同理。二是避光。有些二抗上面的发光剂需要避光,否则荧光容易淬灭。湿盒一般是用不透明的材料做的,盖上盖子之后可以保证一个暗室环境。湿盒可以自己做的。一般的小的铝饭盒都可以,放点海绵滤纸棉花什么的进去,用的时候加点水就行=)

我是做肝细胞肝癌和胆管细胞癌的免疫组化

这是之前的抗体做出来的效果,EDTA修复,1:400的浓度(抗体100微升,0.1mg/ml,价格3000多),效果很好。




后来过期了,就又买了一支(抗体100微升,0.2mg/ml,价格7000多,贵很多),过程一样,EDTA、高压、酶修复,浓度1:200300350400500都试过,4度过夜、封闭等,都试过,就是做不粗来。

现在就是淋巴细胞强阳,肿瘤不阳,谁能帮我看看什么原因。我已经找不到什么理由了




HER2阴性这是一个啊免疫指标,这种指标如果强阳性的话可以应用一种靶向药物。可以提高化疗的有效率,对肿瘤治疗效果比较好,现在如果乳腺癌免疫组化三个加号。都是推荐应用该要的。也阴性的患者,不见因为。因为收益率非常低
免疫组化检查多少钱?__123
游客军团ra2017-10-02
免疫组化根据所做的指标的个数收费,比如做10个就收10个免疫组化,每个收费40-160元左右(每个省的定价不一样)。
免疫组化在临床工作的意义近年来,随着免疫组织化学技术的发展和各种特异性抗体的出现,使许多疑难肿瘤得到了明确诊断。在常规肿瘤病理诊断中,5%-10%的病例单靠H.E.染色难以作出明确的形态学诊断。尤其是免疫组化在肿瘤诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可,其在低分化或未分化肿瘤的鉴别诊断时,准确率可达50%-75%。免疫组织化学的临床应用主要包括以下几方面:(1)恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断;(2)确定转移性恶性肿瘤的原发部位;(3)对某类肿瘤进行进一步的病理分型;(4)软组织肿瘤的治疗一般需根据正确的组织学分类,因其种类多、组织形态相像,有时难以区分其组织来源,应用多种标志进行免疫组化研究对软组织肿瘤的诊断是不可缺少的;(5)发现微小转移灶,有助于临床治疗方案的确定,包括手术范围的确定。(6)为临床提供治疗方案的选择。
简单来说,就是用不同的试剂来染色标记组织,根据反应和显色情况,判断组织细胞的表面抗原、细胞内物质的成分,以明确病理改变、病理类型,协助诊断和治疗。这个东西会用到很多的试剂盒,所以相对来说会比较贵。
单靠免疫组化的方法是不能定量,定性的。

Bone Mesenchymal Stem Cells 作为一个细胞群体,还没有发现有特定细胞表面marker. 对于那些可以代表自我更新和分化的marker, 也不清楚到底要发现哪一个的表达才能确定该细胞就是BMSC。

目前常用的方法,就是采用培养,colony-forming unit-fibroblasts (CFU-F)这个方法。一般BMSC可以24-48小时贴壁。

流式细胞计数,比如STRO-1,但是一般认为STRO-1阳性的细胞更趋向于造血干细胞,和BMSC简单区别还不是很清楚。

这里有个培养分化的产品
http://www.rndsystems.com/pdf/SC020.pdf
那要看你检测什么了,通常检测GAG用阿新蓝染色或甲苯胺蓝,检测胶原当然是免疫组化染色最好,如果没条件就用MASSON三色吧!
一·第二代聚合酶两步法( PV,En Vision) PV-9000是2001年投入美国市场的,它是将二抗抗体分子的单价Fab段与酶聚合在一起,与一抗结合后,直接用底物进行显色的方法。此方法由于简单、快速、敏感性强且避免了内源性生物素所造成的背景染色,以有逐渐取代其他免疫酶组织化学检测方法的趋势。 PV法操作流程 1石蜡切片脱蜡至PBS。 2 0.3%H2O2甲醇液或3%H2O2室温孵育20min。 3 抗原修复。 4滴加适当稀释的一抗370C 60min或40C过夜。 5 PBS洗涤。 6 酶标记二抗370C 30min或室温60min。 7 DAB(0.04%)显色(镜检控制),水洗、复染、封片二·sp法是一抗+生物素化二抗+HRP标记的链霉卵白素(HRP标记的亲和素) 一般的sp法步骤啊,具体如下: 1.烤片,68℃,20分钟, 2. 常规二甲苯脱蜡,梯度酒精脱水;二甲苯I 20min --二甲苯II 20 min--100%酒精I 10min --100%II 10min --95% 5min-- 80% 5min-- 70% 5min 3.阻断 灭活内源性过氧化物酶:3%H2O2 37℃孵育10min,PBS冲洗3X5min; 4. 抗原修复:置0.01M枸橼酸缓冲液(PH 6.0)中用煮沸(95℃,15-20min),自然冷却20min 以上,再用冷水冲洗缸子,加快冷却至室温,PBS冲洗3X5min。 5. 正常羊血清工作液封闭,37℃10 min,倾去勿洗. 6. 滴加一抗4℃ 冰箱孵育过夜,PBS冲洗3X5min(用PBS缓冲液代替一抗作阴性对照); 滴加生物素标记二抗, 37℃孵育30min, PBS冲洗3X5min; 7. 滴加辣根过氧化物酶标记的链霉素卵白素工作液,37℃孵育30min, PBS冲洗3X5min; 8. DAB/ H2O2反应染色,自来水充分冲洗后, 苏木素复染,常规脱水,透明,干燥,封片。三·检测试剂盒 灵敏度高而极易控制背景的检测系统试剂盒是最为理想也是免疫组化染色优劣的关键,根据免疫组化技术发展至今PV系列及SP试剂盒更优于其它试剂盒。检测系统应与一抗来源相匹配,否则检不出目的物。如一抗是鼠单或多抗的,二抗就应该是羊或兔抗鼠的。四·建议选SP,亦可根据实验室习惯及在组织中的表达情况来定
在确诊乳腺癌的检查中,对穿刺活检和手术活检取得的组织,都要做常规病理检查。免疫组化是对取下的人体组织做进一步的处理,进行特殊的染色,这对于明确是不是癌症、是什么类型的乳腺癌有很大的帮助。如果常规病理尚不能确定肿块的性质,则需要进行免疫组化染色,以进一步明确疾病的性质。