请使用支持JavaScript的浏览器! 【请教】抗原蛋白不纯得到的抗血清如何纯化_蚂蚁淘商城
【请教】抗原蛋白不纯得到的抗血清如何纯化
2006-02-15
问题描述:

his-tag的蛋白,40多kD,提的包涵体,溶解后有不少杂带,大小条带都有,相对量倒是不大。现在兔子已经四免了,得到了抗血清。该如何纯化血清,得到较多的针对目的蛋白的抗体呢。
可以先用柱子提纯包涵体里的his-tag蛋白,然后再IP么?
谢谢

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kmraptor
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既然你的his-tag蛋白不纯就不能用亲和层析纯化,如果要得到抗体可以用proteinA纯化,但得不到特异的抗体.
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qianqun
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其实是这样的,我免疫兔子的样品少纯化了一步:即从溶解的包涵体里提纯his-tagged的目的蛋白(当时想省事,没想现在费死事了)我想问问;能否用Cobeads先提纯目的蛋白,然后从抗血清里“钓”相应的抗体,然后洗脱抗体?但不知抗原抗体结合,和抗体洗脱用什么buffer
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