Peroxidase(POD)Horseradish辣根过氧化物酶
人一鼠嵌合抗体与鼠单抗相比,免疫原性大大降低,利于在人体内应用,所以目前已制备出上百种抗各种抗原(包括肿瘤相关抗原)的嵌合抗体。
尽管嵌合抗体的免疫原性已降低很多,但有时它仍可能引发较强的免疫反应。为了进一步降低抗体的鼠源成分,发展出CDR移植技术。
CDR移植即把鼠抗体的CDR序列移植到人抗体的可变区内,所得到的抗体称CDR移植抗体或改型抗体,也就是人源化抗体。
全合成法是以人抗体序列为骨架,以鼠抗体的CDR置换人抗体的CDR,将整个可变区序列的两条链分解成若干片段,并使相邻的片段具有彼此互补的粘性末端。合成所有DNA片段,每组片段分别退火,然后逐组连接成完整的可变区基因,插入质粒中,进一步即可用于构建和表达改形抗体。
DR序列合成几种突变引物,用定点突变的方法将人的可变区基因的CDR序列变为鼠抗体的CDR序列,然后表达出改型抗体。
研究表明,在构建改形抗体时,简单地进行CDR替换并不能保证抗体具有好的亲和力,因此在构建时还必需包括对影响抗原结合位点的空间结构的框架序列进行操作。
小分子抗体包括Fab、Fv或ScFv、单域抗体及zui小识别单位等几种。
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