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求助:蛋白定量检测有干扰物质Zn离子和表面活性剂,该如何检测蛋白含量?
2021-08-11
问题描述:

待测蛋白样品中含有Zn离子和表面活性剂,使用BCA测定后,发现与标准品相差很大

bradford法测定又担心表面活性剂的影响,由于蛋白样品是生物样品很杂,也无法选择紫外吸收检测

希望高手可以指点一下!

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ksharp98
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推荐用BCA法,兼容一定浓度的去污剂。如果蛋白浓度不低的话,你把样品用纯水稀释20倍后再测,空白孔用纯水代替,不要怕蛋白浓度太低测不出来,你可以查阅一下你BCA试剂盒的线性范围。一般来说都没问题,我们提蛋白用的RIPA buffer(强)里面就含有SDS 。
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whocallmenolan
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展开引用ksharp98推荐用BCA法,兼容一定浓度的去污剂。如果蛋白浓度不低的话,你把样品用纯水稀释20倍后再测,空白孔用纯水代替,不要怕蛋白浓度太低测不出来,你可以查阅一下你BCA试剂盒的线性范围。一般来说都没问题,我们提蛋白用的RIPAbuffer(强)里面就含有SDS。......但是我的蛋白样品的含量已经零界最低检测线的25ug了,每次次的时候就在50ug左右波动,我的Zn的干扰很大,单独同样量的Zn就会使BCA有差不多25ug的吸收了
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