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流式细胞仪可以做细胞内某种蛋白定量吗
2018-01-17
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ylgtwcat
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可以,这个和western定量的原理类似,需要有标准品来作比对。不过很难。因为流式主要是用来最相对量的比较的。细胞内的蛋白,用荧光标记的单克隆抗体识别后,用流式可以测出每个细胞的相对荧光强度。有一种特异性的微球,可以吸附一系列不同定量分子数的抗体。这种微球吸附同样的荧光抗体,可以做出荧光强度和所吸附抗体分子数量的标准曲线。然后拿细胞检测的荧光强度和这个标准曲线对比,得到细胞内所结合的抗体数。因为单克隆抗体只结合相同的抗原表位,所以可以推算出细胞内蛋白的分子数量了。解释结果的时候要考虑到抗体的特异性和染色的效果等影响因素。
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