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acdbio/RNAscope® HiPlex12 Ancillary Kit/324140
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acdbio/RNAscope® HiPlex12 Ancillary Kit/324140
品牌 / 
acdbio
货号 / 
324140
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Overview

Description

RNAscope® HiPlex12 Ancillary kit is designed to work with RNAscope HiPlex8 Reagent Kit (PN 324100) for 12 plex fluorescent in situ hybridization. It contains RNAscope HiPlex12 Ancillary Reagents (PN 324120) and RNAscope HiPlex Cleaving Stock Solution (PN 324130). RNAscope HiPlex Image Registration Software (PN 300065) is required for adequate imaging.
Sample Type Compatibility
Fixed frozen tissue, Fresh frozen tissue

RNAScope Workflow

  • Permeabilize
  • Hybridize
  • Amplify
  • Visualize

Specifications

Shipping temperature(°C):4 °C
Storage temperature(°C):4 °C
Shelf life:9 months from the date of manufacturing.
  • * Please check expiration dates on the reagent package
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    2021-08-14
    1、 取对数生长期细胞一个T75或T25瓶。2、 将培养基换成10ml DMEM(H)+10%FBS+0.1ug/ml秋水仙素的培养基,处理1~2小时。3、 将细胞培养液倒掉,马上加入3~4ml 0.1%胰蛋白酶,并立即摇晃0.5~1min。当在显微镜下看到分裂相细胞脱壁后,马上加入终止液终止消化,并将分裂相细胞收集 查看更多>
    contributed by Patricia TsaoThis protocol will visualize both internalized receptors that were once on the plasma membrane and receptors in the biosynthetic pa 查看更多>
    Rhodamine-Phalloidin/Calcofluor StainingDavid AmbergGrow 50 mls of yeast to 5x10E6. Add formadehyde to the media to 4% (33 mls. of 10%). Fix in media at temper 查看更多>
    一、原理 人的羊水细胞能长成单层并可连续进行传代培养,但它们的一些特征与一般成纤维细胞不同。在羊水中存在着各种不同类型的胎儿细胞,依据其外形和生长特征可区分为以下三类:上皮细胞(E)、成纤维细胞(F)和羊水细胞(AF)。E细胞在胰酶消化的连续培养中不再生长,所以在培养过程中的 查看更多>
    1.AimPlex流式高通量多因子检测技术特点 基于流式细胞术的高通量多因子检测技术----AimPlex Multiple Immunoassays for Flow,结合了酶联免疫吸附实验(ELISA)、微球技术和流式细胞术(Flow Cytometry)等方法,能同时对对少量样本中多种可溶性蛋白进行高通量检测。近年来,基于微球的多指标检测技术得到广泛的推广,与传统ELISA技术只能检测一个指标相比,该技术能够实现从一份标本 查看更多>
    Materials to be prepared beforehand:1) FBS free medium2) 10% FBS medium3) Cell migration filter insert ( Transwell®, 12mm Diameter, 12 μm Pore Size.)Proced 查看更多>
    Preparing a cell block from cell lines / cell suspensions.Cell lines or purified cell suspensions are a valuable tool to provide known positive controls provid 查看更多>
    DAPI Staining To visualize DNA, incubate fixed samples with 100 ng/ml 4",6"-diamidino-2-phenylindole hydrochloride (DAPI) in PBS for 30 min. Rinse 3x with PBTw 查看更多>
    免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物,再用这种荧光抗体(或抗原)作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受激发光的照射而发出明亮 查看更多>
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    LacZ-cell Staining Materials: 1) 0.5% glutaraldehyde in PBS 2) 20mM K4Fe(CN)6o3H2O 0.44g into 50 ml PBS 3) 20mM K3Fe(CN)6 0.33g into 50 ml PBS 4) X-gal 2% in D 查看更多>
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    请问荧光PCR获得的数据如何处理成扩增曲线,还有标准曲线怎么做啊?有没有什么资料可参考?
    荧光染料按照化学架构分属于什么染料
    这些染料的结构式基本是保密的。有些地方能查到,象维基上就有SYBR Green的结果式,但谁也不能肯定是否是正确的。
    做荧光定量PCR的TAKARA的SYBR荧光染料保存于-20摄氏度了,说明书上说要放于4摄氏度保存,放-20的话会影响SYBR荧光染料的效果。

    现在已经保存于-20度了,而且经过了很多次的反复冻融,这样对实验结果的影响有多大?
    一般情况,不管荧光染料还是其他染料,只要不是活性染料和还原染料,基本上都不存在失效问题。
    你的荧光染料具体是哪一种?你可以通过染色试验来决定是否有效啊?一般荧光染料染色后,都会呈现明亮的颜色,比一般同样颜色要亮的多。只要能染上、只要有亮度,就是没失效。
    罗丹明B,
    荧光染料是研究生物学围观世界特别是核酸时最常用的示踪工具之一,楼主想要详细的了解的话,可以去专业的网站上面找找看,有空的话可以去生物帮那里查看一下。我比较喜欢去那里查找资料的。这个网站蛮专业的。我记得上面有一个介绍了分子生物学实验和细胞学实验中常用的荧光染料文档,还对荧光染料的使用提出了自己的看法。你可以参考一下啊。有时间就去那儿上面( YINGG.www.bio1000.com/ )找找看啊,希望可以帮到你啊
    请教大家问题:我做的QPCR扩增同一个模板,结果熔融温度分别是74.45,74.17,75.71,75.09,75.21,73.93等,多数在74-75之间,73左右的就一个数值。原来做过用相同的模板扩增,熔融温度是》74《75之间的数值,熔融峰为单峰,且确定是目的基因,不是引物二聚体。并且,相同的标准品时隔一段时间(-80度保存),不同时间做PCR,结果CT值差别较大。有以下的疑问想和大家一起讨论:
    1.熔融温度为75,74,73度的样品是否是同一个产物?熔融温度为56度的是不是没有扩增产物?
    2.为什么相同的标准品不同反应CT值差别这么大?是不是荧光染料降解?我用的是试剂盒中的扩增酶,还没用几次。
    3.扩增曲线的形态是否说明标准品已经有降解?
    4.另外,我原来做CDNA梯度稀释做的挺好,可是这个直接是RNA为标准品,我用一步法进行QRT-PCR。标准品梯度稀释线性效果不稳定,有的时候好,有的时候不好。请假大家有没有好的建议?
    附件中有扩增曲线和熔融曲线,请大家帮忙分析,谢过了!

    新建MicrosoftOfficeWord文档.docx(46.18k)
    各位好!
    附件中是我的标准曲线结果,标准品按照10x稀释,荧光染料是SYBR,可是在荧光强度与CT值的关系图中,曲线间的行距还可以接受,但是在LOG荧光值与CT值的关系曲线中,曲线怎么那么难看呢?为什么他们之间的行距不是相等的呢?我以前做的曲线很漂亮的,这是什么原因呢?影响定量的结果吗?并且在样品中也出现这么难看的曲线,就是指数增长期曲线不平滑,是什么原因呢?

    切盼高手指点!!!

    standardcurve.doc(49.0k)
    想问一下各位大侠提质粒时用的是那个公司的试剂盒呀?我的扩增荧光增量一直不是很高,而且作为被动参比的ROX信号比FAM的基线部分高很多,不知是不是质粒的质量不好造成的。
    所以想请大家给推荐一个效果好的最好是国产的质粒提取试剂盒。
    多谢!
    因外用杀精避孕药机理研究的需要,求助目前较新的有关精子流式细胞检测的实验资料,请各位大侠不吝赐教!
    我想做实时荧光定量PCR,是荧光染料法,仪器是Roche公司的,做绝对定量,想自己制备目标基因标准品,如何办.请指教.
    各位同盟,有谁在做甲基化的荧光定量PCR吗?小女子有诸多问题求救~~~~

    甲基化的荧光定量pcr的标准品是不是用完全甲基化的DNA和完全非甲基化的DNA,具体应该怎么操作啊?

    我打算用sybrgreen作为荧光染料

    用相对荧光定量还是用绝对荧光定量呢.......恳请各位指教!