FluorescenceReferenceStandardsarelabeledwithspecificFluorochromessothattheygiverisetothesamefluorescencespectraascellslabeledwiththesamefluorochromes.FluorescenceintensityissimilartoBIOLOGicalsamples.
Atestrequiresonedrop(50μl)ofparticlesUSPension,whichisequivalentto~100,000particles.BangsFlowCytometryStandardsare7-9μmindiameter(unlessotherwisenoted)toapproximatethesizeofhumanlymphocytes.
Availableinthreetestsizevolumes:
A-20tests(1ml)
B-100tests(5ml)
C-280tests(2x7ml)
polysciences是一家化学品制造公司，产品广泛应用于各个科研领域。公司成立于1961年，起初为电子显微镜提供纳米级样本制备方案，帮助科学家揭示未知领域。随后，开拓了在病理（组织研究）应用产品，使组织除了石蜡包埋外，还能够包埋在塑料块中；开发染料和染色剂，以实现更好的样品观测方式。与政府机构合作，开发了用于诊断试剂盒应的聚合物微球。与美国国家癌症中心合作，开发天然产物分离和纯化产品，并用于紫杉醇的初步临床试验。继而开发出超顺磁珠，用于DNA、蛋白质和肽的研究。Polysciences的高纯度单体和聚合物产品在医疗器械中有许多应用，并不断开发和增强其性能。近期业务扩展到电子产品，Polysciences的精密微粒子产品拓展了纳米技术应用中测量精度。公司秉承为应用而研发，目前已拥有超过3000种产品。PolysciencesInc.致力于提供先进的技术、制造能力和技术支持，帮助客户实现他们的目标。
Polysciences, Inc. 成立于1961年，总部位于宾夕法尼亚州沃灵顿，是一家生产研发化学产品的公司。该公司的产品种类已经累计超过3000种，其产品的特点是体积小，附加值高。
Polysciences产品主要包含：
1、 单体和聚合物
2、 微球和粒子（有机、无机、可生物降解、磁珠、荧光素、染料、特异性抗体和蛋白包被颗粒，直径从40nm到10mm）用于核酸提取、蛋白分离和纯化等。
3、 高性能粘合剂、涂料和密封剂
国际上推出了一些阳离子聚合物基因转染技术，以其适用宿主范围广，操作简便，对细胞毒性小，转染效率高受到研究者们的青睐。其中树枝状聚合物（Dendrimers）和Polysciences聚乙烯亚胺（Polyethylenimine，PEI）的转染性能最佳，但树枝状聚合物的结构不易于进一步改性，且其合成工艺复杂。Polysciences聚乙烯亚胺是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子，每相隔二个碳个原子，即每“第三个原子都是质子化的氨基氮原子，使得聚合物网络在任何pH下都能充当有效的“质子海绵”(protonsponge)体。这种聚阳离子能将各种报告基因转入各种种属细胞，其效果好于脂质聚酰胺，经进一步的改性后，其转染性能好于树枝状聚合物，而且它的细胞毒性低。大量实验证明，PEI是非常有希望的基因治疗载体。目前在设计更复杂的基因载体时，PEI经常做为核心组成成分。
转染技术新宠-Polysciences阳离子聚合物基因转染技术
其优点：适用宿主广泛，操作简便，细胞毒性小，转染率高。其中聚乙烯亚胺（PEI）的转染性能最好。聚乙烯亚胺是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子，每相隔两个碳原子，就是第三个原子都是质子化的氨基氮原子，使得聚合物网络在任何PH下都能充当有效的“质子海绵”体。这种聚阳离子能将各种报告基因转入各种种属细胞，其效果好于脂质聚酰胺，而且细胞毒性低。大量实验证明，PEI是非常有希望的基因治疗载体。目前在设计更复杂的基因载体时，PEI经常做为核心组成成分。
Polysciences线性聚乙烯亚胺（LinePEI）转染复合物的细胞毒性低，有利于细胞定位，而且转染率极高。
Polysciences公司的两款明星产品线性聚乙烯亚胺（23966-1和24765-1）近年来越来越多的受到研究者们的青睐。其产品被运用到大量的转染实验中，也出现在大量的文献中。
聚乙烯亚胺（Polyethylenimine，PEI）是聚乙烯亚胺是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子，每相隔二个碳个原子，即每“第三个原子都是质子化的氨基氮原子，使得聚合物网络在任何pH下都能充当有效的“质子海绵”(protonsponge)体。PEI，可用作转染试剂，它可以缩聚DNA分子形成颗粒并转染真核细胞。有实验证明，分子量为25000的线性PEI即Polysciences 23966转染效率zui高。
美国POLYSCIENCES公司成立于1961年，主要生产和经营LIFESCIENCES生命科学（胶体金,不含甲醛的甲醇等），病理学和显镜学微球和粒子和磁珠各种单体和聚体等产品。polysciences公司是世界上zui大zui全的多聚化合物供应商,同时是世界*的免疫学,组织化学试剂耗材供应商.
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一、原理 人的羊水细胞能长成单层并可连续进行传代培养，但它们的一些特征与一般成纤维细胞不同。在羊水中存在着各种不同类型的胎儿细胞，依据其外形和生长特征可区分为以下三类：上皮细胞（E）、成纤维细胞（F）和羊水细胞（AF）。E细胞在胰酶消化的连续培养中不再生长，所以在培养过程中的
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Exalpha Biologicals produces and sells products for Life Science Research, including monoclonal and polyclonal antibodies, for use in immunohistochemistry, wes
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概述及注意事项：细胞学检查包括有细胞的涂片与染色技术，其来源先于组织切片技术，目前是较为常用的病理检查方法之一。它所运用的范围也很广泛，如女性生殖系统、食管、胃、肺、浆膜腔积液、泌尿管道、鼻咽部等部位的脱落癌细胞，以及胸、腹腔的肿块、淋巴结、乳腺、和其它组织器官的细胞
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METHOD 1:Formaldehyde preservative – 2% formaldehyde solution in protein-free phosphate-buffered saline (PBS).Prepare as follows:Add 2 g paraformaldehyde powde
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Preparing a cell block from cell lines / cell suspensions.Cell lines or purified cell suspensions are a valuable tool to provide known positive controls provid
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DAPI Staining To visualize DNA, incubate fixed samples with 100 ng/ml 4",6"-diamidino-2-phenylindole hydrochloride (DAPI) in PBS for 30 min. Rinse 3x with PBTw
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LacZ-cell Staining Materials: 1) 0.5% glutaraldehyde in PBS 2) 20mM K4Fe(CN)6o3H2O 0.44g into 50 ml PBS 3) 20mM K3Fe(CN)6 0.33g into 50 ml PBS 4) X-gal 2% in D
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Making Boiled Donkey (or whatever) Serum (BDS) for Blocking You want a final working concentration of 5% Serum. Order the serum from the same company and organ
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Steve HahnLast Modified December 1997This method works well when transforming with a plasmid and is rapid. (for highest efficiency transformation, see DMSO tra
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1. 细胞凋亡与白血病Activation of Apoptosis in Vivo by a Hydrocarbon-Stapled BH3 HelixSCIENCE 2004，305:1466-1470 通过对BCL-2蛋白家族BID的BH3结构域进行化学修饰，使其容易穿过细胞膜，在活体内研究其激活血癌细胞发生凋
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contributed by Patricia TsaoThis protocols allows the use of fluorescence microscopy to visualize epitope-tagged receptors expressed by stable adherent cell li
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最近在看文献时，看到realtime－PCR做相对定量的时候，要求目标序列和内参序列的扩增效率必须相等。我现在要做一些基因的相对定量，所以有几个问题想问问主任和各位高手。
1.怎么看两个反应－即目标基因和内参基因是否具有相同的扩增效率？
2.每次PCR反应的扩增情况都有差异，多次反应的扩增效率岂不是都不一样了吗？
3.如何设计才能让相对定量更可行？
由于对
定量PCR的接触不多，希望各位高手多多帮助！谢谢！
想问一下各位大侠提质粒时用的是那个公司的
试剂盒呀？我的扩增荧光增量一直不是很高，而且作为被动参比的ROX信号比FAM的基线部分高很多，不知是不是质粒的质量不好造成的。
所以想请大家给推荐一个效果好的最好是国产的质粒提取试剂盒。
多谢！
http://www.dojindo.cn/products/C/cfse.htm
荧光染料按照化学架构分属于什么染料
这些染料的结构式基本是保密的。有些地方能查到,象维基上就有SYBR Green的结果式,但谁也不能肯定是否是正确的。
荧光染料是研究生物学围观世界特别是核酸时最常用的示踪工具之一，楼主想要详细的了解的话，可以去专业的网站上面找找看，有空的话可以去生物帮那里查看一下。我比较喜欢去那里查找资料的。这个网站蛮专业的。我记得上面有一个介绍了分子生物学实验和细胞学实验中常用的荧光染料文档，还对荧光染料的使用提出了自己的看法。你可以参考一下啊。有时间就去那儿上面（ YINGG.www.bio1000.com/ ）找找看啊，希望可以帮到你啊
快到年关，才准备要做实时定量，但因从没做过，万一设计有误，那损失不堪设想，恳请各位高手帮我看看有没有什么问题：
我要检测的是一个巢氏PCR的终产物，那我能否用首次PCR的产物纯化，稀释后来作
标准品？好象一般都认为用质粒作更好，但我想质粒片段与我样品首次PCR产物的长度不同，扩增效率是不是也有差异？而且用质粒扩增前，是不是要先把质粒酶切成线性后，才能扩？（这个问题好象有点菜）
另外，如果用
荧光染料，那是用预混型试剂好，还是各配各的好？因为据说镁离子浓度对实验影响较大，如果用预混型，不是就不能调离子浓度了吗？
先谢谢各位了。
我是一个新手。做了两次real-timePCR（SYBRGREENI）标准曲线都很差劲，请好心的大侠们帮忙指点迷津。
标准品是用质粒DNA做了。第一个图是按10倍梯度进行稀释,以10^3～10^9copy/μl7个浓度的标准模板系列作为标准品；第二个图是按10倍梯度进行稀释，以50～0.0005ng/ul6个浓度的标准模板系列作为标准品，得到的标准曲线的参数值分别是R^2＝0.87998694<0.99，Slope＝-1.403786（图一）；R^2＝0.9702126<0.99,slope=-1.5033078.
我应该从哪些方面来改进我的实验？紧急求助！
请教大家问题：我做的QPCR扩增同一个模板，结果熔融温度分别是74.45，74.17，75.71，75.09，75.21，73.93等，多数在74-75之间，73左右的就一个数值。原来做过用相同的模板扩增，熔融温度是》74《75之间的数值，熔融峰为单峰，且确定是目的基因，不是
引物二聚体。并且，相同的
标准品时隔一段时间（-80度保存），不同时间做PCR，结果CT值差别较大。有以下的疑问想和大家一起讨论：
1.熔融温度为75,74,73度的样品是否是同一个产物？熔融温度为56度的是不是没有扩增产物？
2.为什么相同的标准品不同反应CT值差别这么大?是不是
荧光染料降解?我用的是
试剂盒中的扩增酶，还没用几次。
3.扩增曲线的形态是否说明标准品已经有降解？
4.另外，我原来做
CDNA梯度稀释做的挺好，可是这个直接是RNA为标准品，我用一步法进行QRT-PCR。标准品梯度稀释线性效果不稳定，有的时候好，有的时候不好。请假大家有没有好的建议？
附件中有扩增曲线和熔融曲线，请大家帮忙分析，谢过了！
新建MicrosoftOfficeWord文档.docx(46.18k)
用不同荧光染料标记的抗体，分别与小鼠细胞和人细胞的细胞膜上的一种抗原结合，两类细胞则分别产生绿色荧光和红色荧光．将两类细胞融合成一个细胞时，其一半呈绿色，一半呈红色．在37℃下保温40min后，细胞上两种荧光点呈均匀分布（如图所示），试问：（1）人...
请问荧光PCR获得的数据如何处理成扩增曲线，还有标准曲线怎么做啊？有没有什么资料可参考？
没图片
既说像坐标画曲线曲线应纵轴该荧光强度吧轴数值变化代表荧光强度变化荧光强度变化代表钙离浓度变化 我觉直接用荧光强度值变化代替钙离浓度变化研究意义该钙离浓度变化吧
非要荧光强度值换算钙离浓度需要做列工作
1 取标准钙离浓度染色用共聚焦显微镜测荧光强度
2 标准品需要同像环境主要曝光间相同激光波及能量
3 标准品要用同浓度荧光染料
才能根据标准荧光强度关系推算品钙离浓度
