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纳米磁珠法植物基因组DNA提取试剂盒
来自 : mayitao
我们公司利用国际领先技术生产的纳米磁珠试剂盒适用于从植物细胞中快速提取基因组DNA。采用独特的试剂系统配合纳米磁珠可以从少量(0.02-0.1g左右)样品中提取几到几十微克的基因组DNA。提取到的DNA可用于多次的PCR反应模板,测序等分子生物学应用,节约您宝贵时间,免去您接触有毒试剂的危险。温馨提示:DNA的得率与样品的类型、储存条件、储存时间长短等有很大关系。以下试剂、器皿需操作者提前准备:无水乙醇,分析纯异丙醇(IPA),β-***,RNaseA1-1000ul移液枪及枪头,1.5ml离心管,磁力分离架,旋涡混合器,高速离心机,研磨棒如发现PD11试剂有些浑浊,在37-70oC水浴中加热几分钟溶解即可第一次使用需准备的溶液:1.加15毫升分析纯异丙醇到WB11试剂瓶里,混合均,并在瓶盖上打勾2.加21毫升无水乙醇到WB22试剂瓶里,混合均,并在瓶盖上打勾1)LysisCellandRemoveProtein取200ul50oC预热的PD11,5ul***,20-200mg植物组织到1.5ml无菌离心管,充分研磨(关系到DNA得率)加400ul50oC预热的PD11,2ul25mg/mlRNaseA(optional)到上步1.5ml离心管,充分混匀50-70oC5minx2(裂解时间5-20min取决于材料本身)加150ulPD22,150ul无水乙醇,混匀,室温5-10分钟13krpm,3分钟2)BindDNAtoNanoBeads(NB)取约700ul上清液体到新的1.5ml离心管中(不要取到下面的碎片)加一倍体积700ulIPA,30ul刚混匀的NB磁珠到上步的离心管,混匀室温5-10min,混匀把上步的离心管放到磁力分离架上3-5min,弃上清3)PurifyDNA加500ulWB11到上步的离心管,混匀放到磁力分离架上,1-3min,弃上清加500ulWB22到上步的离心管,混匀放到磁力分离架上,1-3min,弃上清风干1-3min4)ReleaseDNA加50-200ulEB(Elutionbuffer)到上步的离心管,混匀室温5-10min,混匀放到磁力分离架上,3-5分钟把上清液转到没有DNase的干净离心管里,注意不要取到磁珠测试DNA样品吸光度,每个胶孔加3-10ulDNA溶液跑0.7%胶,DNA保存在-20oC或-80oC
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