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acdbio/miRNAscope™ LS Reagent Kit - RED/324600
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acdbio/miRNAscope™ LS Reagent Kit - RED/324600
品牌 / 
acdbio
货号 / 
324600
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Overview

Description

miRNAscope™ LS Reagent Kit - RED assay is an RNA in situ hybridization (ISH) single-plex, chromogenic -RED assay for use with the Leica Biosystems BOND RX automated IHC/ISH slide staining systems. The automated system provides high throughput, reproducible RNA ISH results with minimal hands-on time. miRNAscope™ LS Reagent Kit - RED includes the pretreatment and detection reagents for automated amplification. Each reagent kit provides enough reagents to stain ~60 slides/tissue sections, each with an area of approximately 20 mm x 20 mm (0.75inx 0.75in).Note: To run miRNAscope™ LS reagents you will need miRNAscope™ LS probes for assay compatibility.
Assay Compatibility
miRNAscope™LS Assay is compatible on the Leica Biosystems BOND RX automated IHC/ISH slide staining systems.
Sample Type Compatibility
Cell Cultures, Cell pellets, FFPE, TMA(Tissue Microarray)

RNAScope Workflow

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Specifications

Shipping temperature(°C):2-8 C
Storage temperature(°C):2-8 C
Shelf life:9 months from the date of manufacturing.
  • * Please check expiration dates on the reagent package
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    全系列采用6枚定制美国Marlow半导体制冷片,*变温速率大于6度每秒,循环次数大于100万次。该产品融合多种*技术于一体:WINCE操作系统,彩色全触控屏幕,六温区独立控制技术,电脑联机功能,打印功能,超大数据存储量及扩展功能等;都将定性PCR产品的功能完善到极致,强大的功能将满足更高要求的实验所需。GET96-PLUS 智能6路基因扩增仪特点:1). 6个温度循环器专用长寿命Peltier模块,可独立控制6个温区;2). 阳极氧化 查看更多>
    生工生物工程(上海)股份有限公司在发布的PCR扩增试剂盒(Pfu)供应信息,浏览与PCR扩增试剂盒(Pfu)相关的产品或在搜索更多与PCR扩增试剂盒(Pfu)相关的内容。 查看更多>
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    艺斯高(上海)贸易有限公司最新产品宣传文章《Esco Aeris系列PCR基因扩增仪》。中国仪器网,致力打造仪器行业互动门户。 查看更多>
    细胞是构成生命体的结构和功能的基本单位,不同类型的细胞形态迥异,功能也各不相同。即使是同类细胞间看似相同,相互间也存在着广泛的细胞异质性。传统的群体细胞分析检测能更快速方便的获得大量数据并利于进行有效的统计学分析,但是随着研究的深入,这种基于群体细胞分析所获得的平均性数据,往往忽略了细胞个体间的差异,在很大程度上掩盖了不少稀有、微量样本的作用以及在生命体内广泛存在的随机行为,这些“平均”结果带来的数据缺失,甚至是与事实相反的错误结果,都 查看更多>
    恶性胶质瘤(glioblastoma,GBM)是最常见且最具攻击性的脑癌,标准治疗反应很差,两年生存率仅为15%。最近,《Nature Genetics》的一篇文章发现了GBM肿瘤耐药的一个关键密码。 为了靶向遏 查看更多>
    PCR扩增产物鉴定与纯化实验原理琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR扩增产物。(原理参照琼脂糖凝胶电泳检测DNA实验)本实验使用了TaKaRa公司的胶纯化试剂盒(Agarose Gel DNA Purification Kit),该试剂盒是从琼脂糖凝胶中回收并纯化DNA片段的试剂盒。试剂盒采用了独特的凝胶融解系统,结合DNA制备膜技术,具有高效、快速、方便的特点,全套操作只需30min便可完成。使用该试剂盒每次可纯化得到多至10µg的DNA片段... 查看更多>
    聚合酶链式反应简称PCR(Polymerase Chain Reaction) (又称:多聚酶链式反应) PCR是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火(复性)及适温延伸等反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。它不仅可用于基因分离、克隆和核... 查看更多>
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    PCR技术在食品检测中的应用123
    绿萝2015的春天2018-01-24
    应用很广泛,因为比荧光定量PCR的操作简单方便,无需专业人员操作,仪器的性价比也比较高,挺受食品企业的追捧,食药系统也用的不少,现在技术越来越成熟,以后的应用会越来越广
    目前,我在研究有关LAMP的技术,但做了十几次都没有作出来,国外做的多数是用环介导的扩增试剂盒做的,而我们国内买不到相关的试剂,只能是自己配。不知是我配制的试剂不准,还是方法不对,总之是做不出来。有那位大侠做过这个技术的,希望能给我指点,或者我们交流一下。我qq号码为:86339603
    扩增一个鸭的基因,PCR仪Bio-Rad的mycycler系列,通过升级后可以做梯度(8个温度梯度)PCR。
    近期老是出问题,梯度(47~53℃)扩增时共6个温度有较明亮的条带,确定恒温再次扩增,却无任何产物。
    请教大家了,着急的很!
    需要根据不同的样品来源,和相关的致病菌检测国家标准进行检测,也就是说对不同的样品其检测方法是不同的。一般情况下,需要先进行增菌,因为致病菌的含量往往很低,直接检测很可能检测不出,增菌过后再使用不同的培养基划线接种,分离出致病菌后进行生化鉴定,或者使用一些更先进的方法,比如PCR、质谱等等。恒温扩增法也有企业在用,但是新推出的技术,使用度比荧光定量PCR的要少一些
    分子生物学实验报告123
    louise36532021-07-23
    前天我做pXJ41-p21质粒扩增,所用的新霉素终浓度是60μg/ml。但经过培养过夜后,昨天下午都未出现菌落,不知是不是新霉素浓度过高?还是感受态细菌的问题?刚开始摸索,未设空白对照。请教各位高手,是何原因?
    以下是质粒质粒扩增步骤:
    1.取400μlLB液先置于37℃水浴30分钟
    2.100μlJM109(存于-80℃)于冰上解冻
    3.解冻后加入50ngDNA质粒(对照只加感受态细胞)冰浴30分钟(计时)
    4.42℃水浴90秒
    5.冰浴2分钟
    6.加入400μlLB液
    7.37℃恒温摇床200rpm摇匀1小时
    8.取200μl平均分布(旋转平皿)于培养基上,倒扣培养皿37℃过夜
    恒温扩增技术是什么? 123
    oiljdljdio2018-01-24
    操作方法?
    原理?(没有就算了...)
    答的好的提高悬赏50分
    有原理的追加50分
    谢谢啊~~~~
    应用很广泛,因为比荧光定量PCR的操作简单方便,无需专业人员操作,仪器的性价比高,挺受食品企业的追捧,食药系统也用的不少,现在技术越来越成熟,以后的应用会越来越广
    各位大侠好!我最近在做滚环扩增的时候遇到问题了,来和大家讨论一下,希望各路高手不吝赐教!
    我做的是用锁式探针来检测dna模板的ram,探针80base,其中杂交区40base,引物分别为16、18base,连接酶选取的T4 ligase和Taq DNA ligase两种,分别对应恒温和变温情况下的扩增。水解体系为EXO I和Exo Ⅲ的混合体系,参考的外文文献,应该没什么问题。聚合酶用的是Bst DNA大片段聚合酶。
    一开始选择的探针浓度为200pmol/L,扩增效果挺好,当时用的DNA模板是质粒阳性标准品,但是后来在做敏感性的时候发现条带梯度差异几乎没有,而且阴性也出带,后来就没法做敏感性和特异性验证了,实验停滞了2个月一直也没进展。
    按理说RAM借助锁式探针扩增的独特方式以及水解体系的存在可以有效防止污染才对,希望大家给点建议该如何解决。
    万分感谢!!!!!!!!!!
    附一张以前做敏感性的图(marker为2000的DNA ladder)以做参考

    交叉引物恒温扩增技术
    核酸扩增是核酸分子诊断的关键技术。根据核酸扩增反应中温度变化要求,可以将核酸扩增技术分为两大类:一类是PCR核酸扩增技术,另一类是核酸恒温扩增技术。
    PCR技术是指通过控制温度的变化来实现DNA扩增的三个步骤:模板变性(如95℃)-引物杂交(如58℃)-DNA合成(如72℃)。这种温度变化的循环重复(如重复35次)过程通常由精密而复杂的仪器(PCR仪)来控制。核酸恒温扩增技术(NucleicAcidIsothermalAmplification,NAIA)则是扩增反应的全过程均在同一温度下进行,不须象PCR反应那样需要经历几十个温度变化的循环过程。这一特点使得它们对扩增所需仪器的要求大大简化,反应时间大大缩短,因而具有巨大的应用价值,成为分子诊断行业发展中的热点。
    目前的NAIA技术主要有滚环扩增技术(RollingCircleAmplification,RCA)、转录酶扩增技术(TranscriptionMediatedAmplification,TMA)、依赖核酸序列扩增技术(NucleicAcidSequenceBasedAmplification,NASBA)、链置换扩增技术(stranddisplacementamplification,SDA)、环介导的等温扩增技术(Loop-MediatedIsothermalAmplification,LAMP)、解链酶扩增技术(HelicaseDependentAmplification,HDA)。上述各种核酸扩增技术均由国外公司所拥有。
    交叉引物扩增技术(CrossingPrimingAmplification,CPA)是完全由优思达公司独立研发成功的一种新的核酸恒温扩增技术,也是中国首个具有自主知识产权的核酸扩增技术。CPA与优思达公司其他技术相结合(如快速核酸提取技术、核酸试纸条检测技术等),形成一个完整的现场快速分子检测平台,可以开发出众多恒温扩增检测试剂盒,广泛应用于分子诊断、防疫检疫、生物医学研究、个体化治疗等领域。该技术已申请中国和美国发明专利,在美国《MolecularDiagnostics》等杂志发表论文二篇,并通过了比尔?盖茨基金会资助申请。
    CPA扩增体系中除包含具有链置换功能的BstDNA聚合酶外,还主要包括扩增引物和两条交叉引物。这些寡聚核苷酸链能依靠BstDNA聚合酶的高活性的链置换特性,使DNA的循环扩增能不断的实现。CPA扩增主要包含以下几个步骤:
    交叉正向引物CPF中的PFs与模板DNA中PFa互补,启动DNA合成,使得PRa被引入到所扩增的产物中;
    外围引物DP1s与PFa前端DP1a序列互补,通过链置换型DNA聚合酶向前延伸,一边置换CPF合成的能与CPR和DP2a结合的单链产物(结构3),一边与模板DNA形成双链产物(结构2);
    在结构3中,DP2a通过链置换型DNA聚合酶向前延伸,置换出由CPR所延伸的单链产物(结构5),同时合成与步骤2中由CPF延伸所产生单链DNA形成双链产物(结构4),而结构5相对起始的DNA模板,多了PRs和PFs两个片段序列;
    单链结构5中的3’端的PFa和PRs可分别与CPF中的PFs和CPR中的PRa互补结合,可在链置换型DNA聚合酶的作用下延伸和置换出相应的单链产物。延伸产物相对结构5来说又增加了一个PFs区域(结构8);
    因此,扩增引物CPF和CPR的不断杂交和延伸,不仅使得结构5的长度不断的加长,从而引入更多CPF和CPR3’端互补区域,同时也置换出了各种可与CPF和CPR3’端互补的单链产物;
    通过CPF和CPR的不断杂交延伸和DNA聚合酶的链置换作用,使得DNA拷贝数不断的增加,从而达到基因扩增的效果。
    使用本装置提取临床生物样品的核酸成本低廉,只需几分钟,可以应用于现场检测或实验资源较少的基层医院和经济不发达地区;同时也可以满足大医院特定情况下的需求,如急诊或床边的核酸快速诊断。该技术已申请发明专利,并取得盖茨基金会研发资助。
    CPA基本原理如下:

    图2CPA扩增的反应原理图
    与目前广泛使用的荧光PCR技术相比较,CPA技术有以下几个优点:
    反应速度快:反应时间约1小时,使试剂盒可用于检验检疫、突发性传染病的检测与监控现场检测或医院的床边诊断(Point-of-Testing,POCT);
    检测成本低:目前荧光光定量PCR价格昂贵,无法在很多中小医院普及。CPA扩增只需要离心机和一台简单的恒温装置,如普通的水浴锅金属浴,即可进行扩增。
    操作简单:对操作人员的技能要求不高,绝大多数人通过简单培训或自学都可掌握,为核酸检测试剂的广泛应用创造了条件。
    有人知道交叉引物核酸恒温扩增(CPA)的扩增原理吗?希望高手不吝赐教,最好是图文并茂的那种,谢谢了先!
    欢迎讨论环介导的恒温扩增法(LAMP)
    基因扩增技术(PCR)聚合酶链反应(polymerase chain reaction简称PCR)又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法,是基因扩增技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍,从而大大提高对DNA分子的分析