【分享】环介导等温扩增技术(LoopMediated Isothermal Amplification, LAMP)专题讨论

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2021-07-20

问题描述：

各位战友：

今天发现，我在核酸技术区开辟的“DIG/Biotin标记的Southern/Northern杂交专题讨论”4个月，今天回帖数破100，点击达1500多次。能和大家一起分享和交流，并且得到共同提高，心情很是愉快。

所以想借PCR技术区的宝地，新开辟“环介导等温扩增技术(Loop-MediatedIsothermalAmplification,LAMP)专题讨论”。我做LAMP一年多了，有些经验。而最近，和我谈起LAMP的朋友明显增多。所以在这方面大家有什么心得、体会、资料和实验困难，希望能一起交流讨论。谢谢支持！

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zhysh1231

用户

mylab,您好！我最近用官方软件设计了一套引物做LAMP，跑出了梯形条带，但是LAMP的最小条带比用外引物跑出来的条带要小这是什么原因啊？望指教！！！

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zhysh1231

用户

我还想问一下，LAMP的最小条带到底是从哪到哪啊，很困惑。还有如何分析条带是否是目的条带还是非特异性扩增，还是只要能跑出梯形条带就能证明试验成功了呢？急需帮助

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mylab

用户

zhysh1231LAMP的大多数产物，是FIP和BIP扩增出来的，最小条带应该比用外引物跑出来的条带要小。如果用了环状引物，应该更加明显一些。但差别应该不明显，如果您的最小条带是<100bp，应该是引物多聚体。如何分析条带是否是目的条带还是非特异性扩增。LAMP的扩增，是4或6对引物针对靶序列的6或8个区域，特异性是非常的好。一般只要能跑出梯形条带就能证明试验成功了。如果不放心，可在F1和B1之间选择一个内切酶酶切，能够得到特定大小条带；更保险的办法就是做个Southern杂交了。建议再好好学习一下第一篇LAMP的文章，见NAR,2000,28(12):e63。

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