【交流】关于LAMP(环介导等温扩增)结果的讨论
2021-07-27
问题描述:
大家好,现在做LAMP结果颠倒了,阴性对照会出现LAMPladder条带,而加了基因组DNA的反而扩增不出来,有没有人遇见这种情况?最后如何解决了呢?
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茯苓猪爱
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楼主多说说你的实验,这个对我来说很陌生想多知道一些相关的原理和应用
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serain33
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LAMP简单的说就是一种分子诊断技术,与PCR相似,在引物、模板、dNTP及酶等作用下是模板DNA大量扩增,从而达到检测的目的。但是由于LAMP方法涉及三对儿引物,针对目的片段的六个位点进行扩增,因此,其特异性要高于普通PCR,又由于不需要特殊的昂贵设备,实施起来更为方便。以上仅仅是我个人的一点理解,具体可以参考相关文献哈。
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hanchanglei
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LAMP技术的这些优点,高特异性和高灵敏度恰恰造成了该技术有很重要的技术瓶颈,它需要4条引物对应6个区域,这无疑大大提高了引物设计的难度,特别是变异性很大的微生物和病毒来讲,设计合适的引物显得尤其难,它的恒温扩增具有很高的扩增效率,理论上讲要高于PCR,就是说灵敏度高于PCR,这同时就增加了污染的几率,长期操作反应后,常常出现假阳性,这是该技术致命的缺陷,不解决这种污染问题,LAMP很难推广,因为这种技术就是针对较低端的客户群,对仪器的要求低,这样一旦出现污染,工作就不得不停止。
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