cDNA末端的快速扩增 (RACE)
RACE实验是获取目的基因未知序列的一种经济、有效、有针对性的方法。研究人员可通过获得的RACE序列信息进一步分析研究研究目的基因序列情况,也可继续进行后续实验操作,例如以总RNA为模板RT-PCR扩增目的基因、基因突变及修复、基因亚克隆至表达载体直至蛋白表达等。
服务内容 |
◇TotalRNA提取:不同实验材料,选择不同的试剂进行RNA提取 |
例如,使用RNAisoPlus(CodeNo.:9108)、TaKaRaMiniBESTUniversalRNAExtractionKit(CodeNo.:9767)等试剂。并对提取的TotalRNA进一步精制处理、质量验证,以确保实验结果的可靠性。 |
◇已知序列验证 |
根据客户提供的已知序列设计引物,RT-PCR扩增目的序列,以验证已知序列在样品中的存在情况。 |
◇3’RACE实验:根据目的基因情况,选择合适方法进行3’RACE。 |
例如,使用3’-FullRACECoreSetwithPrimeScript™RTase(CodeNo.:6106),该试剂盒中独特设计的Adaptor和NestedPCR提高了PCR的特异性和灵敏度,从而轻松获得cDNA3’端的序列。 |
◇5’RACE实验:根据目的基因情况,选择合适方法进行5’RACE。 |
例如,使用5’RACEKitwithTAP(CodeNo.:6107),该试剂盒中的TobaccoAcidPyrophosphatase能有效识别mRNA5’末端的帽子位点,从而得到cDNA5’端全长序列。 |
◇RACE获得序列的验证 |
RACE获得序列后,将分别在已知序列和RACE获得的未知序列上设计引物进行PCR扩增,以电泳检测方式验证获取的RACE序列来源于已知序列。 |
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发布于 : 2018-06-03
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