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Zeta life/JC-1Mitochondrial Membrane Potential Detection Kit/JC0050
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Zeta life/JC-1Mitochondrial Membrane Potential Detection Kit/JC0050
品牌 / 
zeta-life
货号 / 
JC0050
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Overview

JC-1 Mitochondrial Membrane

Potential Detection Kit.

Packing specification

Product Numbers: JC0050,JC0100, JC0200,

Specification: 50 times100 times, 2 * 100 times

Storage conditions

Store at 4 away from light, avoid repeated freezing and thawing, valid for one year.

Properties

Introduction

The loss of mitochondrial membrane potential (DY) is a hallmark for apoptosis. The JC-1 Assay Kit measures the mitochondrial membrane potential in cells. In non-apoptotic cells, JC-1 (5,5’,6,6’-tetrachloro- 1,1’,3,3’-tetraethylbenzimidazolylcarbocyanine iodide) exists as a monomer in the cytosol (green) and also accumulates as aggregates in the mitochondria which stain red. Whereas, in apoptotic and necrotic cells, JC-1 exists in monomeric form and stains the cytosol green.

Background

The mitochondrial permeability transition is an important step in the induction of cellular apoptosis. During this process, the electrochemical gradient (referred to as DY) across the mitochondrial membrane collapses. The collapse is thought to occur through the formation of pores in the mitochondria by dimerized Bax or activated Bid, Bak, or Bad proteins. Activation of these pro-apoptotic proteins is accompanied by the release of cytochrome c into the cytoplasm(1-4). The JC-1 Assay Kit uses a unique cationic dye (5,5’,6,6’-tetrachloro-1,1’,3,3’tetraethylbenzimidazolylcarbocyanine iodide) to signal the loss of the mitochondrial membrane potential(5). In healthy cells, the dye stains the mitochondria bright red (6). The negative charge established by the intact mitochondrial membrane potential allows the lipophilic dye, bearing a delocalized positive charge, to enter the mitochondrial matrix where it accumulates. When the critical concentration is exceeded, J-aggregates form which become fluorescent red. In apoptotic cells, the mitochondrial membrane potential collapses, and the JC-1 cannot accumulate within the mitochondria. In these cells JC-1 remains in the cytoplasm in a green fluorescent monomeric form. Apoptotic cells, showing primarily green fluorescence, are easily differentiated from healthy cells which show red and green fluorescence. The aggregate red form has absorption/emission maxima of 585/590 nm (5). The green monomeric form has absorption/ emission maxima of 510/527 nm. Both apoptotic and healthy cells can be visualized simultaneously by fluorescence microscopy using a wide band-pass filter suitable for detection of fluorescein and rhodamine emission spectra. The JC-1 reagent is easy to use. Simply dilute the reagent in cell culture medium and add to the cells. After a 15 minute incubation, wash the cells and analyze by flow cytometry or fluorescence microscopy or fluorescence plate reader.

Warnings and Precautions

1.For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.

2.Gloves, protective clothing and eyewear should be worn and safe laboratory practices followed.

Kit Components:

Reagents

Package

JC-1(200×)in DMSO

100μL/tube5tubes

Pure Water

90mL

Assay Buffer(5×)

80mL

CCCP(10mM)

20μL

Background
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请问,我通过基因芯片筛选差异基因,有上调的也有下调的,即FC有正值,亦有负值,那么负值怎么取log?谢谢

1、一张芯片上可以同时分析成百上千的探针,这样的情况可以检测多少位点?
2、基因芯片技术通量会有多大?怎么计算?

研究蛋白质芯片的意义
1。蛋白质是基因表达的最终产物,接近生命活动的物质层面;
2。探针蛋白特异性高、亲和力强,可简化样品前处理,甚至可直接利用生物材料(血样、尿样、细胞及组织等)进行检测;
3。适合高通量筛选与靶蛋白作用的化合物;
4。有助于了解药物或毒物与其效应相关蛋白质的相互作用。

蛋白质芯片的分类:
1.蛋白质检测芯片
2.蛋白质功能芯片
蛋白质芯片的制备:
1。固相载体及其处理
载体(滴定板、滤膜、凝胶、载玻片)
2。蛋白质的预处理
选择具有较高纯度和完好生物活性的蛋白进行溶解
3。点制微阵列
可使用点制基因微阵列的商品化点样仪或喷墨法等
4。膜为载体:芯片放入湿盒,37°C1h
载玻片为载体:化学修饰产生醛基固定蛋白
5。微阵列的封闭固定微阵列上的蛋白样点
主要封闭试剂:BSA或Gly

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