氧化反应 与 3-磷酸甘油酸激酶（PGK）偶联的还原反应 实验方法原理 GAPDH，D-磷酸甘油醛；NADP+ 氧化还原酶（磷酸化）。D-3-磷酸甘油醛 ＋ NAD＋⇌ 1，3-磷酸甘油醛＋ NADH ＋ H＋酶的实验既可以在正反应方向也可以在偶联后的逆反应方向进行。正反应中，必须加入不稳定且很昂贵的 DL-3-磷酸甘油酸。 实验材料 3-磷酸甘油醛脱氢酶溶液 试剂、试剂盒 三乙醇胺 · HCl DL-磷酸甘油酸 ......阅读全文
逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）
实验概要提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo（dT）或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。RT-PCR使RNA检测的灵敏性提高了几个数量级，使一些极为微量RNA样品分析成为可能。该技术主要用于：分析基因
中科院：海洋生物cDNA分析
造礁石珊瑚为珊瑚礁生态系统中的框架生物, 研究其重要功能基因对于理解造礁石珊瑚对环境变化的响应有重要指示意义，近期来自中国科学院南海海洋研究所的研究人员提取了澄黄滨珊瑚(Porites lutea)的总RNA, 通过RT-RCR得到 cDNA, 并以 cDNA为模板设计引物进行 test
逆转录-聚合酶链反应实验方法
逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction，RT-PCR)的原理是：提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo（dT）或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR
Western实验中内参基因的选择及使用方法
Western Blot实验常用于检测蛋白表达量、蛋白表达产物的正确性等。相对于其他检测蛋白的方法而言Western Blot实验在蛋白的定性定量分析、与目的蛋白量的比较方面更简单一些。虽然，顺利的时候Western blot做起来很简单，可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现
应用mRNA反转录扩增cDNA（RT-PCR）
实验方法原理 酶促催化使RNA反 转 录 为cDNA第一链。 一 条寡聚脱氧核苷酸引物先 与 mRNA杂交，然 后 由RNA依赖的DNA聚合酶催化合成相应互补的cDNA拷贝，后者
用于表达监测的寡核苷酸分析实验2
数据分析与处理以及数量评定实验步骤1.用 Affymetrix Gene Chip 软件进行最初的数据处理。通过检测图像像素值，此软件测定每种寡核苷酸探针的荧光强度从而计算出每种转录本的简化值。此简化值被称为「平均差异」，它通过确定某一特定转录本在所有引物对中的特异信号而得（即将某一特定转录本由完全
应用mRNA反转录扩增cDNA（RT-PCR）
RT-PCR技术可应用于：（1）构建大容量cDNA文库；（2）鉴 定已转录序列是否发生突变及呈现多态性；（3）测定基因表达的强度。实验方法原理酶促催化使RNA反 转 录 为cDNA第一链。 一 条寡聚脱氧核苷酸引物先 与 mRNA杂交，然 后 由RNA依赖的DNA聚合酶催化合成相应互补的cDNA拷贝
武汉植物园在纳米银与蛋白质相互作用研究中取得进展
纳米银（Silver nanoparticles）是空间三个维度都处于1-100 nm范围内由银原子构成的具有特殊性质的材料，由于具有卓越的抗菌性能，被广泛用于人类生产生活的各个领域。然而，随着纳米银使用的增加，越来越多的纳米银释放到环境中，由此可能会对生物体造成毒害，从而破坏生态系统的结构和
逆转录-聚合酶链反应中文实验方法
逆转录-聚合酶链反应逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction，RT-PCR)的原理是：提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo（dT）或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cD
中科院最新文章：海洋生物cDNA分析
造礁石珊瑚为珊瑚礁生态系统中的框架生物, 研究其重要功能基因对于理解造礁石珊瑚对环境变化的响应有重要指示意义，近期来自中国科学院南海海洋研究所的研究人员提取了澄黄滨珊瑚(Porites lutea)的总RNA, 通过RT-RCR得到 cDNA, 并以 cDNA为模板设计引物进行 test
免疫印迹western实验中内参蛋白的选择和注意事项
免疫印迹western实验中内参基因的选择和注意事项 Western Blot实验常用于检测蛋白表达量、蛋白表达产物的正确性等。相对于其他检测蛋白的方法而言Western Blot实验在蛋白的定性定量分析、与目的蛋白量的比较方面更简单一些。 虽然，顺利的时候Western blot做
逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR，rtpcr）
实验方法原理 逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction，RT-PCR)的原理是：提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo（dT）或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板
乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）活力测定（比色法）
实验原理乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase简称LDH，EC.1.1.1.27, L－乳酸：NAD+氧化还原酶）广泛存在于生物细胞内，是糖代谢酵解途径的关键酶之一，可催化下列可逆反应。 LDH可溶于水或稀盐溶液。组织中LDH含量测定方法很多，其中紫外分光光度法更为简单、快
天津工生所谷氨酸棒杆菌利用甘油合成稀少糖研究获进展
稀少糖是在自然界中存在但含量极少的一类单糖及其衍生物，作为食品添加剂和医药中间体，在诸多领域发挥着重要作用。甘油是生物柴油的主要副产物，可以转化生产为高附加值产品，在微生物合成稀少糖中具有应用价值。 中国科学院天津工业生物技术研究所研究员孙媛霞带领的功能糖与天然活性物质研究团队以谷氨酸棒杆菌为
光合碳循环 （photosynthetic carbon cycle）
光合作用中碳同化（二氧化碳转化为糖或其磷酸酯）的基本途径。又称卡尔文循环、还原戊糖磷酸循环、还原戊糖磷酸途径。在绿色植物、蓝藻和多种光合细菌中普遍存在。其他碳同化途径如 C4 途径和 CAM途径（见景天科酸代谢）所固定的 CO2 ，最终仍须通过光合碳循环才能被还原成糖。因此它是地球上绝大部分有机物
生化试剂常见问题的解决方法
试剂空白吸光度是反映试剂质量的指标，但不能反映试剂质量的全部。试剂成份、纯度、用量及稳定性，才是保证试剂质量的关键所在。目前市售的一些试剂具有抗干扰作用，主要是通过加入抗干扰物质或使用新的色素原以避免内源性物质的干扰。但值得注意的是：一些试验项目在消除内源性物质干扰的同时，会带来样品含量真实性的变化
生化试剂应用常见问题的探讨
试剂空白吸光度是反映试剂质量的指标之一，但不能反映试剂质量的全部。试剂成份、纯度、用量及稳定性，才是保证试剂质量的关键所在。目前市售的一些试剂具有抗干扰作用，主要是通过加入抗干扰物质或使用新的色素原以避免内源性物质的干扰。但值得注意的是：一些试验项目在消除内源性物质干扰的同时，会带来样品含量真实性的
快速了解索氏抽提法测定脂肪的原理
索氏抽提法，用于粗脂肪含量的测定。脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中，测定脂肪的含量，可以作为鉴别其品质优劣的一个指标。脂肪含量的测定有很多方法，如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等。国内外普遍采用抽提法，其中索氏抽提法（Soxhlet extractor method）是
食品检验知识大全
第一章绪论食品理化检验概念：是卫生检验专业中的一门重要专业课程，是以分析化学、营养与食品卫生学、食品化学为基础，采用现代分离、分析技术，研究食品营养成分与食品安全有关成分的理化检验原理和方法的一门科学，也是一门学科交叉、应用性很强的学科。第二章 食品样本的采集、保存和处理1 食品样本的采集原则及方法
索氏抽提法测定脂肪原理
脂肪是食品的主要成分之一,大多数动物性食品和一些植物性食品,尤其是植物的种子、果实或果仁,都含有脂肪或脂类化合物。在实用油脂中主要存在甘油三酸酯以及一些脂肪酸、磷酸、糖酯、脂溶性维生素等类酯化合物。脂肪有两种存在形式,即游离脂肪和结合脂肪,测定食品中脂肪含量的方
GCH1基因、BH4对疼痛的作用机制研究进展
疼痛是一种由组织损伤产生的令人不愉快的感觉和情绪体验。药物治疗疼痛，存在长期服药、疗效有限及副作用大等问题。研究表明，疼痛是遗传和环境因素相互作用的结果，疼痛反应具有遗传学特征和复杂性。 疼痛敏感性增加和慢性疼痛患病率下降由部分基因调控。其中，四氢生物蝶呤（tetrahydrobiopteri
组织学研究方法
（一）一般光学显微镜术应用一般光学显微镜（简称光镜）观察组织切片是组织学研究的最基本方法。取动物或人体的新鲜组织块，先用固定剂（fixative）固定（fixation），使组织中的蛋白质迅速凝固，防止细胞自溶和组织腐败。常用的固定剂如洒精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化锇等，一般常将几种固定剂配制成混
ELISA的试剂-2
3.1.3 包被用抗原 用于包被固相载体的抗原按其来源不同可分为天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原三大类。天然抗原可取自动物组织、微生物培养物等，须经提取纯化才能作包被用。如HBsAg可以从携带者的血清中提取，一般的细菌和病毒抗原可以从其培养物中提取，蛋白成份抗原可从富含此抗原的材料中
一般化学试剂知识介绍
无机分析试剂： 无机分析试剂(Inorganic analytical reagent)是用于化学分析的常用的无机化学物品。其纯度比工业品高，杂质少。 有机分析试剂： 有机分析试剂(Organic reagents for inorganic analysis)是在无机物分析中供元素的测定、
经乙二醛和二甲基亚砜变性处理后进行的RNA电泳
这一方法原于McMaster和Carmichael（1977）。 含有乙二醛-DMSO的凝胶比含有甲醛的凝胶更难于进行电泳， 因为前者泳动速率较慢而且需将电泳液时行循环以避免电泳过程中形成过高的H+梯度。尽管上述两种凝胶具有近乎相等的分辨率（Miller，1987），但用含朋乙二醛-DMSO的凝
Northern blot实验操作步骤（1）
一、经乙二醛和二甲基亚砜变性处理后进行的RNA电泳这一方法原于McMaster和Carmichael（1977）。含有乙二醛－DMSO的凝胶比含有甲醛的凝胶更难于进行电泳，因为前者泳动速率较慢而且需将电泳液时行循环以避免电泳过程中形成过高的H+梯度。尽管上述两种凝胶具有近乎相等的分辨率（Miller
蛋白芯片的基本原理及技术研究现状
作者：陈玮莹 来源：《国外医学临床生物化学及检验学分册》汕头大学医学院 陈玮莹 综述 温博贵 随着分子生物学芯片技术研究工作的进一步深入开展，NDA芯片技术已经被逐渐应用于对生物样品中的各种已知或未知的核酸序列表达的检测和比较研究。但是，作为生物体细胞中实施化学反应功能成分的蛋白质，其相当部分与活性
蛋白芯片的基本原理及技术研究现状
随着分子生物学芯片技术研究工作的进一步深入开展，DNA芯片技术已经被逐渐应用于对生物样品中的各种已知或未知的核酸序列表达的检测和比较研究。但是，作为生物体细胞中实施化学反应功能成分的蛋白质，其相当部分与活性基因所表达的mRNA之间未能显示出直接的关系，因此使作为高通量基因表达分析平台的cDNA芯片技
Northern blot技术
经乙二醛和二甲基亚砜变性处理后进行的RNA电泳 这一方法原于McMaster和Carmichael(1977)。 含有乙二醛－DMSO的凝胶比含有甲醛的凝胶更难于进行电泳， 因为前者泳动速率较慢而且需将电泳液时行循环以避免电泳过程中形成过高的H＋梯度。尽管上述两种凝胶具有近乎相等的分辨率（Mill
Northern blot技术
经乙二醛和二甲基亚砜变性处理后进行的RNA电泳 这一方法原于McMaster和Carmichael(1977)。 含有乙二醛－DMSO的凝胶比含有甲醛的凝胶更难于进行电泳， 因为前者泳动速率较慢而且需将电泳液时行循环以避免电泳过程中形成过高的H＋梯度。尽管上述两种凝胶具有近乎相等的分辨率（Mill
