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求助:白蛋白与抗体的交联
2021-08-13
问题描述:

本人实验中将白蛋白微气泡与抗体进行交联,用了戊二醛、SPDP交联剂,效果不是很好,请问有没有更好的方法呢?

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chromatography
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最好的方法是先用亲和填料把白蛋白固定,然后活化,再偶联,这样避免白蛋白或者抗体互相偶联,偶联剂可以选择EDC,此外也可以先用酸酐活化白蛋白,再用EDC偶联,柱子上做的好处还有很简单可以把没有偶联的物质都洗掉,再把偶联的洗下来,如果要做更细致,可以把洗脱后的再过亲和柱子把抗体部分抓住,而没有偶联的白蛋白洗脱,再洗脱偶联的抗体和白蛋白复合物,这样得到就是非常纯的复合物.如果是微球可以直接先活化再偶联.参考填料合成或者酶固定化的方法.
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