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求助:Roche 地高辛标记试剂盒的转基因植物基因组DNA Southern Blot步骤
2021-08-01
问题描述:

各位同仁,请教Roche地高辛标记试剂盒的关于转基因植物基因组DNASouthernBlot的步骤。非常感谢!!!

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clpiao
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具体步骤可以看超作手册,我做这个有一段时间,我的经验是DNA酶切要完全,要做到这一点,可以把抽的DNA再用酚和氯仿再沉淀一次,然后零下70度无水乙醇沉淀过夜,酶切时先把除酶以外的成分加好,在4度放4小时,期间每隔15分钟混匀一次,然后加一半酶量,酶切2小时后再加其余的酶,再酶切6小时,如果超过8小时,条带一般不会太好看,另外,植物基因组酶切时的酶量是5单位每微克DNA.祝你成功
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benjibin
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那如果是细菌基因组DNA,酶切几小时?酶量是多少呢?
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hanson
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非常感谢clpiao,我用的是玉米的基因组DNA,Roche的DNA提取试剂盒提取的。酶切时为什么先将除酶外的其他成分在4度放置那么长时间?我的email是:wuwei@dl.cn,或是您告诉我您的email,好吗?
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