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AAT Bioquest/ReadiLink™ Rapid mFluor™ Violet 510 Antibody Labeling Kit *Microscale Optimized for Labeling 50 &mi
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AAT Bioquest/ReadiLink™ Rapid mFluor™ Violet 510 Antibody Labeling Kit *Microscale Optimized for Labeling 50 &mi
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aatbio
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Ex/Em(nm)414/508
MWN/A
CAS#N/A
SolventDMSO
StorageF/D/L
CategorySuperiorLabelingDyes
mFluor™DyesandKits
RelatedGeneralproteins
LabelingviaAminoGroups
BiochemicalAssays
AATBioquest"smFluor™dyesaredevelopedforflowcytometry-focusedapplications.ThesedyeshavelargeStokesShifts,andcanbewellexcitedbythelaserlinesofflowcytometers(e.g.,405nm,488nmand633nm).mFluor™Violet510dyeshavefluorescenceexcitationandemissionmaximaof~405nmand~510nmrespectively.mFluor™Violet510SEisreasonablystableandshowsgoodreactivityandselectivitywithproteinaminogroups.Thiskithasalltheessentialcomponentstoperformfiveseparatelabelingreactionsandpurifications.EachofthetwovialsofmFluor™Violet510SEprovidedinthekitisoptimizedforlabeling~50µgantibody.mFluor™Violet510SEantibodylabelingkitprovidesaconvenientmethodtolabelsmallamountsofmonoclonal,polyclonalantibodiesorotherproteins(>10kDa)withtheVioletLaser-excitablemFluor™Violet510SE.
SpectrumAdvancedSpectrumViewer

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Wavelength(nm)


Thisprotocolonlyprovidesaguideline,andshouldbemodifiedaccordingtoyourspecificneeds.
  1. Prepareproteinsolution(SolutionA):
    Forlabeling50ugprotein(assumingthetargetproteinconcentrationis1mg/mL),mix5μL(10%ofthetotalreactionvolume)ofReactionBuffer(ComponentB)with50uLofthetargetproteinsolution.
    Note1:Ifyouhaveadifferenceproteinconcentration,adjusttheproteinvolumeaccordinglytomake~50µgproteinavailableforyourlabelingreaction.
    Note2:Forlabeling100ugprotein(assumingthetargetproteinconcentrationis1mg/mL),mix10uL(10%ofthetotalreactionvolume)ofReactionBuffer(ComponentB)with100uLofthetargetproteinsolution.
    Note3:Theproteinshouldbedissolvedin1Xphosphatebufferedsaline(PBS),pH7.2-7.4;Iftheproteinisdissolvedinglycinebuffer,itmustbedialyzedagainst1XPBS,pH7.2-7.4,oruseAmiconUltra-0.5,Ultracel-10Membrane,10kDa(cat#UFC501008fromMillipore)toremovefreeaminesorammoniumsalts(suchasammoniumsulfateandammoniumacetate)thatarewidelyusedforproteinprecipitation.
    Note4:ImpureantibodiesorantibodiesstABIlizedwithbovineserumalbumin(BSA)orgelatinwillnotbelabeledwell.
    Note5:Theconjugationefficiencyissignificantlyreducediftheproteinconcentrationislessthan1mg/mL.Foroptimallabelingefficiencythefinalproteinconcentrationrangeof1-2mg/mLisrecommended.

  2. Runconjugationreaction::
    1. Addtheproteinsolution(SolutionA)toONEvialoflabelingdye(ComponentA),andmixthemwellbyrepeatedlypipettingforafewtimesorvortexthevialforafewseconds.
      Note:Usebothvials(ComponentA)oflabelingdyetolabel100ugproteinbydividingthe100ugproteininto2x50ugproteinandreactingeach50ugproteinwithonevialoflabelingdye.Combinetwovialsforthenextstep.
    2. Keeptheconjugationreactionmixtureatroomtemperaturefor30-60minutes.
      Note:Theconjugationreactionmixturecanberotatedorshakenforlongertimeifdesired.

  3. StopConjugationreaction:
    1. Add5uL(for50ugprotein)or10uL(for100ugprotein)whichis10%ofthetotalreactionvolumeofTQ-DyedQuenchBuffer(ComponentC)intotheconjugationreactionmixture(fromstep2.2),mixthemwell.
    2. Incubateatroomtemperaturefor10minutes.
    3. Thelabeledprotein(antibody)isnowreadytouse.
References&Citations
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DeepSequencingAnalysisoftheEha-RegulatedTranscriptomeofEdwardsiellatardaFollowingAcidification
Authors:DGao,NLiu,YLi,YZhang,GLiu
Journal:Metabolomics(LosAngel)(2017):2153--0769

Suramininhibitscullin-RINGE3ubiquitinligases
Authors:KennethWu,RobertAChong,QingYu,JinBai,DonaldESpratt,KevinChing,ChanLee,HaibinMiao,IngerTappin,JerardHurwitz
Journal:ProceedingsoftheNationalAcademyofSciences(2016):E2011--E2018

GlycosaminoglycanmimicrybyCOAMreducesmelanomagrowththroughchemokineinductionandfunction
Authors:HelenePiccard,NeleBerghmans,EvaKorpos,ChrisDillen,IlseVanAelst,SandraLi,ErikMartens,SandraLiekens,SamNoppen,JoVanDamme
Journal:InternationalJournalofCancer(2012):E425--E436


AAT Bioquest AAT Bioquest是一家位于美国的生物公司,前身为ABD Bioquest,总部位于加利福尼亚州。专门从事光学检测技术十多年,一直致力于光谱学检测领域技术的创新和突破。其独特的光学检测技术,综合了化学、生物学和信息学等各个领域的研究,引领了比色、荧光和发光技术新一代光学探针的浪潮。AAT Bioquest在全球拥有强大的经验丰富的专业分销商网络,为从小型研究机构到《财富》500强企业的各类客户提供卓越的产品和定制服务。


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想了解下NpleximmunoAmp荧光标记抗体是基于什么技术?比传统的技术有什么优点和缺点?价格如何?谢谢!
CAS编号又称CAS登录号或CAS登记号码,是某种物质(化合物、高分子材料、生物序列(Biological sequences)、混合物或合金)的唯一的数字识别号码。
TUNEL法可以通过原位标记DNA断裂端从而标记凋亡细胞,因此特别适用于组织凋亡研究,是目前研究组织体内细胞凋亡最广泛采用的手段。同时由于其原理是基于检测早期基因组的断裂,因此可以检测到很早期的细胞凋亡,且能通过标记的多少,进行半定量研究。
TUNEL的缺点是:1),操作要求高,组织样本需要固定(即使是培养细胞,也需要固定),不恰当的固定方法对实验结果影响很大,导致背景过高或者信号过弱,因此实验结果重复性不好;有的人花上半年做一个体内的TUNEL是一点都不奇怪的。2),大部分诱导凋亡的药物也引起DNA损伤,从而产生DNA断裂,易引入假阳性;3)凋亡晚期细胞基因组大量降解,导致TUNEL标记反而减少,因此此法反应的是早期凋亡比例,不能严格反应凋亡比例,属于半定量研究。
尽管有如此多缺点,但由于其是目前为数不多的能原位标记凋亡细胞的方法,因此用于组织体内凋亡研究仍然是首选。但体外细胞实验研究,很少用此法。
凋亡检测中,TUNEL并不是过时的方法,现在研究凋亡的文献仍然常见。而且相反,还比以前多一点,因为现在体内实验越来越多了,甚至线虫的凋亡研究,都用TUNEL。
凋亡研究中,的确有几种方法过时了,当然是因为有替代方案了,比如DNAladder,电镜。至于AnnexinV是不能用来和TUNEL一起评论的,前者用于细胞,而且主要是悬浮细胞,后者主要用于组织。虽然有人也做镜下的AnnexinV观察,TUNEL的细胞staining,但这都不是主流。
回到lz的原帖,的确如大家所言,做贴壁细胞,不推荐用TUNEL。如果是经典凋亡途径,只是确定比例,用最经典,最常用的subG1法即可,如果是不确定是否是凋亡,用AnnexinV,不过贴壁细胞用此法,要注意消化时间。
用来对蛋白定量以及定位情况的研究
Bertin Pharma 特约代理123
维它命27482018-03-01
这种专业的问题最好打司法鉴定所的电话问问
普鲁卡因胺123
iamasweetgirl2021-08-07
Ludger普鲁卡因胺标记试剂盒ProZyme普鲁卡因胺标记试剂)和WatersRapiFluor(WatersN-糖分析试剂盒)相比有什么不同?
最常用的的就是荧光标记的抗体,各种荧光染料。还有其他固定,通透细胞膜的试剂。

荧光标记物常用的有几十种,比如FITC, PE等等,各个生产厂家还有自己的专利产品
在买免疫组化一抗试剂的时候发现有的前面标注有“重组”二字,有的没有,请问有什么区别?买哪一种比较好?

elisa试剂盒的组成结构 123
未成年QI062021-08-09
1、 血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。
5、 保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
此IBL试剂盒能用于小鼠血清,EDTA血浆,细胞上清中白介素-6的定量检测  试剂盒成分  1 预包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 96T  2 酶标记抗体: (30倍浓缩)HRP标记抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 0.4mL x 1  3 标准品: 重组小鼠白介素-6 0.5mL x 2   4 EIA缓冲液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 30mL x 1  5 标记抗体稀释液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 12mL x 1  6 显色剂: TMB底物液 15mL x 1  7 终止液: 1N硫酸 12mL x 1  8 浓缩洗涤液: (40倍浓缩) 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 50mL x 1 操作说明 1实验所需器材(但试剂盒没有提供) 酶标仪(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及烧杯 去离子水 冰箱(4°C) 坐标纸(log/log) 吸水纸 试管(用于标准品稀释) 温育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性试剂管(用于浓缩酶标记抗体和显色剂)向左转|向右转
这个分两个部分,一个是裂解标记一个是检测标记,先对样品进行裂解然后标记,然后滴入测试进行标记显示。简单来讲就是这样,核心技术肯定不会对外公布的,研究也要大量的投入。
各位同仁,请教Roche地高辛标记试剂盒的关于转基因植物基因组DNASouthernBlot的步骤。非常感谢!!!
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