逆转录成cDNA后在存在逆转录引物和底物的情况下循环了25次会怎样
2017-12-12
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剑藏鞘
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拉出来跑个电泳就知道有没有扩增了
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青柠君君
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剑藏鞘拉出来跑个电泳就知道有没有扩增了先谢谢您了,请教一下1.CDNA可以跑电泳吗?因为引物有两种我估计会跑成一条带,就是整个mRNA逆转录的样子,我之前跑是这样的。2.如果扩增了理论上应该是什么样子呢?我想就是cDNA浓度变得很高,亮度很大?3,想请教一下85度条件下RNA会失活吗?如果没有会不会以RNA和cDNA为模板一直复制,谢谢!
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青柠君君
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我自己补充一下,我觉得这个影响就是第一轮37度扩增后,85度逆转录酶失活,双链解开,后面重复的过程就是把CDNA多煮了两分钟,我考虑到可能cDNA会降解,但是后续我会试一下能不能p出来,就当留在这里当心得了
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