一.常用贮液与溶液
1mol/L亚精胺（Spermidine）:溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。
10mol/L乙酸胺（ammoniumacetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
10mg/ml牛
血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20℃。或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
8mol/L乙酸钾（potassiumacetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。
1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。
3mol/L乙酸钠（sodiumacetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。
0.5mol/LEDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。
1mol/LHEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH调pH（6.8-8.2），然后用水定容至100ml。
1mol/LHCl：加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
25mg/mlIPGT：溶解250mg的IPGT（异丙基硫代-β-D-半乳糖苷）于10ml水中，分成小份贮存于-20℃。
1mol/LMgCl2:溶解20.3gMgCl2·6H2O于足量的水中，定容到100ml。
100mmol/LPMSF：溶解174mg的PMSF（苯甲基磺酰氟）于足量的异丙醇中，定容到10ml。分成小份并用铝箔将装液管包裹或贮存于-20℃。
20mg/ml蛋白酶K（proteinaseK）：将200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中，轻轻摇动，直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。
10mg/mlRnase（无DNase）（DNase－freeRNase）：溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液中（pH5.0）。溶解后于水浴中煮沸15min，使DNA酶失活。用1mol/L的Tris－HCl调pH至7.5，于-20℃贮存。（配制过程中要戴手套）
5mol/L氯化钠（NaCl）：溶解29.2g氯化钠于足量的水中，定容至100ml。
10N氢氧化钠（NaOH）：溶解400g氢氧化钠颗粒于约0.9L水的烧杯中（
磁力搅拌器搅拌），氢氧化钠完全溶解后用水定容至1L。
10％SDS（十二烷基硫酸钠）：称取100gSDS慢慢转移到约含0.9L的水的烧杯中，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定容至1L。
2mol/L山梨（糖）醇（Sorbitol）：溶解36.4g山梨（糖）醇于足量水中使终体积为100ml。
100％三氯乙酸（TCA）:在装有500gTCA的试剂瓶中加入100ml水，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。（稀释液应在临用前配制）
2.5％X－gal（5-溴-4-氯-3-吲哚－β-半乳糖苷）：溶解25mg的X－gal于1ml的二甲基甲酰胺（DMF）,用铝箔包裹装液管，贮存于-20℃。
100×Denhardt试剂（Denhardt"sregent）
成分及终浓度 | 配制100ml溶液各成分的用量 |
2%聚蔗糖（Ficoll，400型）2%聚乙烯吡咯烷酮（PVP-40）2%BSA（组分V）水 | 2g2g2g加水至总体积为100ml |
依照上表称取各组分，溶于水中定容。过滤除菌及杂质，分装成小份于-20℃贮存。
10×标准DNA
连接酶缓冲液（standardDNAligasebuffer）（粘端、平端连接）
成分及终浓度 | 配制10ml溶液各成分的用量 |
0.5mol/LTris-HCl100mmol/LMgCl2100mmol/LDTT2mmol/LATP5mmol/L盐酸亚精胺（可选）0.5mg/mlBSA（组分V）（可选）水 | 5ml1mol/L贮液1ml1mol/L贮液1ml1mol/L贮液200ul100mmol/L贮液50ul1mmol/L贮液0.5ml10mg/mL贮液2.25ml |
将配制好的缓冲液分装成小份，贮存于-20℃。
100mmol/LdNTP溶液（dNTPsolutions）可以购买到100mmol/L纯dNTPs贮液，-80℃可贮存至少6个月。
10mmol/LdNTP混合液
成分及终浓度 | 配制20ul溶液各成分的用量 |
10mmol/LdATP10mmol/LdCTP10mmol/LdGTP10mmol/LdTTP水 | 2ul100mmol/LdATP贮液2ul100mmol/LdCTP贮液2ul100mmol/LdGTP贮液2ul100mmol/LdTTP贮液12ul |
20％PEG8000/2.5MNaCl
成分及终浓度 | 配制10ml溶液各成分的用量 |
质量浓度为20％聚乙二醇2.5mol/L氯化钠水 | 20g50ml5mol/L氯化钠或14.6g固体氯化钠补足100ml |
加聚乙二醇于含有氯化钠的烧杯中，加水至终体积100ml，用磁力搅拌器搅拌溶解。
20×SSC
成分及终浓度 | 配制1L溶液各成分的用量 |
300mmol/L柠檬酸三钠（二水）3mol/L氯化钠水 | 88.2g175.3g补足1L |
溶解柠檬酸三钠（二水）和氯化钠于约0.9L水中，加几滴10NNaOH溶液调pH为7.0，用水补足体积至1L。
DEPC（焦碳酸二乙酯）处理水加100ulDEPC于100ml水中，使DEPC的体积分数为0.1％。在37℃温浴至少12h，然后在15psi条件下高压灭菌20min，以使残余的DEPC失活。DEPC会与胺起反应，不可用DEPC处理Tris缓冲液。
甲酰胺（deionizedformamide）直接购买或加DowexXG8混合树脂于装有甲酰胺的玻璃烧杯中，用磁力搅拌器轻轻搅拌1h，可去除甲酰胺中的离子。经Whatman1号滤纸过滤除去树脂后分成小份，充氮气于-80℃贮存（防止氧化）。
磷酸缓冲液（phosphatebuffer）按照下表所给定的体积，混合1mol/L的磷酸二氢钠（单碱）和1mol/L磷酸氢二钠（双碱）贮液，获得所需pH的磷酸缓冲液。配制1mol/L的磷酸二氢钠（NaH2PO4·H2O）贮液：溶解138g于足量水中，使终体积为1L;1mol/L磷酸氢二钠（Na2HPO4）贮液:溶解142g于足量水中使终体积为1L。
1mol/L磷酸二氢钠（ml） | 1mol/L磷酸氢二钠（ml） | 最终pH值 |
877850815775735685625565510450390330280 | 123150185225265315375435490550610670720 | 6.06.16.26.36.46.56.66.76.86.97.07.17.2 |
TE（用于悬浮和贮存DNA）
成分及终浓度 | 配制100ml溶液各成分的用量 |
10mmol/LTris－HCl1mmol/LEDTA水 | 1ml1mol/LTris-HCl（pH7.4-8.0，25℃）200ul0.5mol/LEDTA（pH8.0）98.8ml |
Tris缓冲液（Tris-HClbuffer）将121g的Tris碱溶解于约0.9L水中，再根据所要求的pH（25℃下）加一定量的浓盐酸（11.6N），用水调整终体积至1L。
浓盐酸的体积（ml） | pH |
8.6142128.53846566671.376 | 9.08.88.68.48.28.07.87.67.47.2 |
电泳缓冲液
50×Tris-乙酸（TAE）缓冲液
成分及终浓度 | 配制1L溶液各成分的用量 |
2mol/LTris碱1mol/L乙酸100mmol/LEDTA水 | 242g57.1ml的冰乙酸（17.4mol/L）200ml的0.5mol/LEDTA（pH8.0）补足1L |
5×Tris-硼酸（TBE）缓冲液
成分及终浓度 | 配制1L溶液各成分的用量 |
445mmol/LTris碱445mmol/L硼酸盐10mmol/LEDTA水 | 54g27.5g硼酸20ml的0.5mol/LEDTA（pH8.0）补足1L |
染料
1％溴酚蓝（bromophenolblue）加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中，搅拌或涡旋混合直到完全溶解。
1％二甲苯青FF（xylenecyanoleFF）溶解1g二甲苯青FF于足量水中，定容到100ml。
10mg/ml的溴化乙锭（ethidiumbromide）小心称取1g溴化乙锭，转移到广口瓶中，加100ml水，用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管，于4℃贮存。
凝胶上样液（gello
ADIngsolutions）6×碱性凝胶上样液（室温贮存）
成分及终浓度 | 配制10ml溶液各成分用量 |
0.3N氢氧化钠6mmol/LEDTA18％聚蔗糖（400型）0.15％溴甲酚绿0.25％二甲苯青FF水 | 300ul10N氢氧化钠120ul0.5mol/LEDTA（pH8.0）1.8g15mg25mg补足到10ml |
6×聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存）
成分及终浓度 | 配制10ml溶液各成分用量 |
0.15％溴酚蓝0.15％二甲苯青FF5mmol/LEDTA15％聚蔗糖（400型）水 | 1.5ml1％溴酚蓝1.5ml1％二甲苯青FF100ul0.5mol/LEDTA（pH8.0）1.5g补足到10ml |
6×溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存）
成分及终浓度 | 配制10ml溶液各成分用量 |
0.25％溴酚蓝0.25％二甲苯青FF15％聚蔗糖（400型）水 | 2.5ml1％溴酚蓝2.5ml1％二甲苯青FF1.5g补足到10ml |
6×甘油凝胶上样液（4℃贮存）
成分及终浓度 | 配制10ml溶液各成分用量 |
0.15％溴酚蓝0.15％二甲苯青FF5mmol/LEDTA50％甘油水 | 1.5ml1％溴酚蓝1.5ml1％二甲苯青FF100ul0.5mol/LEDTA（pH8.0）3ml3.9ml |
6×蔗糖凝胶上样液（室温贮存）
成分及终浓度 | 配制10ml溶液各成分用量 |
0.15％溴酚蓝0.15％二甲苯青FF5mmol/LEDTA40％聚蔗糖水 | 1.5ml1％溴酚蓝1.5ml1％二甲苯青FF100ul0.5mol/LEDTA（pH8.0）4g补足到10ml |
10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液（室温贮存）
成分及终浓度 | 配制10ml溶液各成分用量 |
0.2％溴酚蓝0.2％二甲苯青FF200mmol/LEDTA0.1％SDS50％甘油水 | 20mg20mg4ml0.5mol/LEDTA(pH8.0)100ul10％SDS5ml补足到10ml |
LB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：
如果需要用1NNaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。
SOB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：
蛋白胨 | 20g |
酵母提取物 | 5g |
氯化钠 | 0.5g |
1mol/L氯化钾 | 2.5ml |
用水补足体积到1L。分成100ml的小份，高压灭菌。培养基冷却到室温后，再在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁。
SOC培养基成分、方法同SOB培养基的配制，只是在培养基冷却到室温后，除了在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外，再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖（18g葡萄糖溶于足够水中，再用水补足到100ml，用0.22um的滤膜过滤除菌）。
TB培养基将下列组分溶解在0.9L水中：
各组分溶解后高压灭菌。冷却到60℃，再加100ml灭菌的170mmol/LKH2PO4/0.72mol/LK2HPO4的溶液（2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中，使终体积为100ml。高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌）。
2×YT培养基将下列组分溶解在0.9L水中：
如果需要用1NNaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。
YPD培养基将下列组分溶解在0.9L水中：
用水补足体积为1L后，高压灭菌。建议在高压灭菌之前，对色氨酸营养缺陷型每升培养基添加1.6g色氨酸，因为YPD培养基是色氨酸限制型培养基。为了配制平板，需要在高压灭菌前加入20g琼脂粉。
氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。
卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
链霉素（streptomycin）（50mg/ml）溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
萘啶酮酸（nalidixicacid）（5mg/ml）溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
四环素（tetracyyline）（10mg/ml）溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml。分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
