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Lucigen/RiboGuard™ RNase Inhibitor/RG90910K/10,000 Units
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Lucigen/RiboGuard™ RNase Inhibitor/RG90910K/10,000 Units
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LGC
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Anoptimizedreversetranscriptasesystemfortheproductionoffull-lengthCDNA.

  • Formerly from EpicentreProducefull-lengthcDNAwithRNAseH-mutant
  • Achievehigherspecificityatelevatedtemperatures,upto55°C

EpiScript™RnaseH-ReverseTranscriptase(EpiScriptRT),analternativetoSuperScript®IIReverseTranscriptase,isarecombinantMMLVreversetranscriptasewithgreatlyreducedRNaseHactivity.Itishighlyefficientatproducingfull-lengthcDNAfromlongRNAtemplates.EpiScriptRTiscapableofproducingcDNAfromaslittleas50pgoftotalRNAforreal-timeRT-PCR(qRT-PCR)analysisandotherapplications.

Applications

  • First-strandcDNAsynthesisforsubsequentPCRorreal-timePCR.

Benefits

  • RecombinantMMLVreversetranscriptasewithgreatlyreducedRNaseHactivity
  • Activeattemperaturesupto55°C
  • Highlyefficientatproducingfull-lengthcDNAfromaslittleas50pgoftotalRNA
  • BestvalueinanRNaseH-ReverseTranscriptase

Storage:Storeonlyat-20°Cinafreezerwithoutadefrostcycle.

StorageBuffer:EpiScriptRTissuppliedina50%glycerolsolutioncontaining50mMTris-HCl(pH7.5),100mMsodiumchloride,1mMDTT,0.1mMEDTA,and0.1%Triton®X-100.

UnitDefinition:OneunitofEpiScriptRTcatalyzestheincorporationof1nmolofdTTPintoacid-insolublematerialin10minutesat37°Cusingsaturatingamountsofoligo(dT)-primedpoly(rA)astemplate.

ContaminatingActivityAssays:EpiScriptRTisfreeofdetectableexonuclease,endonuclease,andRNaseactivities.

Figure 1

Figure1.EpiScript™ReverseTranscriptaseperformedequallyorbetterthancomparablereversetranscriptasesfromothervendors.First-strandsynthesisreactionswereassembledaccordingtomanufacturer´sspecifications.InputRNAwas1µgofJurkattotalRNA(Ambion®).Reactionswereprimedusing50ngofpoly-T(16-18)DNA.2ndstrandqPCRwasperformedusingBio-RadiQSYBRmastermixandgene-specificprimersthatyielded250-350bpamplicons.Reactionswererepeated4-fold.PGDF-R(PlateletDerivedGrowthFactorReceptor),TNF(TumorNecrosisFactor),IL-1b(Interleukin-1beta),IL-2(Interleukin2).ImagecourtesyofMatthewKellinger,Illumina®Inc.

Figure 2AFigure 2BFigure2(clicktoenlarge).EpiScript™ReverseTranscriptaseproducessimiliartranscriptcoverageindependentoftranscriptlength.EpiScriptwasusedtoprimefirststrandcDNAeitherfromtotalRNAusingoligo-dT(leftpanel)orpolyA+selectedRNAwithrandomhexamers(rightpanel).ThecDNAwasconvertedintoIllumina®-compatIBLelibrariesandsequenced.Thereadswerealignedtotranscriptsbaseduponvariouslengthclassesandreaddensityplottedrelativetothepercentdistancefromthe5´endofthetranscripts;0%referstothe5´endand100%isthe3´end.Asexpected,oligo-dTprimingresultsinamorepronounced3´biasthanrandompriming.

Figure 3Figure3.UseofEpiScript®ReverseTranscriptaseforfirststrandcDNAresultsindetectionofsimilartranscriptcategoriesindependentofinputamount.EpiScriptRTwasusedtorandomprime5ngor50pgofhumantotalRNAandthecDNAwasconvertedintolibrariesforIllumina®sequencing.ReadswerealignedusingTophatandannotatedwithCufflinksandthepercentageofeachmajorcategoryisvisualizedasapiechart.Equivalentresultsareobservedforboth5ngand50pgofinputRNA.

ORDERINFORMATION

Contents:EpiScriptRNaseH-ReverseTranscriptase,10XReactionBuffer,100mMDTT.
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E.片段之间有待连接封口 请帮忙给出正确答案和分析,谢谢! 点击查看答案4 大肠杆菌RNA聚合酶全酶由___因子和核心酶___所组成。 请帮忙给出正确答案和分... 查看更多>
反转录病毒原液检测实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。辅助病毒是一种有时存在于无复制能力病毒原液中的有复制能力的病毒,辅助病毒的存在在动物的感染及谱系分析中会成为问题。 查看更多>
北京索宝生物科技有限公司在发布的 反转录酶AMV 供应信息,浏览与 反转录酶AMV 相关的产品或在搜索更多与 反转录酶AMV 相关的内容。 查看更多>
北京赛百盛基因技术有限公司在发布的M-MLV反转录酶供应信息,浏览与M-MLV反转录酶相关的产品或在搜索更多与M-MLV反转录酶相关的内容。 查看更多>
众所周知,外科手术切除是早期单个原发性非小细胞肺癌(NSCLC)的首选治疗方案。饶是如此,术后患者仍有 30% 发生远处转移或局部复发。之前许多文献表明,术中肿瘤细胞的脱落可能是复发潜在因素之一。所以,部分研究者对定量检测肿瘤细胞在术中脱落或转移颇感兴趣。据某些文献报道显示,检测脱落的肿瘤细胞主要手段有细胞形态学检查、免疫组化染色或直接用反转录 查看更多>
    之一 具有高扩增活性,高热稳定性的反转录酶  反转录酶,又称逆转录酶,是依赖RNA为模板的DNA聚合酶的统称。美国科学家H.M.Temin和D.Baltimore在1970年发现了反转录酶,并因此获得了1975年的诺贝尔生理学医学奖。反转录酶的发现对遗传工程技术起来到了巨大的推动作用,是研究真核或者原核生物目的基因,构建cDNA文库等实验不可或缺的工具,与Taq酶等共同构成了现代生物技术的的基础工具酶。        目前已... 查看更多>
在DNA重组中,催化形成重组DNA分子的酶是 A.拓扑异构酶 B.DNA连接酶 C.解链酶 D.DNA聚合酶 E.反转录酶 请帮忙给出正确答案和分析,谢谢!... 查看更多>
随着生物技术的发展,肿瘤临床的早期诊断、鉴别诊断、有效观察及预后监测越来越受益于肿瘤分子标志物的发现及其检测方法的完善。肿瘤患者外周血循环核酸分子的检测成为研究者关注的热点。已有研究证实肿瘤患者外周血循环 DNA 具有和恶性肿瘤相关的分子生物学特征,可作为敏感高效的肿瘤分子标志物。近期文献发现外周血循环 RNA 也存在同样的变化,检测这些来自 查看更多>
北京佳兰生物科技有限公司在发布的M-MLV逆转录酶(RNaseH-)/MMLV反转录酶 供应信息,浏览与M-MLV逆转录酶(RNaseH-)/MMLV反转录酶 相关的产品或在搜索更多与M-MLV逆转录酶(RNaseH-)/MMLV反转录酶 相关的内容。 查看更多>
反转录酶是由上海百赛生物技术有限公司代理或销售的Amresco品牌的试剂,产品来源于美国。上海百赛生物技术有限公司是中国最权威的反转录酶试剂销售服务商之一,在上海等地方销售反转录酶试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业反转录酶仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的反转录酶产品 查看更多>
根据吉利德年度报表显示,吉利德有 7 种在售的艾滋病药物,品牌名分别为:Atripla、Truvada、Viread、Complera、Vitekta、Tybost、Stribild。预计在接下来的 5 年内,吉利德艾滋病药物将继续雄霸艾滋病医药市场,到 2020 年在年度报表中公布的在售艾滋病药物市场份额达逼近 100 亿美元。1. 四丸合一药物 Stribild 吉利德的 Stribild 在 2012 年 8 月 27 日获得美国 FDA 批准上市,由替诺福韦酯(T 查看更多>
Biomatik 小鼠肉瘤病毒逆转录酶,200U/ul M-MuLV Reverse Transcriptase, 200U/ul(A1111) 品牌:Biomatik 货号:A1111 默瑞(上海)生物科技有限公司 上海 诚信值:... 查看更多>
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那你做表达量的时候就不准了啊 不加DNA酶将原有的DNA消化掉,那么你做RT-PCR这个就没意义了 逆转录得到的cDNA和原有的DNA是一样的序列
反转录酶 123
内心很纠结742018-04-03
由它催化转录合成的DNA称为互补DNA(cDNA)。通常情况下,细胞内的转录应由DNA到RNA的,所得RNA为信使RNA(mRNA)供蛋白质合成作模板用。而在部分RNA病毒中,要实现自身扩增,必须具有DNA,因此先由RNA逆转录合成cDNA再由cDNA转录出RNA。逆转录酶可用RT—PCR,将RNA转变为DNA后扩增,以获得RNA的序列。1970年从致癌RNA病毒中发现了反转录酶,并认为此酶与病毒的致癌性质有关。反转录酶也分布于某些正常细胞和胚胎细胞。反转录酶的发现表明不能把生物的遗传信息由DNA→mRNA→蛋白质绝对化,遗传信息也可以从RNA传递到DNA。它促进了分子生物学、生物化学和病毒学的研究,已成为研究这些学科的有力工具。向左转|向右转
我用的是CLONTECH公司的反转录试剂盒,他分两步进行,以便为接下来的RACE作基础。试剂盒提供的有阳性对照MRNA,我的实验样本和对照一起做下去(反转录—RACE)。电泳结果是阳性对照扩出了预期大小的片段,我的标本没东西出来。我有几点想不清楚,请各位指教:1如何判断我的样本反转录是否成功,即反转录酶能到达5’或3‘的末端。2如果5’或3‘末端GC含量高,是不是要换用可耐高热的反转录酶,有这种酶吗?3是不是5’或3‘末端二级结构很复杂,高温也打不开,有什么其他的办法吗?4对于扩增全长,各位有什么好方法吗?眼看就要开题了,实验还毫无结果,真不知道是不是要延期毕业了!!!
为什么说端粒酶是反转录酶123
你大爷JmIp2018-03-17
为什么说端粒酶是反转录酶
只要是细胞,就得走向衰老,现代研究表明,细胞的衰老和端粒的变短有关系。端粒就是DNA,随着细胞分裂次数的增多,端粒在不断变短,端粒酶就是组织端粒变短的。然而正常细胞中,端粒酶的活性受抑制,端粒酶是怎么染端粒变长的呢?实际上端粒酶是由RNA组成的,可以根据碱基互补配对逆转形成DNA,使得变短的端粒变长。所以说端粒酶可以逆转录形成端粒,使端粒不减短!
请问反转录酶AMV和MLV有什么区别?若何选择啊?
想知道大家一般用的那个公司的产品,效果如何?

我用Trizol提取的植物叶片总RNA。
想要用两步法做RT,获得总的CDNA,再去PCR质体中的几个基因。
现在准备器材和试剂。但是网上关于RT-PCR的资料好像侧重原理操作比较多。对各个公司的试剂盒的特点不是很清楚。InvitrogenQiagenPromega这些国外品牌都挺贵。而且相互之间差别挺大的。大家一般用的哪个公司的产品,效果如何?
单独买反转录酶来做效果如何?国内公司的酶效果怎么样?比如Tiangen的酶?
我并不用做定量的RT-PCR,主要目的是获得目的基因的cDNA序列,做一下RNAediting相关的工作。所以要求并不是很高。
人工合成基因的方法主要有两条途径:一是以目的基因转录成的mRNA为模板,逆转录成互补的单链DNA,然后在酶的作用下合成双链DNA,从而获得所需要的基因;二是根据已知的蛋白质的氨基酸序列,推测出相应的 mRNA序列,然后按碱基互补配对原则,推测出它的结构基因的核苷酸序列,再通过化学的方法,以单核苷酸为原料合成目的基因。
逆转录(reverse transcription)是以RNA为模板合成DNA的过程,即RNA指导下的DNA合成。是RNA病毒的复制形式,需逆转录酶的催化。艾滋病病毒(HIV)就是一种典型的逆转录病毒。
逆转录与反转录严格意义上来说没有什么区别,但是逆转录是RNA类病毒自主行为,在整合到宿主细胞内以RNA为模板形成DNA的过程;反转录是进行基因工程过程中,人为地提取出所需要的目的基因的信使RNA,并以之为模板人工合成DNA的过程。二者虽同为RNA→DNA的过程,但地点不同,相对性的来说,逆转录在体内,反转录在体外。
基因工程复习资料123
外婆桥66L齦2018-03-11
为什么说端粒酶是反转录酶只要是细胞,就得走向衰老,现代研究表明,细胞的衰老和端粒的变短有关系。端粒就是DNA,随着细胞分裂次数的增多,端粒在不断变短,端粒酶就是组织端粒变短的。然而正常细胞中,端粒酶的活性受抑制,端粒酶是怎么染端粒变长的呢?实际上端粒酶是由RNA组成的,可以根据碱基互补配对逆转形成DNA,使得变短的端粒变长。所以说端粒酶可以逆转录形成端粒,使端粒不减短!
为什么AccessRT-PCR系统不使用MMLV反转录酶而使用AMV反转录酶?
如题,我现在有AMV反转录酶,但是我发现DDRTPCR都是用MMLV反转录酶来做的,不知道用AMV可以吗,哪位师兄师姐知道给小弟指点指点,小弟先谢过了。
1. Money 鼠白血病病毒(MMLV)反转录酶:有强的聚合酶活性,RNA酶H活性相对较弱。最适作用温度为37℃。
2. 禽成髓细胞瘤病毒(AMV)反转录酶:有强的聚合酶活性和RNA酶H活性。最适作用温度为42℃。
3.Thermus thermophilus、Thermus flavus等嗜热微生物的热稳定性反转录酶:在Mn存在下,允许高温反转录RNA,以消除RNA模板的二级结构。
4.MMLV反转录酶的RNase H突变体:商品名为SuperScript 和SuperScriptⅡ。此种酶较其它酶能多将更大部分的RNA转换成cDNA,这一特性允许从含二级结构的、低温反转录很困难的mRNA模板合成较长cDNA。向左转|向右转
1、使用前每个组份轻轻混匀,然后2000rpm离心20s
2、取灭过菌且无核酸酶的0.2ml离心管,依次加入2~5μgRNAnμL
3、65℃保温5min,然后冰浴5min;
4、往3步骤中的0.2ml离心管依次加入下列组份
RNase抑制剂(40u/μL)0.5μL
10×M-MLVReactionBuffer2μL
DTT(200mM)1μL
逆转录酶(M-MLV)1μL
5、轻轻混匀后,然后2000rpm离心20s;
6、先在37℃保温1hr,然后70℃保温15min;
7、上述产物可立即进行下一步的PCR反应或-20℃保存。向左转|向右转
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