Lowry法蛋白定量试剂盒的改良
来自 : mayitao
Lowry法蛋白定量试剂盒的改良
许多年来Lowry法是最常用也是被引用次数最多的蛋白质定量方法。其原理是在碱性条件和福林酚Folin-CiocalteuReagent存在下，铜离子与蛋白质形成可溶性兰色复合物，在750nm有最大光吸收值。
Lowry法的优点是灵敏度高，对脂质、SDS等干扰物质不甚敏感。经典Lowry法的主要缺点是，每次蛋白定量之前必须用两种不同的试剂A和B(ReagentAandB)新鲜配制碱性铜试剂(ReagentC)。碱性铜试剂(ReagentC)不稳定因而必须每天新鲜配制；另外，经典Lowry法产生的蛋白颜色复合物稳定性较差，在反应20-120分钟内变化9.2%；蛋白浓度低于15μg/ml时标准曲线的重复性较差；本试剂盒采用改良的Lowry法，用单一添加有稳定剂的碱性铜试剂代替经典Lowry法的试剂A、试剂B、和试剂C。这种改良碱性铜试剂在室温下稳定12个月以上；测定反应产生的铜蛋白-蓝色复合物相当稳定，在2小时内的变化不超过0.3%；反应曲线几乎100%与原有方案吻合，重复性佳。
因而改良Lowry法蛋白定量试剂盒与BCA法蛋白质定量试剂盒一样，具有非常好的试剂稳定性、检测灵敏度、和重复性，并且测定过程变得十分简捷，是经典Lowry法忠实用户的理想选择。
灵敏度高、稳定性较差
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