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Caco2通透性与转运体试验

来自 : mayitao

提供商：	盛世华康生物医药科技有限公司
服务名称：	体外药代动力学
规格：	建模、检测

     盛世华康生物医药科技股份有限公司拥有先进的科研理念，可开展各项体外药代动力学，主要以Caco-2细胞模型为主，研究药物渗透与转运功能。
Caco-2 通透性与转运体试验
    须注明单向/双向
    周期一般4-6周
Caco-2细胞模型建立大致步骤：
   1、细胞的培养及接种铺板
   2、检测电阻
       Caco-2细胞培养21天，检测电阻。
   3、通透性实验
       首先弃去Transwell小室内外培养液，用37℃Hanks液（PH=7.4）轻柔地清洗细胞表面3次以除去表面的杂质，然后加入37℃Hanks液，置于37℃孵箱中孵育30分钟。吸去缓冲溶液，在AP侧（内孔）加入Xml含有受试药物的Hanks液，作为供给液，在BL侧（外孔）加入Ym1空白的Hanks液作为接收液。此为吸收方向，A-B。
   4、外排实验
      弃去Transwell小室内外培养液，在BL(外孔）侧加入Yml含有受试药物的Hanks液，作为供给液，在AP侧（内孔）加入Xm1空白的Hanks液作为接收液。此为外排方向，B-A。
   5、采样和检测
      将载有Transwell小室的24孔板于37℃中温孵，设定不同时间点时间从接受池取出Zul的接受液进行液相检测，然后补加相应体积的空白37℃Hanks液。
   6、双向转运实验
      相同药物同时进行通透性实验和外排实验，考察药物的渗透方向率（PDR)。

服务内容	技术要点	应用
理化性质分析	--	理化性质研究
油水分布系数LogD7.4	正辛醇/水	理化性质研究
溶液中稳定性和溶解度	DMSO溶液中物质的溶解度和溶解曲线等	理化性质研究
溶媒中溶解稳定性	--	给药等
溶媒中溶解度		给药等
溶媒中溶解动力学研究		给药等
胃肠液稳定性	体外胃肠液模拟溶液SIF，SGF等	吸收研究
胃肠液溶解度	体外胃肠液模拟溶液SIF，SGF等	吸收研究
体液/组织稳定性研究	血浆、全血、肝微粒体、胆汁、脑匀浆以及其他组织匀浆	分布研究
体液/组织蛋白结合研究	采用不同孔径大小的过滤膜或柱过滤研究血浆、全血、胆汁、脑匀浆以及其他组织匀浆	分布研究
血细胞/血浆分配比	须注明定量/定性	分布研究
肝药酶代谢研究	重组酶CYP450s，肝微粒体，肝细胞胶质，S9组分，原代肝细胞包括Ⅰ相代谢，Ⅱ相代谢等	代谢研究
CYP代谢亚型鉴定	CYP450s化学抑制法，重组CYP酶法，PhenotypingKit等	代谢研究
CYP代谢亚型鉴定	S9组分，原代肝细胞等	代谢研究
体外或体内代谢产物鉴定	体外：肝微粒体，S9组分，肝细胞；	代谢研究
体外或体内代谢产物鉴定	体内：胆汁，粪便，尿液等	代谢研究
基于肝药酶抑制研究(DDI)	单点法、多点法，Cocktail法，IC₅₀测定	联合用药
TDI	重组CYP酶，肝微粒体或S9（Ki,KIandKinact）	联合用药
细胞色素P450酶诱导研究	三明治模型:mRNA和酶活性检测	联合用药
通透性与转运体实验	利用PAMPA,原代肝细胞,MDCK/MDCK-MDR1，Caco-2等系统研究跨膜转运等，如P-gp，BCRP,SLC（OAT,OCT,OATP和NTCP等）底物和抑制研究等	药物体内转运
在体代谢，如脑，肠等	--	模拟体内研究
动物饲养	实验室不接受无合法来源、未经检疫的动物	提供SPF级动物实验室饲养环境
动物手术、样本收集	实验动物：小鼠、大鼠、豚鼠等给药方式：口服，静脉，腹腔，皮下等取样类型：血液、脑脊液、脑、心、肝、脾、肺、肾、肌肉等	给药或样品收集
药物代谢动力学实验（PK）	体内PK/TK实验设计（小鼠、大鼠、豚鼠、兔等）给药剂量预测及药物代谢动力学模型有单次、多次给药及联合给药研究给药途径：静脉，口服，皮下，肌肉等PK/TK样品分析（ELISA、LC-MS、MS）药代动力学参数计算（F、T_1/2、C_max、T_max、CL、C_ss、AUC）	研究化合物体内的代谢动力学过程