纤维素的高碘酸活化实验一基本方案
| 实验方法原理 | |||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 实验材料 | 纤维素粉 试剂、试剂盒 | NaHCO3-NaIO4碳酸钠缓冲液。NaBH4溶液乙酸钠-乙酸PBS 实验步骤 | 实验所需「试剂」具体见「其他」 将2g纤维素悬浮于40ml0.1mol/LNaHCO3-0.06mol/LNaIO4中，黑暗条件下放置2h，然后在玻璃料上用0.1mol/LpH9.0碳酸钠缓冲液冲洗。在40ml缓冲液中加入待固定的蛋白质（约1mg/ml），室温振荡过夜。为去除希夫碱，在溶液中加入2mlNaBH4，室温振荡30min。之后再次加入2mlNaBH4，室温振荡30min。用0.1mol/LpH4.0乙酸盐-乙酸、PBS和0.05％的吐温20冲洗固体材料。 注意事项 | 展开 其他 | 试剂： 0.1mol/LNaHCO3-0.06mol/LNaIO4（NaHCO3，Mr＝84.0；NaIO4，Mr＝213.9；8.4gNaHCO3，12.8gNaHCO3溶于100mlH2O） 0.1mol/L碳酸钠缓冲液（NaHCO3－Na2C03），pH9.0 NaBH4溶液（0.1gNaBH4溶于10ml0.1mol/LNaOH，现配） 0.1mol/L乙酸钠-乙酸，pH4.0 PBS（磷酸缓冲液：10mmol/L磷酸二氢钾-钠，pH7.2，0.8％NaCl，0.02％KCl） 0.05％吐温20溶于PBS |
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发布于 ： 2018-08-10
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