DyLight系列荧光染料是一种近年来被广泛应用的新型荧光染料,具有很好的光谱宽度,更强的荧光强度,更高的光学耐受性(抗淬灭性),对pH不敏感,分子较小而渗透性更好的优势,越来越受到广大科研人员的喜爱。
联科生物目前提供4种Dylight荧光染料,发射光范围从绿光到远红光,,适合常用的激发光及滤片。
图1:Dylight荧光标记二抗的激发(左)和发射(右)光谱 |
荧光素 | 吸收峰(nm) | 发射峰(nm) |
DyLight488 | 493 | 518 |
DyLight549 | 555 | 568 |
DyLight594 | 591 | 616 |
DyLight649 | 652 | 670 |
表1:Dylight荧光标记二抗的最大激发和发射波长
一、Dylight绿色光染料
DyLight488-标记的抗体,其最大吸收在493nm,最大发射为518nm。亮度比Cy2和FITC亮,与Alexa488相当,但背景较低。
(见图2、图3)
图2:HEp-2细胞,检测系统为ANA一抗(Bio-Rad)和不同荧光标记的二抗。上排使用的抗淬灭封片剂为ProLongGold(Invitrogen),下排是用含n-propylgallate(Fluka)的PBS-90%甘油封片。NikonLABOPHOT荧光显微镜观察,光下暴露1秒后选取最亮的部分用NikonD-70DSLR相机放大100X拍照。
DyLight488标记的抗体相比FITC和Cy2抗体,在不加抗淬灭剂的情况下,光稳定性更强(见图4)。抗淬灭剂不会增加其光稳定性(见图5)。
二、DyLight红色光染料
DyLight549-标记的抗体,其最大吸收在555nm,最大发射为568nm(见图1、表1)。亮度比TRITC亮,与Cy3和AlexaFluor555相当,但背景较低。(见图6)
图5:HEp-2细胞,检测系统为ANA一抗(Bio-Rad)和不同荧光标记的二抗。上排使用的抗淬灭封片剂为ProLongGold(Invitrogen),下排是用Vectashield(VectorLabs)封片。NikonLABOPHOT荧光显微镜观察,光下暴露1秒后选取最亮的部分用NikonD-70DSLR相机放大100X拍照。
在不加抗淬灭剂,只用PBS-90%甘油封片的情况下,DyLight549与Alexa555相比的光稳定性相当,比Cy3稍强(见图7)。抗淬灭剂可以增加这三种荧光二抗的光稳定性(见图8)。
三、DyLight深红色光染料:
图8:HEp-2细胞,检测系统为ANA一抗(Bio-Rad)和不同荧光标记的二抗。使用的抗淬灭封片剂为ProLongGold(Invitrogen)。NikonLABOPHOT荧光显微镜观察,TexasRed二抗光下暴露2秒,Alexa和DyLight二抗光下暴露1秒后选取最亮的部分用NikonD-70DSLR相机放大100X拍照。DyLight594-标记的抗体,其最大吸收在591nm,最大发射为616nm。比Alexa594明显要亮,亮度和水溶性都比TexasRed好很多。(见图9)
ProLongGold封片时,DyLight594与Alexa594相比光稳定性相当,比强(见图10,左)。Vectashield封片时,DyLight594和Alexa594的光稳定性都比TexasRed弱(见图10,中)。含n-propylgallate的PBS-甘油封片时,DyLight594的光稳定性最强(见图10,右)。
图9:随时间变化的荧光强度曲线,检测细胞:HEp-2,检测系统:ANA(Bio-Rad)一抗和不同荧光标记的goatanti-humanIgG(H+L),从左到右分别用ProLong(Invitrogen)、Vectashield(VectorLabs)和含n-propylgallate(Fluka)的PBS-甘油封片。
四、DyLight远红外光染料:
DyLight649-标记的抗体,其最大吸收在652nm,最大发射为670nm。亮度比Cy5和Alexa647亮,背景比Alexa647低(见图12)。
图10:人空肠邻近部位的切片,检测系统:anti-PGP一抗和DyLight649(red)二抗(左)、Cy5(red)二抗(右)。DyLight649的染色更强.图片来自于明尼苏达大学的Dr.GwenCrabb和Dr.WilliamR.Kennedy。
图11:不同的荧光标记二抗检测人外周血淋巴细胞CD3表达,数据为FACSCaliber流式细胞仪(BectonDickinson)采集并分析。 |
联科生物Dylight系列荧光二抗产品特点:►亮度更高,保证出色的灵敏性 ►光稳定性更好-对光漂白有超强抵抗能力 ►更高的光学耐受性 ►性价比高 ►价格便宜,全部现货供应 |
Dylight系列荧光二抗产品列表:
目录号 | 名称 | 规格 | 目录价 |
70-GAM4881 | Dylight488F[ab’]2goatanti-mouseIgG(H+L) | 50μl | 500 |
70-GAM4882 | DyLight488goatanti-mouseIgG(H+L) | 100μl | 500 |
70-GAM5492 | DyLight549goatanti-mouseIgG(H+L) | 100μl | 500 |
70-GAM5942 | DyLight594goatanti-mouseIgG(H+L) | 100μl | 500 |
70-GAM6492 | DyLight649goatanti-mouseIgG(H+L) | 100μl | 500 |
70-GAR4881 | Dylight488F(ab’)2ofgoatanti-rabbitIgG(H+L) | 50μl | 500 |
70-GAR4882 | DyLight488goatanti-rabbitIgG(H+L) | 100μl | 500 |
70-GAR5492 | DyLight549goatanti-rabbitIgG(H+L) | 100μl | 500 |
70-GAR5942 | DyLight594goatanti-rabbitIgG(H+L) | 100μl | 500 |
70-GAR6492 | DyLight649goatanti-rabbitIgG(H+L) | 100μl | 500 |
70-RAG4881 | DyLight488F(ab’)2ofrabbitanti-goatIgG(H+L) | 50μl | 600 |
70-RAG4882 | DyLight488rabbitanti-goatIgG(H+L) | 100μl | 600 |
70-RAG5492 | DyLight549rabbitanti-goatIgG(H+L) | 100μl | 600 |
70-RAG5942 | DyLight594rabbitanti-goatIgG(H+L) | 100μl | 600 |