SPA 各种免疫检测试剂制备实验一SPA 纯品
| 实验方法原理 | SPA纯品系由含A蛋白的CowanI株金黄色葡萄球菌中纯化获得。其制备过程除细菌培养外，主要有提取和纯化这两个工艺组成。提取方法多种，其中溶葡萄球菌素与亲和色谱组合方法最有效。现介绍如下。 | ||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 实验材料 | 菌苔 试剂、试剂盒 | Tris·HCl碳酸氢铵溶葡萄球菌素饱和硫酸铵 仪器、耗材 | DEAE-SephadexA50IgG-Sepharose4B亲和层析柱 实验步骤 | 1.用0.05mol/L（pH7.5）的Tris·HCl洗下菌苔，每100g湿菌加溶葡萄球菌素5mg，调节pH值到3.5，离心后取上清，并将pH值调到7.0。 2.用饱和硫酸铵沉淀，溶解透析，透析物用DEAE-SephadexA50纯化，以0.1mol/L碳酸氢铵（NH4HCO3）平衡后上样，再平衡过夜。 3.用0.4mol/LNH4HCO3洗脱（流速1.5ml/min），样品测定A275nm和活性，将含活件者合并、浓缩、冻干保存于-40℃中。 4.上述纯化获得的SPA可进一步用IgG-Sepharose4B亲和层析柱过滤，进一步纯化SPA。 5.纯度鉴定用7.5％聚丙烯酰胺凝胶为分离系统进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，样品浓度为1mg/ml，加样量为40μl。电泳结果应显示一条明显条带。 注意事项 | 展开 其他 | 展开 |
免责声明 本文仅代表作者个人观点，与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实，对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺，请读者仅作参考，并请自行核实相关内容。
版权声明 未经蚂蚁淘授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的，应该授权范围内使用，并注明“来源：蚂蚁淘”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
发布于 ： 2018-08-08
阅读（248）
▍
相关分类
▍
相关文章
PI(4)P Mass Strip Kit 品牌:Echelon 美国网
细胞凋亡的机理
小鼠己糖激酶1试剂盒(HK1精确检测)有限公司
免疫荧光(Immunofluorescence, IF)实验方法
Western Blot 蛋白免疫印迹原理/实验步骤流程/WB FAQ@德泰生物
Gasdermin D蛋白(GSDMD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GSDMDC1; DF...
超滤机和纯水机的区别有哪些_专区精选_太平洋家居网
参展商CPhI India 2015年世界制药原料印度展_Exhibitions...
简述基因突变的主要特点。大众点评网
酵母双杂交筛选 实验方法
免疫系统疾病有哪些 是什么原因导致 三九养生堂
进口ELISA试剂盒_大鼠ELISA检测试剂盒_金标检测试剂盒上海佳和...
▍
相关问答
