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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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正品保证： 全球直采 在线追溯
蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
及时交付： 限时必达 畅选无忧
蚂蚁淘的运营团队都是有着多年经验的成员，他们熟悉海外采购、仓储物流、报关等环节； 同时通过在线的流程监控，蚂蚁淘的进口速度比传统企业提高了50%以上， 部分产品甚至能做到7-10天到货，即蚂蚁淘的“时必达”服务。
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蚂蚁淘的价格是真实透明的，并且具有很大的价格优势，不需要繁杂的询价比价； 报价单与合同可以直接在线生成或打印；就像在京东购物一样， 您的鼠标点击几 次即完成在蚂蚁淘的采购，订单详情会告诉您所有进程。
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我们做免疫组化和WB一般是采用二抗显色,为什么不直接用标记物标记...123
stokkinngu2017-09-28
直接把荧光基团连接在一抗上确实是可以的，但是难就难在抗体与荧光基团的连接，每换一种抗体，就需要重新连接一次，这不仅麻烦，成本也就高了。
而抗体的Fc段是不变的，也就是一抗的Fc段不变，那么只需要连接针对一抗Fc段的二抗就足够应付任何情况了，这样就容易得多。
而抗体的Fc段是不变的，也就是一抗的Fc段不变，那么只需要连接针对一抗Fc段的二抗就足够应付任何情况了，这样就容易得多。
【求助】western blot 一抗和二抗的来源必须相同吗123
我爱崔Bk22018-03-29
从抗体试剂公司购买。
一抗和二抗的制备方法什么的，推荐阅读“抗体工程”相关的一些文章和书籍。
简单点的信息，可以看百度百科，查阅“一抗“、“二抗”、“抗体”…
一抗和二抗的制备方法什么的，推荐阅读“抗体工程”相关的一些文章和书籍。
简单点的信息，可以看百度百科，查阅“一抗“、“二抗”、“抗体”…
【求助】western blotting的一抗用什么溶液稀释？ 经验共享 分析测...123
goeqつ2112017-09-28
western blot 一抗一般都是以原液的形式保存的，不需要用溶剂溶解
western blot 一抗使用的时候一般只需要稀释，购买时厂家应该会提供一抗稀释液。如果没有一抗稀释液可以用TBST或者PBST稀释，这个要看具体使用的情况了
western blot 一抗使用的时候一般只需要稀释，购买时厂家应该会提供一抗稀释液。如果没有一抗稀释液可以用TBST或者PBST稀释，这个要看具体使用的情况了
【讨论】再谈免疫组织化学Triton X100破膜和二抗封闭原理问题...123
wanliheng2021-07-20
最近一直关注免疫荧光，几个问题问一下：
第一：tritonX-100破膜的原理到底是什么，我以前看过的资料是它是个脂溶性的东东，可以溶解细胞膜和核膜的脂质，从而形成孔洞，让抗体进入，所以有人说tritonx-100又叫打孔剂。一般用0.3%的浓度，PBS稀释。
但是总有人问我，如果是膜蛋白染色，破不破膜？
如果是膜蛋白，要看抗体和抗原的结合位点，如果是跨膜蛋白的话，其结合位点在胞内段的话肯定是需要破膜的。
根据上面的理解，破膜并不会对蛋白造成影响，只是溶解了脂质形成“孔”。
所以我觉得如果条件允许，常规每次都破一下，还是很好的选择。
你的理解是什么呢？
第二：二抗封闭原理的问题。
上一抗之前都要用二抗来源的血清封闭，那么封闭的原理到底是什么。
看资料说是封闭样品中能够与二抗发生非特异性结合位点，降低非特异性显色。用的封闭液是二抗来源的血清。
我的理解：二抗也是抗体，通常用的是说是和一抗的fc端特异性结合的IgG。
如果是减少非特异性结合的话，那么应该是二抗能够跟样品中的某些东西反应，而二抗来源的血清能先进行阻断。
我的问题是：样品中到底是什么物质，可以和二抗来源的血清中的什么物质，进行结合从而阻断。（即样品中，和二抗来源的血清中，分别是两种什么物质发挥作用）；
但是一个新的问题产生了，大家一般多用的是BSA封闭，BSA叫做牛血清白蛋白，他是如何起到封闭作用的呢？
第三：最近做免疫荧光，一个不该在细胞核表达的抗体总是出现细胞核的非特异性染色。
本来我怀疑是抗原弥散了，但是细胞是固定过了的啊，而且同样的方法染色另外一个胞浆表达的抗体，就没有这个问题。
白死不得其解，快要愁死了。
谢谢，请大家指导！
@wh2008
@byd123
@skyskytotop
@甲醛
@多聚甲醛
第一：tritonX-100破膜的原理到底是什么，我以前看过的资料是它是个脂溶性的东东，可以溶解细胞膜和核膜的脂质，从而形成孔洞，让抗体进入，所以有人说tritonx-100又叫打孔剂。一般用0.3%的浓度，PBS稀释。
但是总有人问我，如果是膜蛋白染色，破不破膜？
如果是膜蛋白，要看抗体和抗原的结合位点，如果是跨膜蛋白的话，其结合位点在胞内段的话肯定是需要破膜的。
根据上面的理解，破膜并不会对蛋白造成影响，只是溶解了脂质形成“孔”。
所以我觉得如果条件允许，常规每次都破一下，还是很好的选择。
你的理解是什么呢？
第二：二抗封闭原理的问题。
上一抗之前都要用二抗来源的血清封闭，那么封闭的原理到底是什么。
看资料说是封闭样品中能够与二抗发生非特异性结合位点，降低非特异性显色。用的封闭液是二抗来源的血清。
我的理解：二抗也是抗体，通常用的是说是和一抗的fc端特异性结合的IgG。
如果是减少非特异性结合的话，那么应该是二抗能够跟样品中的某些东西反应，而二抗来源的血清能先进行阻断。
我的问题是：样品中到底是什么物质，可以和二抗来源的血清中的什么物质，进行结合从而阻断。（即样品中，和二抗来源的血清中，分别是两种什么物质发挥作用）；
但是一个新的问题产生了，大家一般多用的是BSA封闭，BSA叫做牛血清白蛋白，他是如何起到封闭作用的呢？
第三：最近做免疫荧光，一个不该在细胞核表达的抗体总是出现细胞核的非特异性染色。
本来我怀疑是抗原弥散了，但是细胞是固定过了的啊，而且同样的方法染色另外一个胞浆表达的抗体，就没有这个问题。
白死不得其解，快要愁死了。
谢谢，请大家指导！
@wh2008
@byd123
@skyskytotop
@甲醛
@多聚甲醛
western blot 一抗和二抗的来源必须相同吗_问答详情_一抗_抗体类_...123
枫默·峢l2017-09-28
必须相同。比如一抗是鼠源的，那么二抗必须是鼠源的；如果一抗是兔源的，那二抗必须是兔源的。
否则一抗和二抗无法结合。
否则一抗和二抗无法结合。
Western Blot 中一抗二抗怎么选择? 动植物与海洋生物论坛123
陡变吧BTD2018-03-26
首先确定你所选的检测蛋白的状态，比如有无标签，如6*HIS等。
选择一抗就根据检测蛋白的状态来选，如果有蛋白带标签，就选针对标签的抗体。
如果没有标签，那么就要自己制备一抗。
二抗的选择则主要根据一抗的来源来选择，如果一抗是鼠源的，二抗一般就选用羊抗鼠的就可以了。
选择一抗就根据检测蛋白的状态来选，如果有蛋白带标签，就选针对标签的抗体。
如果没有标签，那么就要自己制备一抗。
二抗的选择则主要根据一抗的来源来选择，如果一抗是鼠源的，二抗一般就选用羊抗鼠的就可以了。
求助稀释好的一抗和二抗一般最多能重复使用几次_问答详情_蚂蚁淘...123
CSU-zw08102017-04-10
如果抗体使用次数太多会使背景变黑吗？
HRP标记的二抗可否用ECL化学发光显色法检测_问答详情_二抗_...123
茶小荼2016-09-22
一抗二抗的介绍 123
不许说1942017-12-02
第一抗体就是平常所说的抗体，即能和抗原特异性结合。第二抗体是能和抗体结合的，即抗体的抗体。主要用于检测抗体的存在。一抗是针对抗原的抗体，二抗是针对一抗的抗体。即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。也就是说，抗原进入机体刺激机体免疫系统产生免疫应答，由B细胞可以产生与相应抗原发生特异性结合的特殊蛋白质。一抗二抗都是一种可以特异结合别的物质的基团，而且一抗可以至少结合两种其他基团（底物和二抗）。
一抗：可以特异结合底物，就是识别出我们想要检测的东西。一抗和底物结合与否用肉眼是看不出来的。二抗：可以和一抗结合，并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团），作用是检测一抗。 如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团），则不需要二抗。但这样成本很高，因为一种一抗只识别一种底物。所以如今的设计一般是二抗带上可检测标记，再来检测一抗。而一抗识别底物。这样，当一抗结合到底物上，就可以通过二抗检测出来。
一抗：可以特异结合底物，就是识别出我们想要检测的东西。一抗和底物结合与否用肉眼是看不出来的。二抗：可以和一抗结合，并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团），作用是检测一抗。 如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团），则不需要二抗。但这样成本很高，因为一种一抗只识别一种底物。所以如今的设计一般是二抗带上可检测标记，再来检测一抗。而一抗识别底物。这样，当一抗结合到底物上，就可以通过二抗检测出来。
二抗可以回收利用吗?_答魔科研123
11395792021-07-25
Western Blotting——封闭,孵一抗,二抗,曝光_一心园123
唯爱一萌3715462018-05-02
将抗体稀释到推荐浓度，这要是看你放膜的容器大小，如果容器刚好和膜差不多，只要配少量的一抗溶液就可以完全覆盖膜，但是如果容器较大，就需要事先看多少ml的溶液才能够用。
抗体溶液倒到膜上后，将容器放到一个水平摇床，或者是染色摇床上，缓慢的摇动。可以在4C过夜孵育，也可以在室温孵育1h即可。
抗体溶液倒到膜上后，将容器放到一个水平摇床，或者是染色摇床上，缓慢的摇动。可以在4C过夜孵育，也可以在室温孵育1h即可。
雅安达：一抗二抗的概念与要点_教育装备采购网123
TA299581958122018-04-29
指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。这种反应即可在机体内进行，也可以在机体外进行。抗原抗体反应的过程是经过一系列的化学和物理变化，包括抗原抗体特异性结合和非特异性促凝聚两个阶段，以及由亲水胶体转为疏水胶体的变化。
HBsAg(表面抗原)
HBsAb(表面抗体)
HBeAg(E抗原)
HBeAb(E抗体)
(核心抗体)
最多见的是“三抗”阳性：“抗-HBs+、抗-HBe、和抗- HBc+”，这说明乙肝病毒感染结束，体内病毒清除，提示这个人免疫功能十分正常，可以献血，也可以应用他的血制造高效价乙肝免疫球蛋门（HBIG），用于对乙肝的防治。
二抗阳性”即“抗-HBs+和抗-HBe+”或“抗-HBs+和抗-HBc+”向左转|向右转
HBsAg(表面抗原)
HBsAb(表面抗体)
HBeAg(E抗原)
HBeAb(E抗体)
(核心抗体)
最多见的是“三抗”阳性：“抗-HBs+、抗-HBe、和抗- HBc+”，这说明乙肝病毒感染结束，体内病毒清除，提示这个人免疫功能十分正常，可以献血，也可以应用他的血制造高效价乙肝免疫球蛋门（HBIG），用于对乙肝的防治。
二抗阳性”即“抗-HBs+和抗-HBe+”或“抗-HBs+和抗-HBc+”向左转|向右转
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