【求助】双抗体夹心法Elisa的棋盘滴定结果，到底哪个浓度是最合适的？

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2013-07-18

问题描述：

各位大侠，我做了两次棋盘滴定：
第一次：包被抗体浓度为：8ug/ml,4,2,1,0.5,0.25,0为A,B,C,D,E,F,G
血清稀释度为1:100
酶标抗体稀释度为：1:1000,1:5000,1:10000,1:25000为1,2，3,4
结果为：1234
A3.3440.7120.4900.238
B2.7570.5230.3450.176
C2.4280.4550.3100.172
D>4.51.7771.2150.439
E>4.51.3570.7890.424
F1.1090.2540.1720.110
G1.3660.3310.1970.069(空白)从结果可以判断包被抗体浓度1ug/ml最合适

第二次：包被抗体1ug/ml
血清稀释度为1:25,1:50,1:100,1:150,1:200,1:250,1:300,空白为A,B,C,D,E,F,G,H
酶标抗体稀释度为：1:1000,1:5000,1:10000,1:25000为1,2，3,4
结果为：1234
A2.9930.6390.3380.236
B3.0210.7220.3070.191
C2.3360.4960.3080.176
D2.2560.4640.3040.176
E2.0310.4160.2470.139
F1.8300.3360.2310.153
G1.5980.3320.2270.132
空白H0.1580.0780.0720.074
这样的话应该是血清稀释度1:50最合适，酶标抗体稀释度1:1000最合适，但是这样的话OD值为3.021，是不是太大了？OD值是不是在1左右比较好呢？应该选择哪个浓度，哪个稀释度来做正式试验呢？

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wangping980623

用户

自己顶一下，着急等待中。。。

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limichuan

用户

展开引用wangping980623各位大侠，我做了两次棋盘滴定：第一次：包被抗体浓度为：8ug/ml,4,2,1,0.5,0.25,0为A,B,C,D,E,F,G血清稀释度为1:100酶标抗体稀释度为：1:1000,1:5000,1:10000,1:25000为1,2，3,4结果为：1234A3.3440.7120.4900.238B2.7570.5230.3450.176C2.4280.4550.3100.172D>4.51.7771.2150.439E>4.51.3570.7890.424F1.1090.2540.1720.110G1.3660.3310.1970.069(空白)从结果可以判断包被抗体浓度1ug/ml最合适第二次：包被抗体1ug/ml血清稀释度为1:25,1:50,1:100,1:150,1:200,1:250,1:300,空白为A,B,C,D,E,F,G,H酶标抗体稀释度为：1:1000,1:5000,1:10000,1:25000为1,2，3,4结果为：1234A2.9930.6390.3380.236B3.0210.7220.3070.191C2.3360.4960.3080.176D2.2560.4640.3040.176E2.0310.4160.2470.139F1.8300.3360.2310.153G1.5980.3320.2270.132空白H0.1580.0780.0720.074这样的话应该是血清稀释度1:50最合适，酶标抗体稀释度1:1000最合适，但是这样的话OD值为3.021，是不是太大了？OD值是不是在1左右比较好呢？应该选择哪个浓度，哪个稀释度来做正式试验呢？......请问兄台，你知道自己的实验目的吗！你知道棋盘是用来干嘛的吗！想清楚自然你就明了了！

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微笑镜子8

用户

我想问一下，你的空白值是不是太大了

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