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American Research Products/AAV-8 Titration ELISA/96T/PRAAV8-96T
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American Research Products/AAV-8 Titration ELISA/96T/PRAAV8-96T
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arp1
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PRAAV8-96T
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Product NameAAV-8 Titration ELISA
DescriptionEnzyme Immunoassay for the Quantitative Determination of AAV Serotype 8 Particles in Cell Culture Supernatants and Purified Virus Preparations
BackgroundAdeno-associated virus (AAV) is a non pathogenic ssDNA virus that is a topic of intense study in gene therapy. The virus transduces a wide variety of dividing and non-dividing cells showing long-term gene expression with no cellular immune response. AAV has been used in several clinical trials (e.g. FIX, CFTR, Parkinson’s disease, Canavan disease) showing no serious vector-related adverse effects. Methods for the characterisation of AAV preparations currently include titration ELISA, realtime PCR, DNA dot blot, determination of transducing units, infectious center assay, SDSPAGE or electron microscopy. Immunotitration by ARP's AAV8 Titration ELISA offers a fast, sensitive and reproducible method for titration of intact AAV8 wt virions, AAV8 recombinant virions or assembled and intact empty AAV8 capsids.
PrincipleThe assay is based on the sandwich ELISA technique. A monoclonal antibody specific for a conformational epitope on assembled AAV8 capsids (ADK8) is coated onto microtiter strips and is used to capture AAV8 particles from the specimen. Captured AAV particles are detected in two steps. First a biotin-conjugated monoclonal antibody to AAV8 (ADK8) is bound to the immune complex. In the second step streptavidin peroxidase conjugate reacts with the biotin molecules. Addition of substrate solution results in a color reaction which is proportional to the amount of specifically bound viral particles. The absorbance is measured photometrically at 450 nm. The kit control provided contains an AAV 2/8 particle preparation, including empty capsids. It shows a typical titration curve when used in dilutions of steps of two (Fig. 1). It allows the quantitative determination of samples of an unknown particle titer (immunological titer) and the calibration of an in-house AAV8 preparation (e.g. infectious titer, transducing units, DNA dot blot titer).
Storage2-8C
Intended UseLimited Use Label License: Research Use OnlyProduct is exclusively licensed to PROGEN Biotechnik GmbH. The use of these products for the development, manufacturing and sale of secondary products/derivatives which are based on the purchased products and/or which include the purchased product require a royalty based sub-license agreement.
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采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠VEGF-D单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的VEGF-D与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠VEGF-D,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavid 查看更多>
639-07271 大鼠 C-肽 ELISA试剂盒(U型),【品牌】和光纯药WAKO<br>【货号】639-07271<br>【中文名称】大鼠 C-肽 ELISA试剂盒(U型)<br>【英文名称】Lbis C-Peptide Rat (U type)<br>【级别】-<br>【规格】96tests<br>【CAS】-<br>【质保】100%售后<br>【库存】2个<br>【保质期】36个月<b 查看更多>
兔子神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒,兔子神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒 查看更多>
3 竞争抑制ELISA方法的建立3.1 抗体的酶标记及质量鉴定本试验采用改良过碘酸钠法将辣根过氧化物酶标记在抗体上[1],标记完后取上清用Sephedex G200 凝胶层析进行纯化,洗脱液为0.2mol/L pH7.4的PBS,流速为15ml/h,分步收集,每支3ml,以紫外分光光度计测A280吸光度值,以洗脱体积 查看更多>
本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗猪VEGF单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的VEGF与单抗结合,加入生物素化的抗猪VEGF,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,VEGF浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中VEGF浓度。 查看更多>
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠TGF-b1单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的TGF-b1与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠TGF-b1,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavid 查看更多>
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠Telomerase单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的Telomerase与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠Telomerase,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记 查看更多>
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗猪IL-10单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的IL-10与单抗结合,加入生物素化的抗猪IL-10,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生 查看更多>
一.ELISA 标准操作要点优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA 检测结果准确可靠的必要条件。ELISA 中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的本公司要求使用的纯化水电导率小于1.5μs/cm。1. 标本的采取和保存大部分ELISA 检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集, 查看更多>
采用双抗体夹心ELISA法。用抗猪IgG单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的IgG与单抗结合,加入酶标抗体,形成免疫复合物连接在板上,加入酶底物TMB,出现蓝色,加终止液硫酸,颜色变黄 查看更多>
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠sVCAM-1单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的sVCAM-1与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠sVCAM-1,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Strepta 查看更多>
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比如的试剂盒检测蛋白质的浓度范围是10--100nmol/ml,而你的三个样品浓度为100,200,和300.那么你检测到的数值是一样的,都是试剂盒检测的最大值100。
elisa中试剂滴加顺序是不可以改变的,改变之后会影响实验,而且每个步骤都有严格的规定,这个只能严格按照实验步骤实施,这样子才比较正常。
1、看产品品种
首先要什么有什么的,你得好好考虑一下。
2、看生产地址
根本没有生产地址,我们知道做实验做产品需要很多的仪器、试剂、耗材,没有人相信一间简单的屋子可以生产各种样的试剂盒。
3、看产品包装
没有任何的生产地址、联系方式等信息,这种产品有问题了连个投诉的地方都没有。
4、看公司网站
有些打着国外原装旗号,整个公司网站为英文页面,实际注册IP地址在中国。如果写着国外的地址,让你国外的朋友实地去看一下!
5、做交叉验证
拿对方提供的几个种类的试剂盒,把里面的关键组份相互替换做做实验,如果交叉严重,只能说明是一种原料生产的试剂盒贴了不同的标签。
6、看价格
价格低得离谱,却打着进口大公司原料分装,核算成本,这种低得离谱的价格是连原料都买不起的。
ELISA就是我们常说的酶联法。
现在国内最差也是用3代试剂,有些地方会用4代试剂。
4代试剂(检查抗原+抗体)——窗口期为4周。因为抗原于3-4周达到复制的峰值,此时通过4代试剂检查,如果感染了HIV,抗原/抗体至少有一个为阳性,如果都是阴就排除了。
3代试剂(只查抗体)——窗口期为6周。
以上为理论分析+临床经验的结果,可以说是99.9%的准确度。

但是目前FDA、CDC和试剂生产商统一达成的共识,也就是针对普通人,最保守的窗口期是3个月。无论什么试剂,3个月都100%排除。
ELISA的原理
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。
如果你是HRP的二抗,显色液A、B的成分一般是H2O2和TMB(或OPD),至于具体A是那一个B是那一个你要看说明书。HRP催化过氧化物H2O2,其反应式如下:D=TMB(或OPD)DH2+ H2O2= D+2H2O上式中,DH2为供氧体,H2O2为受氢体。在ELISA中,DH2一般为无色化合物,经酶作用后成为有色的产物,以便作比色测定。
南京厚百。ELISA相关的,自己选:向左转|向右转
ELISA试剂盒都可以通过什么仪器使用?是所有的ELISA都可以通过酶标仪测试吗
ELISA试剂盒操作步骤:关于elisa试剂盒的具体操作步骤:
  1.取出试剂盒室温平衡30min,取出血样放至室温。
  2.配标准品:取150uL标准品加入150uL标准品稀释液稀释,依次稀释5次。
  3.加样:分别于各反应孔中加入标准品50uL,样品40UL,标准品做复孔,样品做3孔。
  4.分别于样品孔中加入10UL抗体。
  5.标准品和样品孔中分别加入50uL链酶亲和素-HRP,盖上封板膜,轻轻震荡混匀,37℃温育60min。
  6.配洗涤液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
  7.洗涤:小心揭开封板膜,弃去液体,甩干,每孔加200uL洗涤液,静置30s后弃去,如此重复5次,拍干。
  8.显色:每孔先加入显色剂A 50uL,再加显色剂B 50uL,轻轻震荡混匀,37℃避光显色6min。
  9. 终止:每孔加入终止液50uL,终止反应(此时蓝色立即转为黄色)。
  10.测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度。测定应在加终止液10min之内进行。
  11.保存结果,收拾桌面。
  12.分析处理数据
  注意事项
  1. 取出板条前恢复到室温后再打开外包装袋,实验中不用的板条立即放回包装中,密闭封口,其余不用试剂应盖好。
  2. 实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。
  3.实验板孔加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应孔的孵育时间一致。
  4.洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水。
  5.试剂盒内试剂请在保质期内使用,不同批号试剂不要混用。
  6.1000pg/ml以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。大于1000pg/ml 的样品应以标准稀释缓冲液稀释后重做。在结果分析时,结合考虑相应的稀释度。
一般试剂盒的客户主要是高校,科研院,医院等等,樊克生物elisa试剂盒供应商
ELISA试剂盒试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。我将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给同行带来一些启发,提高试验质量。ELISA试剂盒试验操作中可能影响结果的原因及解决办法分析:1选择试剂选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。2加样可能原因:1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时);3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。ELISA试剂盒解决办法:1)标本为血清:最好将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。2)加样后及时放入孵箱。3)加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。4)如果采用AT或其他全自动加样,最好选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。5)标本较多时,请分批操作。3孵育可能原因:1)孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗彻底;2)孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。