2XDirectBloodPCRMaterMixcontainsallthereagentsneededforquickamplificationofgenomicDNAfromwholebloodandotherbodyfluids.Thismastermixcanbealsoappliedtodirectamplificationofexogenousgenetarget,suchasvirus,bacteriaandparasitesfromblood.Themixisoptimizedwithouruniqueinhibitor-resistantDNApolymeraseforbestperformance.Inmostcase,youcandirectlyaddsampleintoPCRmastermixwithoutpre-lysis.
Thereisthe choiceofaninertgreendye inthemix,usedfordirectgelloADIng. ThePCRproductcanbedirectlyloadedonagarosegelwithoutadditionofloadingdyeforelectrophoresis.
GCversionworksforGC-richandcomplextarget.
Highlight
- Timesaving: NoneedforDNAextractionorpre-lysisofsampleasothersimilarcommercialkits
- Convenientandflexibility: Onlyneedaddingprimersandsamplein2Xmix.Thesimilarkitinwhichtheenzymeispackedseparatelyisavailableaswell (Clickhere),soyoucantitrateenzymetofindthebestconcentrationforthetarget
- Highinhibitor-resistance: CanamplifytargetinPCRcontaininghighconcentrationofPCRinhibitors
- Specificity: GCversionworksfor>65%GCcontentandcomplextarget,increasesspecificity
- Simplyanalysis: DirectlyloadingproductsforelectrophoresisafterPCR
Applications
- Genotyping
- Mutationdetection
- Transgenedetection
- Knockoutanalysis
- Sequencing
- Pathogendetection
- Forensicidentification
DataSheet:2XDirectBloodPCRMasterMix
VitaNaviTechnolog是华盛顿大学BarnesWayne教授创办的一家专门从事Taq酶及其相关产品研发与销售的生物公司。BarnesWayne教授是国际上著名的Taq酶专家，也是长片段基因PCR扩增技术的发明人和专利所有人（1993，PNAS；U.S.Patent5,436,149）。20多年来，BarnesWayne教授始终致力于PCR聚合酶，研发了系列TaqDNA聚合酶产品，远销全球40多个国家，是目前国际上生产PCR聚合酶的主要供应商之一。美国VitaNaviTechnology公司研发的新型高耐受性DNA聚合酶为基因检测技术带来了根本性的革新，彻底解决了依赖于纯化的核酸DNA为模板进行PCR扩增这一瓶颈问题。 产品简介 Omni酶是从文库中筛选出来的具有极高耐受性的Taq或者Klentaq突变体，可以直接以全血、血清、土壤、牛奶、巧克力或奶酪等材料为模板一步扩增目的基因，避免了繁琐的核酸DNA提取过程 产品特征：1.对全血、血清、血浆、土壤、植物、巧克力、奶酪和牛奶中的抑制因子具极高的耐受性，可直接对样品进行PCR检测，无需DNA分离。2.可以耐受高达40%的全血，20%的血浆或血清。3.可以从人血液中一步扩增疟疾基因。4.Omni酶节省时间、降低成本.5.直接从微量样品中的扩增，避免样品提取而丢失或污染DNA。
一、Klentaq1/KlentaqLA?实例1：用KelntaqLA扩增大于20kb的大片段基因。??二、高耐受性(Inhibitor-Resistant)聚合酶：OmniTaq/OmniKlentaq产品特征：1.对全血、血清、血浆、土壤、植物、巧克力、奶酪和牛奶中的抑制因子具极高的耐受性，可直接对样品进行PCR检测，无需进行DNA分离纯化。2.可以耐受高达40%的全血，20%的血浆或血清，已应用于多种遗传病的分子诊断和临床检验。3.可用于法医、环境监测、农业、动植物检疫和临床诊断等领域。4.可以从人血液中一步扩增疟疾基因。5.与PCR增强剂结合使用时，其耐受性将进一步提高。6.使用Omni酶不仅节省时间、降低成本，而且实现了从微量样品中的扩增，避免因提取过程所致的DNA丢失或污染。实例2：用OmniTaq（OT）和OmniKlentaq（OKT）从肝素抗凝血液中一步扩增乙肝病毒基因。?实例3：用新突变的Omni酶从富含腐殖酸的人基因组中扩增1.1kb的CCR5基因。?实例4：用新突变的Omni酶从巧克力和黑胡椒中直接扩增基因。?三、热启动聚合酶(Hot-start)聚合酶：CesiumTaq/CesiumKlentaq产品特征：1.CesiumTaq和CesiumKlentaq是一种冷敏感的突变体，在室温条件下聚合酶的活性很低，当升高温度进入PCR循环时聚合酶的活性就全部释放出来，因而具有内置式热启动功能。2.与现有化学修饰或抗体封阻的热启动聚合酶相比，CesiumTaq和CesiumKlentaq的聚合酶活性更高，扩增效果更好。3.CesiumKlentaq具有热启动和高耐受性双重效果。实例5：用CesiumKlentaq扩增基因热启动效果比较?四、PCR增强剂（PCRenhancingcocktails,PEC）产品特征：1.联合使用PEC-1或PEC-2与高耐受性Taq酶（OmniTaqandOmniKlentaq）可以更好的克服样品中各种物质对PCR反应的抑制作用，进一步提高PCR扩增效率，简化PCR操作流程提高。2.PEC有助于从基因组中扩增GC含量高达80%的基因。3.PEC也可用于qPCR（SYBR和Taqmanprobe）。4.新研发的PCR增强剂PEC-3andPEC-4有助于从食品中扩增基因。?实例6：联合使用OmniTaqorOmniKlentaq及PCR增强剂（PEC）从不同类型的牛奶中检测沙门氏杆菌Inv基因。??实例7：联合使用OmniTaqorOmniKlentaq及PCR增强剂（PEC）从人的基因组DNA或全血中直接扩增3个高GC含量的基因。?五、各种特异性一步PCR试剂盒VitaNaviTech公司开发了系列一步法PCR和qPCR试剂盒，可以直接从样品中扩增目的基因。1.DirectBloodPCRKit：从血液中直接扩增目的基因实例8：使用DirectBloodPCRKit从全血中一步扩增CCR5基因
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技术文章AMV和M-MuLV在应用上的区别更多逆转录酶文章请点击：http://www.e1617.com/nizhuanlumei-2191/...
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上海超研生物科技有限公司在发布的一步逆转录PCR试剂盒供应信息，浏览与一步逆转录PCR试剂盒相关的产品或在搜索更多与一步逆转录PCR试剂盒相关的内容。
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目前市面上众多的逆转录酶可以根据其来源、规格和包装进行属性分类。
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RT 007AMV逆转录酶是由杭州博日科技有限公司代理或销售的BioFlux品牌的试剂，产品来源于杭州。杭州博日科技有限公司是中国最权威的RT 007AMV逆转录酶试剂销售服务商之一，在杭州等地方销售RT 007AMV逆转录酶试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业RT 007AMV逆转录酶仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的RT 007AMV逆转录酶产品
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美国GeneCopoeia在发布的miRNA 逆转录试剂盒供应信息，浏览与miRNA 逆转录试剂盒相关的产品或在搜索更多与miRNA 逆转录试剂盒相关的内容。
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柏业贸易（上海）有限公司在发布的CycleScript 逆转录酶供应信息，浏览与CycleScript 逆转录酶相关的产品或在搜索更多与CycleScript 逆转录酶相关的内容。
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M-MLV逆转录酶是由北京鸿跃科技有限公司代理或销售的omega品牌的试剂，产品来源于美国。北京鸿跃科技有限公司是中国最权威的M-MLV逆转录酶试剂销售服务商之一，在北京等地方销售M-MLV逆转录酶试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业M-MLV逆转录酶仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的M-MLV逆转录酶产品
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AMV逆转录酶从鸟类成髓细胞白血病病毒（amv）中分离出来的，它拥有双重活性：1.5 > 3依赖引物的聚合酶活性，可以以RNA或DNA作为模板；2.具有3 > 5Rase H 活性，可以降解RNA/DNA杂合体中的RNA，它需要Mg2+或Mn2+激活。它可用于双脱氧法测定DNA或RNA的序列和以短的RNA为模板合成cDNA。AMV 逆转录酶在37℃-55℃的温度范围内有活性，最适温度为41℃-45℃，在以Tobacco Ve...
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Pcr实验室又叫基因扩增实验室。PCR是聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)的简称。是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段，可看作生物体外的特殊DNA复制。通过DNA基因追踪系统，能迅速掌握患者体内的病毒含量，其精确度高达纳米级别。...
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逆转录酶是由陕西脉元生物科技有限公司代理或销售的MYbiotetch品牌的试剂，产品来源于国产。陕西脉元生物科技有限公司是中国最权威的逆转录酶试剂销售服务商之一，在西安等地方销售逆转录酶试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业逆转录酶仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的逆转录酶产品
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TAKARA的RR047A逆转录试剂盒，做逆转录程序设置错误本来应该37℃15min85℃5s，变成37℃15s，85℃
5s，请问再重新设置程序可以吗，85℃酶会全部失活吗？
trizol法提取大小RNA，trizol买invitrogen公司的。 逆转录用promega公司的M-MLV
本数据来源于百度地图，最终结果以百度地图最新数据为准。如果你想做荧光定量PCR的根据实验思路来说应该需要、1.模板提取（一般为RNA）：Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水
2.模板浓度测定：分光光度计或NanoDrop
3.逆转录：逆转录试剂盒（或者一步法试剂盒），这一步可以用普通PCR做，也可以用水域做。
4.荧光定量PCR试剂：通常有用SYBRGreenMix做的，但是这里建议你用EvaGreen做，灵敏度和平行性都要好于SYBRGreen，并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBRGreen还需要加一步Rox很麻烦。
5.其他：除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板（Axygen反应比较好）、移液枪等，暂时就想到这么多。
氯仿/，混匀,常温下13000g离心5分钟，混匀，然后顺序加入下列试剂(promega).离心完毕.离心完毕,剧烈振荡后,加入1ml 70%乙醇洗涤沉淀. 第二日,13000g离心60分钟以充分沉淀双链cDNA;ul) 2ul BSA(10mg/. 吸取上清至另一eppendof管,将昨日沉淀物在4℃;10体积3M的NaAc: 1：一链，第4步可以用PCR 纯化试剂盒代替，同保存的一链产物一起电泳鉴定。 6．将spin column放入一新的离心管中,取2ul一链产物－20℃冰箱中保存。 8．加入30ul buffer EB;异戊醇： 1．溶液PE使用前应加入适量体积95％－100％的乙醇. 在第二链反应体系中. 反应完成后;10V3M NaAc(PH5.5倍体积无水乙醇; 5，再离心1min是单链cDNA。 3．加入spin column中.2)和2，混匀，加入50ul buffer EB,得到200ul cDNA第二链反应体系。 2．向200ul二链补平产物中加入5倍体积的buffer PB. 第一链反应完成后; 3;ml) 2,将此体系置于冰上。 PCR纯化试剂盒操作流程; 5．取2ul二链产物,然后75℃灭活10分钟：第3; 4。同时上1kb ladder、cDNA第二链的合成. 加入等体积酚/。二，想合成双链cDNA需要另外操作.5V预冷的无水乙醇: 6ul 10mM dNTP 2ul T4 DNA Polymerase(8,加入等体积氯仿. 离心后。 9．13000rpm离心2min, 37℃反应至少30分钟,干燥沉淀至无乙醇气味,弃上清. 70℃灭活10分钟. 混匀后，待电泳检测，混匀,顺序加入下列试剂(promega)，且二链稍比一链大一些. 稍微离心混匀反应物，13000rpm离心1min，确定双链的大小范围：一,常温下13000g离心5分钟,-20℃放置过夜以沉淀双链cDNA.5小时，静置10min，－20℃沉淀过夜: 1;ul) 总体系为200ul;ul) 10ul DNA Polymerase I(10U/.75ml buffer PE。其余的产物合并,混匀，静置10min: 20ul 10×DNA Polymerase I buffer 6ul 10mM dNTP(自己配制) xul dd H2O 1ul RNase H(2U/,常温下13000g离心5分钟,吸取上清于另一1,加入1/. 注; 8; 2; 7,弃上清,16℃反应2。注; 3。 10．加入1/。 4．加入0，2、双链cDNA末端补平.7U/ 4。 5．13000rpm,上下颠倒几次混匀后。 7．13000rpm离心2min，二链的电泳图是smear.5ml eppendof管中; 6，13000rpm离心1min
是单链cDNA，想合成双链cDNA需要另外操作：一、cDNA第二链的合成:1. 第一链反应完成后,取2ul一链产物－20℃冰箱中保存，待电泳检测。其余的产物合并，混匀，然后顺序加入下列试剂(promega):20ul 10×DNA Polymerase I buffer6ul 10mM dNTP(自己配制)xul dd H2O1ul RNase H(2U/ul)10ul DNA Polymerase I(10U/ul)总体系为200ul;2. 混匀后,16℃反应2.5小时;3. 70℃灭活10分钟;4. 反应完成后,得到200ul cDNA第二链反应体系,将此体系置于冰上;5．取2ul二链产物，同保存的一链产物一起电泳鉴定。同时上1kb ladder，确定双链的大小范围。注：一链，二链的电泳图是smear，且二链稍比一链大一些。二、双链cDNA末端补平:1. 在第二链反应体系中,顺序加入下列试剂(promega):6ul 10mM dNTP2ul T4 DNA Polymerase(8.7U/ul) 2ul BSA(10mg/ml)2. 稍微离心混匀反应物, 37℃反应至少30分钟,然后75℃灭活10分钟;3. 加入等体积酚/氯仿/异戊醇,剧烈振荡后,常温下13000g离心5分钟;4. 离心后,吸取上清于另一1.5ml eppendof管中,加入等体积氯仿,上下颠倒几次混匀后,常温下13000g离心5分钟;5. 吸取上清至另一eppendof管,加入1/10V3M NaAc(PH5.2)和2.5V预冷的无水乙醇,混匀,-20℃放置过夜以沉淀双链cDNA;6. 第二日,将昨日沉淀物在4℃,13000g离心60分钟以充分沉淀双链cDNA;7.离心完毕,弃上清,加入1ml 70%乙醇洗涤沉淀,常温下13000g离心5分钟;8.离心完毕,弃上清,干燥沉淀至无乙醇气味.注：第3，第4步可以用PCR 纯化试剂盒代替。PCR纯化试剂盒操作流程：1．溶液PE使用前应加入适量体积95％－100％的乙醇，混匀。2．向200ul二链补平产物中加入5倍体积的buffer PB，混匀。3．加入spin column中，13000rpm离心1min。4．加入0.75ml buffer PE，13000rpm离心1min。5．13000rpm，再离心1min。6．将spin column放入一新的离心管中，加入50ul buffer EB，静置10min。7．13000rpm离心2min。8．加入30ul buffer EB，静置10min。9．13000rpm离心2min。10．加入1/10体积3M的NaAc，2.5倍体积无水乙醇，混匀，－20℃沉淀过夜。
之前一直用的Takara的试剂盒，现在突然换成Thermo的，实验的条件需要重新摸索～看了说明书还是有几点不明白的？请园子里的大神指导～想知道：1、需要特地去除基因组DNA么？试剂盒里并没有DNase和RNase。2、说明书上，上机反应的条件是42摄氏度60min；70摄氏度5min；一共需要1个多小时！？看他产品推广说只需要30min就可以了～所以大家上机条件是怎样的？求指导
miRNA荧光定量PCR检测试剂盒采用本试剂盒采用SYBR® Green I 嵌合荧光法的原理进行miRNA 荧光定量检测。本试剂盒包含miRNA 荧光定量检测的所有试剂，包括2×miRNA qPCR Mix和Reverse primer。2×miRNA qPCR Mix（含Sybr Green）是专门为miRNA 定量检测而研发的新一代预混形式的荧光定量PCR 检测试剂，其中的DNA polymerase 采用的是抗体修饰的热启动形式， 配合特殊的Buffer 体系，使反应特异性更好，灵敏度更高，并能在更广的范围内进行准确定量。杭州昊鑫生物的
逆转录
试剂盒中设定反转录反应程序中的反转录长度怎么确定？反转录长度指的是什么
我是RT-PCR新手，请问逆转录试剂盒里面有什么试剂组成的？在逆转录过程中要注意什么事项?谢谢！
有一款RevertAid™FirstStrand
CDNASynthesisKit
和RevertAid™HMinusFirstStrandcDNASynthesisKit，FirstStrandcDNASynthesisKit
大家又没有用过，这个公司的酶据说很好啊。
一、实验器具与材料：1、移液器：1ml、200μl、20μl、10μl、2μl2、吸头：1ml、200μl、20μl3、匀浆管：5ml4、吸头台：放置1ml吸头的一个，放置20μl吸头的一个5、EP管：1.5ml、0.2ml、100μl6、试剂瓶：2个60ml的棕色试剂瓶（广口，带盖）；1个125ml的白色试剂瓶（放无水乙醇）7、量筒：50ml、250ml、500ml8、容量瓶：250ml、500ml、1000ml9、试管架：5ml、1.5ml、20μl10、盐水瓶：250ml、500ml各2个备用，一个装无水乙醇，另一个装DEPC水11、铝制饭盒：4个12、塑料小饭盒：1个13、大瓷缸：2个14、锡泊纸：一卷15、卷纸：2卷16、三角烧瓶：带盖，稍大二、实验器具的处理与准备1、塑料制品：（包括枪头、EP管、匀浆管等）先将DEPC水从容量瓶中倒入瓷缸中，将塑料制品逐个浸泡其中，其中小枪头需要吸管打入DEPC水，过夜，然后高压，再烤干备用，实验前将枪头等放入吸头台，再高压一次（EP管）2、玻璃制品：泡酸过夜，冲洗干净，蒙锡纸烤干备用（DEPC水泡）（洗净后先泡1‰DEPC过夜，再烤干）3、匀浆器：（包括剪刀、镊子）先洗净后，再高压（不需要泡DEPC）三、试剂配制：1、DEPC水：吸出1ml放在1000ml双蒸水中配成1‰DEPC水，放在1000ml容量瓶中静置4小时备用。2、75%乙醇：用无水乙醇DEPC水配，然后放-20℃保存（其中DEPC水需先高压）3、异丙醇：放入棕色瓶中4、氯仿：放入棕色瓶中5、琼脂糖仅供参考
逆转录要-20°保存，荧光定量有的可以4°保存就可以不分装，如果要-20°保存的话就最好分装了，说明书上都写着呢，好好看看说明书！
