【求助】用来做荧光定量PCR的标本能放得时间长吗
2021-07-24
问题描述：
要做荧光定量PCR了，这四个月来收集了十多例标本，手术切除的组织立即放入液氮 然后-80°保存， 准备慢慢来提RNA如果这种情况存放 可以吗 ？还是有了组织 就赶紧提RNA
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xuguo520
用户
手术切除的组织离体15分钟内必须放入液氮内，如果能一直保存在液氮里效果最好，放在低温冰箱也还可以，效果相对稳定，我们两种方法都用过。
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dingxiangyuan987
用户xuguo520 手术切除的组织离体15分钟内必须放入液氮内，如果能一直保存在液氮里效果最好，放在低温冰箱也还可以，效果相对稳定，我们两种方法都用过。呵呵 谢谢了 那我就放心啦
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dingwencheng326
用户建议楼主取到标本立即就提取RNA，做到75%酒精洗涤那一步停，将RNA粗沉淀和酒精一起存放-20°，可以保存一年。待标本收齐，再一起做下一步，这样可能会好些。
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dingxiangyuan987
用户dingwencheng326 建议楼主取到标本立即就提取RNA，做到75%酒精洗涤那一步停，将RNA粗沉淀和酒精一起存放-20°，可以保存一年。待标本收齐，再一起做下一步，这样可能会好些。如果要这样做的话， 我那十几例标本还能用吗 效果是不是就不是很好啦。如果逆转录为cDNA效果是不是会更好哈
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sunkunfeng1981
用户两种方法都可以，个人认为新鲜样品马上检测最好。另外，对dingwencheng326的方法不敢苟同，既然提取了RNA，还是反转录后保存更好些吧！
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dingwencheng326
用户逆转录为cDNA后保存的时间并不能很长，而且cDNA本身也会讲解，加上每一种cDNA讲解的速度和程度不一样，时间长了，做后续的基因检测就很难定量了。RNA粗沉淀放在用DEPC处理水配的75%酒精里能很好的保存RNA。而且，由于取标本的时间不一样，待收齐后再将RNA溶解进行下一步处理，这样能很好的保证起始模板量，做定量分析可能更占优势。当然，个人意见，网上也有这个说法，实验中我也是这样做的，效果不错。
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shiwei0708
用户直接做效果好点 液氮冻一下再放冰箱保存也可以得到好的结果我们的冰箱温度是-80
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shiwei0708
用户直接做效果好点 液氮冻一下再放冰箱保存也可以得到好的结果我们的冰箱温度是-80
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liangkun8856tr
用户楼主还在关注吗？我最近要做荧光定量pcr，可是没有超低温冰箱，只能到负20°，这样怎么保存标本啊，能保存几个月，要用Rnalater吗？
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nl_spt
用户可以一起收集好再抽提RNA，组织样品长期保存必须在-80，如果匀浆好，加入裂解液后可短期在-20保存。我公司免费设计引物并提供样品抽提RNA的裂解液，各种核酸和蛋白水平的检测技术服务，订购技术服务的客户，我们会妥善保存样品，并提供售后实验指导计算分析，还有包括microRNA，总RNA在内的各种核酸抽提和逆转录试剂盒，各种基因和microRNA的QPCR检测试剂盒，详情可咨询QQ：1327983717 上海诺伦生物医药技术有限公司，老师，欢迎您垂询，谢谢。
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