细胞支原体污染PCR检测试剂盒
产地:美国SouthernBiotechAssociates,Inc.(SBA)
产品信息:
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货号
规格
支原体PCR检测试剂盒
MycoplasmaDetectionKit
13100-01
50T
产品特点:
用于特异性检测细胞培养液中支原体的污染用于扩增支原体基因组中16SrRNA编码区特殊的引物设计扩增用于覆盖支原体的三大类(Mycoplasma,AcholeplasmaandUreaplasma),因此可检测超过95%的潜在的细胞污染。检测方法简单,3小时内出结果。检测灵敏度高:可检测到100ul细胞上清液中2-5毫微微克的支原体DNA。特异性高,只扩增细胞培养液中支原体DNA,而真核细胞和细菌的DNA被扩增。试剂盒带有阳性对照用于验证PCR体系的稳定性。试剂盒内带有内参对照,用于排除PCR抑制剂引起的假阴性。试剂盒用于扩增的支原体种属及对应PCR产物对照片段
支原体种属
PCR产物片段(bp)
A.laidlawii
611
M.arginini
448
M.arthritidis
486
M.bovis
605
M.cloacale
459
M.falconis
458
M.faucium
479
M.fermentans
579
M.genitalium
464
M.hominis
448
M.hyorhinis
525
M.hyosynoviae
471
M.opalescents
573
M.orale
503
M.pirum
533
M.pneumonia
493
M.salivarium
482
M.synoviae
572
U.urealyticum
558
结果分析:
细胞如被支原体污染,可扩增到448-611bp一条或多个条带样本中包含内参的DNA将会扩增出270bp的PCR片段(见图,泳道7),该扩增表明实验系统可靠性。如在一些样品中扩增不到内参(270bp),这种情况下可设置阴性对照(样本为水),可扩增到270bp的条带。如果样品中含有PCR的抑制剂,可通过DNA提取去除。如果细胞发生严重的支原体污染,448-611bp扩增产物将聚集或270bp的内参将消除(见图,泳道6)低于100bp的低浓度片段,表明是二聚体或非特异性片段,而非阳性结果,这种情况不影响检测结果的精度。检测结果示例:
Lane1:大肠杆菌基因组扩增结果Lane2:杂交瘤细胞DNA扩增结果
Lane3:阴性对照(水)Lane4:阳性对照
Lane5:抑制剂样本Lane6:严重支原体污染的细胞
Lane7:轻度支原体污染的细胞Lane8:100bpDNAladder