ATXN3PolyclonalAntibody
CatalogNo.:AB0089-200
Price/Unit:EUR320.00
Source:Goat
Quantity/unitsize:600µg
Description:GoatpolyclonalantibodytoATXN3.Thisproteinappearstobeacomponentoftheubiquitinproteasomesystemandhasdeubiquitinaseactivity.Itmayalsohaverolesinneuroprotection,proteinhomeostasismaintenance,transcriptionalandCytoskeletonregulation,myogenesisanddegradationofmisfoldedchaperonesubstrates.TheproteincontainsQnrepeatsinthecodingregion,andtheexpansionoftheserepeatsfromthenormal13-36to68-79isonecauseofMachado-Josephdiseasealsoknownasspinocerebellarataxia-3,anautosomaldominantneurologicdisorder.Alternativenames:AT3,ATX3,ataxin-3,ataxin3varianth,autosomaldominantataxin3,ataxin3variantm,ataxin3variantref,JOS,josephin,Machado-Joseph,Machado-Josephdiseaseprotein1,MJD,MJD1,SCA3,spinocerebellarataxia3,olivopontocerebellarataxia3,spinocerebellarataxiatype3proteinantibody.
Form:Polyclonalantibodysuppliedasa200µl(3mg/ml)aliquotinPBS,20%glyceroland0.05%sodiumazide.Thisantibodyisepitope-affinitypurifiedfromgoatantiserum.
Immunogen:Purifiedrecombinantpeptidederivedfromwithinresidues120aato250aaofhumanATXN3producedinE.coli.
Specificity:DetectslevelsofATXN3proteinintransfectedcellswithGFP-ATXN3andendogenouslevelsinU118,SH-SY5Y,At-T20andhTERTcelllysatesbyWesternblot.
Reactivity:Reactsagainsthuman,rat,mouse,monkeyandcanineproteins.
Usage:Westernblot 1:250-1:2,000Immunofluorescence NDImmunohistochemistry(paraffin) NDImmunohistochemistry(frozen) ND
Reactivitychart
Sample | WesternBlot | Immuno-fluorescence | Immuno-Histochemistry(p) | Immuno-Histochemistry(f) | human | +++ | ND | ND | ND | rat | +++ | ND | ND | ND | mouse | +++ | ND | ND | ND | canine | +++ | ND | ND | ND | monkey | +++ | ND | ND | ND |
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Storage:Storeat-20Cforlongtermstorage.Storeat2-8Cforuptoonemonth.
Specialinstructions:Avoidfreeze/thawcycles.
References
Forresearchuseonly,notfordiagnosticuse
ebiomall.com
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同型对照(阴性对照)管:A同型+B同型+C同型
单阳性对照
A检测管:A+B同型+C同型
B检测管:B+A同型+C同型
C检测管:C+A同型+B同型
不存在荧光重叠的两个抗体不需要调节补偿。
样本为PBMC,想用三色标记Treg细胞,分别为CD4-PECY,CD25-Fitc,Foxp3-PE,想知道如何设置荧光补偿,用的是BD的流式仪,1、是设置阴性管一个,单阳性管每种一个,样品管一个么?
荧光素强度依次为PE, PECY5 APC FITC, PE最强,FITC最弱。 所以,建议抗体组合为:
Foxp3-PE,CD4-FITC,CD25-PECy5.5或者CD25-APC。
同时购买三个相应的同型对照抗体。
样品管设置如下:
1. cell + FITC-isotype + Pecy5.5( or APC)-isotype + PE-isotype
2. Cell + FITC-isotype + CD25-mAb + PE-isotype
3. Cell + PE-mAb + FITC-isotype + Pecy5.5( or APC)-isotype
4. Cell + CD4-FITC + Foxp3-PE + CD25 -PECy5.5( or APC)。 [这一管的数据可以拿来分析用]。
在充分了解调整电压和补偿原理的基础上,也可以做一些简化。如果不太懂,就按照这个来。其中Foxp3的抗体和同型对照抗体都是在固定破膜以后再加,不是与CD4或者CD25同时加。
英 ['aɪsətaɪp]美 ['aɪsəˌtaɪp]
n. 同型动物(或植物),图形文字,象征性图像;同位型;同模;同号模式
选用和特异性抗体同种亚型的,同样荧光素标记的抗体,采用同样的染色步骤染同样浓度的细胞。然后上机检测。如果细胞有非特异性的结合,那同型对照的荧光强度可能会比未染色的阴性对照要高一些。
同型对照只用于那种阳性和阴性之间没有明确分解的情况。如果阳性细胞群非常清楚,是不需要同型对照的。另外,在多色同染的情况下,也不采用同型对照,而是采用FMO(fluorensence minus one)对照。
另外,对于同型对照的使用,也有很多反对意见。就算是同型抗体,也可能会有不同的亲和力,并不一定就能真实反应非特异性的结合。
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