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Fina Bio/Amino Dextrans/100 mg/AD2000x100
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Fina Bio/Amino Dextrans/100 mg/AD2000x100
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finabio
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AD2000x100
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Amino-Dextran (AmDex, AECM-dextran) consists of dextran functionalized with primary amines. (See “Diagram” Tab for the structure of FinaBio amino dextran.) Our AmDex is prepared from dextran using a protocol yielding a stable, amino functionalized dextran that is superior to the more commonly used reductive amination methods. The molecular weight profile of Fina Biosolutions’ AmDex is essentially unchanged from the starting dextran, as determined by analytical size exclusion chromatography. The product is desalted and lyophilized. We do extensive processing and testing to ensure that free amino reagent is removed, resulting in a consistent product with minimal lot-to-lot variation.

We have found that many commercial lots of amino-dextran contain variable amounts of dextran and that the amine content is often incorrect. Furthermore, the actual polymer molecular weight distributions of these preparations can vary extensively from the indicated molecular weight. These issues can mean that optimization data is based on incorrect information. Lot-to-lot variations means that protocols may need to be revised when a new lot of AmDex is used.

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Molecular WeightCatalog #(polymer MW) x (amines/polymer)SizePriceSizePrice
06 kDa Amino DextranAD6x05100 mg$150500 mg$500
10 kDa Amino DextranAD10x05100 mg$125500 mg$375
AD10x10
20 kDa Amino DextranAD20x5100 mg$125500 mg$375
AD20x10
AD20x20
40 kDa Amino DextranAD40x10100 mg$125500 mg$375
AD40x20
AD40x50
70 kDa Amino DextranAD70x10100 mg$125500 mg$375
AD70x25
AD70x50
110 kDa Amino DextranAD110x10100 mg$125500 mg$375
AD110x25
AD110x50
AD110x100
150 kDa Amino DextranAD150x25100 mg$125500 mg$375
AD150x50
AD150x100
250 kDa Amino DextranAD250x10100 mg$125500 mg$375
AD250x25
AD250x50
AD250x100
AD250x150
500 kDa Amino DextranAD500x25100 mg$125500 mg$375
AD500x50
AD500x100
AD500x250
AD500x400
2000 kDa Amino DextranAD2000x100100 mg$125500 mg$375
AD2000x250
AD2000x500
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AD2000x1000
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★服务描述 shRNA稳转株是指能持续稳定表达干扰特定基因shRNA的细胞。RNA干扰是基因功能研究中最常用的手段之一。我公司利用慢病毒将shRNA序列整合入细胞基因组,并通过慢病毒载体携带的抗性基因(通常为新霉素,嘌呤霉素,潮霉素)筛选出稳定转染shRNA的细胞,使其成为shRNA稳定转染细胞系。★服务内容 1:shRNA干扰靶点序列的设计; 2:shRNA 慢病毒质粒的构建; 3:shRNA慢病毒包装与病毒滴度测定; 4... 查看更多>
★服务描述 以载体为基础的shRNA干扰,由于其易于转入细胞以及能够实现持续表达的特性,越来越受到RNA干扰研究者的青睐。RNA干扰的成功很大程度上取决于构建的shRNA质粒是否有效。因此,干扰靶点的选择和shRNA表达质粒的构建是RNA干扰实验最重要的一个环节。汉尹生物用丰富的经验为您提供优质的shRNA质粒构建服务。★服务内容 1:shRNA干扰靶点的设计; 2:shRNA质粒的构建;★服务说明 1:我们的RNA干扰服... 查看更多>
《高新技术科普丛书:RNA干扰技术》系统阐述RNA干扰技术原理及在各领域的应用,内容包括RNA干扰技术的发现史、基本原理、基本技术,RNA干扰技术用于基因与基因组功能研究、用于药物靶点的确认、用于治疗药物的研发,以及各类天然的siRNA与miRNA简介。... 查看更多>
LGALS8Pre-designChimeraRNAi是由亚诺法生技股份有限公司(Abnova)代理或销售的Abnova品牌的试剂,产品来源于台湾。亚诺法生技股份有限公司(Abnova)是中国最权威的LGALS8Pre-designChimeraRNAi试剂销售服务商之一,在台湾等地方销售LGALS8Pre-designChimeraRNAi试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业LGALS8Pre-designChimeraRNAi仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的LGAL 查看更多>
RNA干扰(RNA interference, RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。基因沉默,主要有转录前水平的基因沉默(TGS)和转录后水平的基因沉默(PTGS)两类:TGS是指由于DNA修饰或染色体异染色质化等原因使基因不能正常转录;PTGS是启动了细胞质内... 查看更多>
上海吉凯基因化学技术有限公司在发布的RNAi整体服务套餐供应信息,浏览与RNAi整体服务套餐相关的产品或在搜索更多与RNAi整体服务套餐相关的内容。 查看更多>
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137780300.3 mLthermoThermo Fisher ScientificGibco/Lipofectamine RNAiMAX Transfection Reagent/0.3 mL/13778030 查看更多>
2017-06-27
亚诺法生技股份有限公司(Abnova)在发布的CANX Pre-design Chimera RNAi供应信息,浏览与CANX Pre-design Chimera RNAi相关的产品或在搜索更多与CANX Pre-design Chimera RNAi相关的内容。 查看更多>
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求大神解惑,RNA干扰回复实验是怎么做的?我的实验需要设计一个RNArescue组,不知道怎么操作。
您好!(RNA干扰的原理附图有六张,但是这里只能粘贴插入一张图片,你把邮箱给我,我发给你全的原理图)短片断的双链RNA可以通过促使特定基因的mRNA降解来高效、特异的阻断体内特定基因表达,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型,称为RNA干扰(RNAinterference,RNAi)。siRNA(smallinterferingRNAs)就是这种短片断双链RNA分子,能够以序列同源互补的mRNA为靶目标,降解特定的mRNA。首先外源导入的dsRNA被切割为19~23nt的小分子干扰RNA(siRNA)。Dicer作为特异性RNA酶家族的一个成员,切割dsRNA为19~23ntsiRNA,这是一个依赖ATP的耗能过程.切割后的siRNA具有3’两个核苷酸TT突出末端。然后siRNA结合到RNA酶复合物上形成RNA诱导的基因沉默复合体(RISC,RNA-inducedsilencingcomplex)。该复合体依赖ATP释能而解siRNA双链成单链以激活RISC。活化的RISC通过由siRNA决定的碱基互补配对原理切割具有同源序列的基因转录本,最终导致基因沉默效应。向左转|向右转

将EntransterTM-invivo与AmbioninvivosiRNA(作用于凝血因子VII)和阴性siRNA通过尾静脉注射成年小鼠,2天后,取动物肝脏检测。在mRNA水平和蛋白水平观察干扰效果。见上图,图中最左侧组为对照组注射阴性siRNA为3mg/kg,后边3组为每kg动物注射阳性siRNA量分别为1mg/kg,2mg/kg和3mg/kg情况。

根据推荐用量注射EntransterTM-invivo和siRNA(作用于LaminA/C)和阴性siRNA到成年小鼠。注射后2天收集相应的组织,分离RNA,用qRT-PCR分析LaminA/C基因的表达水平。图4为尾静脉结果,图5为各器官分别局部注射结果。

英格恩生物体内转染试剂,3天可完成动物体内转染实验,让动物干扰,基因敲除实验变得简单、快速有效!


找公司设计了重组慢病毒载体,共设计3条干扰序列,转染靶细胞测干扰效率。发现mRNA表达水平下降不明显,而蛋白水平明显下降。请问该如何解释,有相关文献吗?可以用抑制了靶蛋白翻译来解释吗?



近期,北京大学基础医学院鲁凤民教授课题组与许中伟、夏宁邵教授等合作,在《Theranostics》杂志上在线发表了题为“ThegRNA-miRNA-gRNAternarycassettecombiningCRISPR/Cas9withRNAiapproachstronglyinhibitshepatitisBvirusreplication”的研究论文。该研究通过模拟microRNA(miRNA)的生成过程,整合双gRNA导向的CRISPR/Cas9和RNA干扰技术,高效破坏乙型肝炎病毒(HBV)的复制模板-共价闭合环状DNA(ccCDNA),探索病毒清除新路径。北医王杰讲师、陈然和张瑞阳博士研究生为该论文的共同第一作者。

目前,我国仍有慢性HBV感染者约7800万人,慢乙肝患者约2800万人。HBV感染仍是我国病毒性肝炎、肝硬化及肝癌的重要致病因素。作为HBV复制模板的cccDNA,由于其半衰期相对较长,加上cccDNA池的不断补充,使得细胞核内的cccDNA持续存在、感染慢性化。目前,临床上治疗慢乙肝的常用药物为核苷(酸)类似物和长效干扰素,二者均不直接作用于cccDNA,难以有效清除病毒实现临床治愈。因此,研发直接靶向cccDNA的药物,寻找清除cccDNA的新方法和新策略,是当前慢乙肝治疗药物研发的热点。

该研究以miRNA-31为基本骨架,通过模拟其核心序列的二级结构设计HBV特异的miRNA(miR-HBV),miRNA两侧侧翼序列为特异性靶向cccDNA不同位点的引导RNA(gRNA)。如图所示,该gRNA-(miR-HBV)-gRNA三联体表达体系导入细胞后,在细胞核内转录形成gRNA-(miR-HBV)-gRNA长转录本,经内源的Drosha/DGCR8复合体剪切,形成2个gRNA和1个miR-HBV前体(pre-miR-HBV)。进入细胞质后,pre-miR-HBV进一步经Dicer酶剪切,形成成熟的miR-HBV。一方面双gRNA导向的CRISPR/Cas9系统通过切割并去除cccDNA的关键调控和编码序列直接破坏cccDNA,另一方面通过miR-HBV在转录后水平抑制HBV复制,进而抑制cccDNA池的补充,协同促进HBVcccDNA的清除。此外,本研究还发现,当pri-miRNA-31的侧翼序列长度为38bp时与双gRNA组成的三联体对HBV复制的抑制效率最高。

双gRNA导向的CRISPR/Cas9整合RNAi技术高效抑制HBV复制模式图

当然,该技术离临床应用尚有较远的距离。一方面如何高效和靶向性地将三联体递送到HBV感染的肝细胞内是需要攻克的一大障碍;另一方面,CRISPR/Cas9基因编辑技术的脱靶效应也有安全性之虞。然而,近年来随着Cas核酸酶的不断改造,其脱靶效应得到了有效控制,安全性大为提高。而且,随着金黄色葡萄球菌Cas9的发现,使得CRISPR/Cas9系统可以装入腺相关病毒载体中,致使该技术应用于临床的距离逐渐缩短。

总之,本研究通过gRNA-(miR-HBV)-gRNA三联表达框架联合CRISPR/Cas9和RNA干扰技术高效破坏cccDNA,促进HBV清除,为慢乙肝抗病毒治疗提供了新的思路。该项研究得到国家十二五重大科技专项计划“艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治”项目和国家自然科学基金的支持。

论文链接:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28839466


RNA干扰回复实验,主要是为了说明Off-target效应。 Off-target effects(脱靶效应)最早由Dharmacon科学家Jackson和他的同事们提出(Fedorov,Y.,et al. Off-targeting By siRNA Can Induce Toxic Phenotype. RNA Accepted (2006).)他们给细胞转染特定基因的单条siRNA后运用全基因组芯片检测技术鉴定表达上调/下调1.5到3倍的靶基因数量。研究人员发现在这种情况下有大量的基因被非特异性的调控着。siRNA正义链和反义链与脱靶基因的互补水平有高有低,并且每条siRNA所引发的脱靶基因表达谱也不尽相同,反映了序列依靠性的脱靶效应。
简单来说,Off-target效应就是指干扰shRNA序列进入了microRNA途径,通过microRNA途径,其可以不受完全互补的限制而调控大量靶基因的表达。原本需要19~23nt的RNA序列完全互补才能发生干扰作用,而如果进入microRNA途径,只需要11~15nt互补就可以产生干扰效果,这使得siRNA可能与非靶基因结合而导致非靶基因沉默,造成脱靶。 如果脱靶干扰的部分基因,正好与目的基因位于同一信号通路中,或者与目的基因的生物学功能相似,那么,如果因脱靶而干扰了其它基因,亦会造成和目的基因受到干扰后相同的细胞表型改变。而实际上,可能选择的这条shRNA序列并没有对目的基因造成有效干扰,或者虽然干扰了目的基因,但是并不会引起预期的细胞表型改变。
基于以上原因,自从Off-target效应被发现并被研究者们广泛认同后,越来越多的杂志要求研究者们在投稿时需要有相应的对照来说明Off-target效应。即您需要有相关对照或者实验来说明,您所获得的实验结果,不是由于Off-target效应而产生的。向左转|向右转
请说出其要点。谢谢。急着要啊!周四要考试了啊!呵呵!
RNA干扰技术的特点123
中国之星01912018-01-14
RNA干扰(RNA interferenceRNAi)通抑制转录水平基表达诱导功能缺失表型力工具由dsRNA(double-stranded RNA)引发特定基表达受抑制现象称RNA干扰作用

dsRNA(double-stranded RNA)介导基沉默作用dsRNA基点研究基沉默机制热点dsRNA指于30碱基RNA哺乳物细胞至少2条路径竞争双链RNA(dsRNA)其特异性路径:特殊dsRNA序列用于RNAi起始阶段dsRNA切siRNA(small interfering RNA 或short interfering RNAs)siRNARNA干扰作用赖发重要间效应能提供定信息允许特定mRNA降解siRNA义链与反义链各21碱基其19碱基配再每条链3’端都2配碱基
另条非特异性路径:要dsRNA存降解所RNA抑制所蛋白质合dsRNA激蛋白激酶PKR激PKR通系列磷酸化关闭翻译起始导致翻译抑制通激2’-5’AS 合激RNase L导致非特异RNA降解
关于特异性RNA作用机制模型包括起始阶段效应阶段起始阶段dsRNADicer酶(RNaseIII家族特异识别双链RNA员属内切核酸酶)作用加工裂解21-23核甘酸干扰RNA片断(siRNA)Dicer含解旋酶性及dsRNA结合域PAZ结构
RNAi 效应阶段siRNA双链结构解旋并形性蛋白/RNA复合物(RNA-induced silencing complex or RISC)siRNA 解双链即RISC激程需ATP由RISCsiRNA反义链与mRNA互补区域结合随切割mRNA达RNA水平干扰基表达RISC由种蛋白组包括核酸酶解旋酶同源RNA链搜索性等
如题...如果可以遗传,遗传下去的物质是什么?谢谢
RNA干扰不能称之为基因敲出,只出算是KNOCK-DOWN,使表达降低。基因敲出是KNOCKOUT,是把基因的一段序列在DNA层面上去掉。
欲研究某基因的功能,只知道现在很多干扰实验是在细胞水平体外进行实验的.不清楚目前能否应用RNA干扰在小鼠或其它动物上进行,这种设计是否可行.
  请有经验的战友指点,若可以最好能提供几篇应用动物进行RNA干扰研究的文章.
  非常感谢!
RNA干扰与基因敲除123
蜗牛小灵子2017-02-23

本是小菜鸟,目前研究某个比较新的蛋白对内质网应激的影响,需要抑制这个蛋白的表达看下游信号的表达情况,但是无论如何夜找不到抑制剂,做RNA干扰的话经费就超出预算了!急求各位大神,帮忙出个解决方案吧!非常感谢!