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基因表达调控(CRISPR,shRNA,siRNA)实验技术

  
  2024-04-28
  

CRISPR/Cas9,RNAi等基因改造技术是最新发展起来的一种强有力的用于基因组编辑的分子生物学工具,现已广泛应用于各类动植物个体或细胞基因组的遗传学改造。为让广大从事医学、生命科学事业的人员更多的了解基因编辑实验技术方法,更高质量地完成科研任务,蚂蚁淘竭诚为您服务!

基因表达调控相关技术:1. 基因过表达技术(Overexpression)2. CRISPR/Cas9靶向基因改造技术( Knockout,Konckin,Deletion)3. shRNA,siRNA基因调控技术(Knockdown)

实验操作: 1. 基因表达载体,shRNA、siRNA,CRISPR/Cas9构建2.DNA连接,转化

理论:WesternBlot检测基因表达(制备过表达,Knockdown,Knockout等) 1.细胞总蛋白提取,不同细胞组分提取(线粒体蛋白,细胞浆蛋白,细胞核蛋白,细胞膜蛋白)2. SDS-PAGE制备(单一浓度:10%分离胶,梯度胶制备:4%-18%分离胶) 3. WesternBlott技术 4. 抗体技术

实验操作:1. 细胞总蛋白提取 2. SDS-PAGE蛋白胶制备及蛋白质电泳3.转膜,及抗体孵育,检测

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