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各位，最近采用胶原酶法消化小鼠肝组织提取肝原代细胞，出现问题，请帮忙分析一下：
1.提取肝原代数量很少
2.细胞状态不好
我的操作
1.使用sigma 鼠尾胶原包被培养皿，无菌取组织后剪碎1mm3
2.IV型胶原酶（1mg/ml）按体重约33g小鼠的肝组织：5mg 酶（37度 20min，震荡）
3.DMEM/LOW GLOUSE +10%FBS 培养
4.24h后换液
请问有什么问题么？
1.提取肝原代数量很少
2.细胞状态不好
我的操作
1.使用sigma 鼠尾胶原包被培养皿，无菌取组织后剪碎1mm3
2.IV型胶原酶（1mg/ml）按体重约33g小鼠的肝组织：5mg 酶（37度 20min，震荡）
3.DMEM/LOW GLOUSE +10%FBS 培养
4.24h后换液
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