液氮罐儿内的液氮全部倒掉，用德国Minerva Biolabs的MycoplasmaTM支原体喷雾剂或MycoplasmaTM支原体祛除湿巾处理液氮罐内部，即可。反应几分钟后，重新可以使用。传统方法，可以用甲醛熏蒸，亦可解决。据报道，液氮罐用过一段时间后，不仅会有支原体污染，也会有细菌和真菌污染（检测方法是用拭子涂抹取样培养鉴定）。液氮罐常规保养，也是多一年就要消毒、清洗一次。因液氮用久了，杂质较多，液氮挥发后，有些会依附在内胆上，使内胆受到污染，以致腐蚀。因此，常规清洗消毒是必要的。有介绍先用中性洗涤剂清洗刷净，再用30度清水冲洗。充分干燥内胆后再可充装氮液，当然，也建议后用MB的mycoplasma offTM支原体祛除剂再清洗一下。另外要注意：要将冻存细胞放在液氮罐的气相，而非液相，这样有助于减少交叉污染。因为如果在液相，如果存在微生物污染，它可能随液氮流入冻存管内。 ......阅读全文 热休克蛋白HSP对细胞凋亡的调节作用 细胞凋亡是生物发育过程中或在正常生理状态下清除衰老及受损细胞的一种普遍现象。细胞凋亡的发生受胞外或胞内的多种刺激源所诱导，其中热休克蛋白（热激蛋白）是细胞凋亡的调控因子之一。细胞是通过调节自身的防御系统来适应环境胁迫，并且根据胁迫程度的强弱，利用自身遗传机制或调控自身状态抵抗胁迫，或 淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体技术 实验方法原理1975年，Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合，形成的杂交细胞既可产生抗体，又可无限增殖，从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破不仅为医学与生物学基础研究开创了新纪元，也为临床疾病的诊、防、治提供了新的工具。制备单 血液分析仪仪器原理和散点图特点 1、体积、电导和激光散射原理这是Beckman－Coulter 公司生产的血液分析仪所采用的经典分析方法，他集三种物理学检测技术于一体，在细胞处于自然原始的状态下对其进行多参数分析。该方法也称为体积、电导、激光散射血细胞分析法。此技术采用在标本中首先加入红细胞溶血剂溶解掉红细胞，然后加入稳定剂来中 淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体技术 实验方法原理 1975年，Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合，形成的杂交细胞既可产生抗体，又可无限增殖，从而创立了单克隆抗体杂交瘤 嵌合抗原受体T细胞介绍 过继性细胞免疫治疗是目前较为有效的恶性肿瘤的治疗方法之一。随着技术的日趋成熟, 已在多种实体瘤和血液肿瘤的临床治疗中取得较好疗效。 摘要: 过继性细胞免疫治疗(adoptive cellular immunotherapy, ACI)是目前较为有效的恶性肿瘤的治疗方法之一。随着技术的日趋成熟, 检测细胞凋亡的实验方法比较-4 六、Caspase-3活性的检测Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中caspase-3为关键的执行分子，它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原（32KD）的形式存在于胞浆中，在凋亡的早期阶段，它被激活，活化的Caspase-3由两个 流式细胞仪实验方法 一、实验准备1． 标本制备：2． zui小化非特异性结合：二、凋亡1．凋亡的检测方法：网站和其它2．PI染色法3．Annexin V 法4．TUNNEL法三、细胞因子1．激活的细胞因子2．CBA四、血小板 细胞培养液（二） 第四节 合成细胞培养基合成培养基是根据天然培养基的成分，用化学物质模拟合成、人工设计、配制的培养基。它有一定的配方，是一种理想的培养基。目前合成培养基多达10多余种，有的培养基仍在不断进行改良。早期组织培养是利用天然培养基，目前合成培养基已经成为一种标准化的商品，从zui初的基本培养基发展到无血清培 微核实验在染色体水平检测DNA损伤实验（一） 实验步骤一、材料1. 胞质分裂阻滞微核试验2. 微核的着丝点检测(1)从硬皮病 C R E S T 亚型的患者中取得的血清样本。(2) F I T C 标记的兔抗人 I g G 二抗。(3) 过氧化物酶标记的兔抗人 I g G 。(4) 二胺基联苯溶液（D A B ): I m g /m L 溶于 5637细胞| 5637细胞系 培养步骤 5637细胞| 5637细胞系 培养步骤 产品名称：5637细胞 中文名称：人膀胱癌细胞；5637 规格：T25 供应商：上海慧颖生物科技有限公司 复苏周期：10个工作日左右 培养步骤： 1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇 免疫学检验——免疫细胞的分离及其表面标志检测技术 第一节 免疫细胞的分离 一、外周血单个核细胞的分离 将2份6%聚蔗糖蒸馏水溶液与1份34%泛影葡胺生理盐水溶液混合，其比重为1.077±0.002，可作为常规的淋巴细胞分离液，即Ficoll分离液。 主要用于分离外周血中单个核细胞，是一种单次密度梯度离心分离法，其分布由上到下依次为：稀释 一、杆状病毒表达载体 最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒，其基因组含有一段外源核酸序列，通常为编码目标蛋白质的dDNA，在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成 从标准化、规模化、产业化谈细胞治疗 1、什么是细胞治疗？ 细胞治疗是指将正常或生物工程改造过的人体细胞移植或输入患者体内，新输入的细胞可以替代受损细胞、或者具有更强的免疫杀伤功能，从而达到治疗疾病的目的。细胞治疗在治疗癌症、血液病、心血管病、糖尿病、老年痴呆症等方面显示出越来越高的应用价值。一般来讲，细胞治疗包括肿瘤细胞免疫治疗 Hoxb5细胞的命运我做主将B细胞重编程为功能性T淋巴细胞 小编：天地悠悠过客匆匆潮起又潮落~~~ 小鼠甲：咳咳，咱们是个严肃的科普节目…… 小编：天地洪荒，宇宙万物，生命起源，又到了万物~~~ 小鼠乙：（咆哮体）现在是冬天！冬天！咱们几（今）天要讲的是细胞！细胞！ 小编：呃(⊙o⊙)… 好吧，咱们今天要讲的是细胞(*^▽^*)， Transwell侵袭实验 第一节 概念这里想明确两个概念，一个是Transwell，另一个是肿瘤细胞侵袭模型。1. Transwell关于Transwell这个词该如何解释，查了很多资料也未见准确的注解，我觉得可以这么理解吧，trans-这个词根有转移、转运、穿过等意思，well有小室的意思，可以从字面上理解，这是一类有通透 2018年糖尿病专题盘点 2018年即将过去，年末为大家献上生物谷本年度糖尿病专题盘点，希望读者朋友们能够喜欢。1. Nature：利用细胞替换疗法治疗1型糖尿病取得重大进展！胞外基质组分决定着胰腺祖细胞的命运DOI: 10.1038/s41586-018-0762-2 I型糖尿病是一种自身免疫性疾病，它会破坏胰腺中产 用体外或体内试验对机体的各种参与免疫应答的细胞进行鉴定、计数和功能测定，藉以了解机体的免疫状态，并对某些临床疾病的诊断，预后及疗效观察等也具有一定意义。 一、免疫细胞的分离 体外测定免疫细胞首先要从外周血或淋巴组织中分离所需的细胞。其主要方法是根据细胞的表面标记、理化 为何大部分实体瘤患者CAR-T临床试验只有一半？ CAR-T疗法在恶性血液肿瘤中展现出的强大实力，使其逐渐成为近年来最有前景的肿瘤免疫疗法，然而血液肿瘤（非实体瘤）仅仅是众多癌症中较小的一部分，如2019年最新的全球癌症数据指出：约90%的癌症发病率都是由实体瘤引起，但关于实体瘤的细胞治疗临床试验却很少。如下图所示：2019年发表在Na 论大部分实体瘤患者CAR-T临床试验为何只有一半 CAR-T疗法在恶性血液肿瘤中展现出的强大实力，使其逐渐成为近年来最有前景的肿瘤免疫疗法，然而血液肿瘤（非实体瘤）仅仅是众多癌症中较小的一部分，如2019年最新的全球癌症数据指出：约90%的癌症发病率都是由实体瘤引起，但关于实体瘤的细胞治疗临床试验却很少。 如下图所示：2019年发表在 免疫细胞的检测方法 用体外或体内试验对机体的各种参与免疫应答的细胞进行鉴定、计数和功能测定，藉以了解机体的免疫状态，并对某些临床疾病的诊断，预后及疗效观察等也具有一定意义。一、免疫细胞的分离体外测定免疫细胞首先要从外周血或淋巴组织中分离所需的细胞。其主要方法是根据细胞的表面标记、理化性状及功能等方面的差别进行设计。 白血病免疫学 白血病免疫学第一节 白血病细胞的抗原及相应抗体白血病细胞的免疫学检查主要是检测白血病细胞的免疫表型。即用特异的抗体检测白细胞的核、浆或膜上的抗原。是MIC分类中不可缺少的一部分。白血病细胞的抗原可以分为两类：一类是正常细胞系所具有的抗原，它在正常细胞分化发育 干货|了解这些，养好细胞不是事儿！！！ 抗体药物是目前生物技术药物研究中最为活跃的领域，特别是在肿瘤和自身免疫性疾病等方面的临床应用，更是大放异彩。随着临床需求的增加，单克隆抗体药物发展迅速，FDA已批准的抗体药物多达70多个，抗体药物销售量年增长率基本在10%以上，大大高于制药行业平均水平，其市场规模已经达到千亿美元。 我国针对单 小鼠精原细胞的分离和纯化 【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7～8d小鼠的生殖细胞悬液；用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%；平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞；精原细胞主要分布 小鼠精原细胞的分离和纯化 【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7～8d小鼠的生殖细胞悬液；用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%；平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞；精原细胞主要分布 小鼠精原细胞的分离和纯化 【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7～8d小鼠的生殖细胞悬液；用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%；平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞；精原细胞主要分布 发育生物学领域最新研究进展 本期为大家带来的是发育生物学领域的最新研究进展，希望读者朋友们能够喜欢。 1. Eur Respir J：新研究揭示肺脏发育高清图谱 DOI: 10.1183/13993003.00746-2019 过早出生的婴儿常常患有肺部发育不良，并可能面临危及生命的后果。为了给这些婴儿提供新颖的治疗 流式细胞仪技术概述 流式细胞仪技术，主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光，经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点，当每个细胞经过焦点时，发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置)，光检测器把散射光定量转化成电信号，经数字转换器进行数 流式细胞仪技术概述 流式细胞仪技术，主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光，经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点，当每个细胞经过焦点时，发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置)，光检测器把散射光定量转化成电 流式细胞仪技术概述 流式细胞仪技术，主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光，经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点，当每个细胞经过焦点时，发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置)，光检测器把散射光定量转化成电信号，经数字转换器进行数