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鸡肉中的多克隆抗体 - 除了煎蛋卷和三明治
家禽业的进步使鸡成为日常营养的极佳来源。然而，很少有科学家意识到鸡也是产生抗体的极佳宿主。如果鸡的免疫能力得到更多的宣传，那么将会有越来越多的研究人员选择鸡作为抗体生产宿主。这篇简短的评论将强调鸡源抗体相对于更传统的兔或山羊多克隆抗体的优势
免疫系统产生针对外来物质的抗体的能力是真核生物所独有的。大多数动物和人类每天都会遇到数百种以细菌、病毒、毒素、过敏原等形式存在的潜在有害物质。动物和人类通过合成和分泌称为免疫球蛋白或 IgG 的特殊蛋白质组来应对这种威胁。 IgG 在血液中循环并防止先前遇到的和有害的病原体或源自它们的分子。理论上，任何不是\"我”的东西，默认就是\"非我”，必须攻防。因此，高等脊椎动物会继续监测任何外来物质的存在，并通过快速释放中和 IgG 进行反应。根据定义，一个任何能够产生\"抗体或 IgG”的物质都是抗原。 \"免疫系统”是最复杂、最迷人的生物现象之一。显然，在认识\"自我”时的任何错误都可能导致\"自身免疫性疾病”——生物体开始攻击自身蛋白质和细胞的状态。自身免疫性关节炎或系统性红斑狼疮 (SLE) 是此类自身免疫性疾病的例子。许多疾病还可能损害个体对外来物质的反应能力并限制其产生抗体的能力。 HIV 感染或 AIDS 会抑制免疫系统，感染 AIDS 的人可能会因无法应对普通疾病（如普通感冒或肺炎）而死亡。
抗体或IgG 能够在成千上万种其他可能的抗原中识别并结合其特定抗原。抗体可以区分分子甚至单个氨基酸构象的细微变化。没有比\"抗原-抗体相互作用”更特异的生物相互作用了。因此，需要抗体来研究蛋白质在细胞中的位置并破译其作用模式。已经开发了许多利用特异性抗体的免疫学技术（ELISA，Western , 免疫组织化学等）。如果没有抗体的使用，生物科学迄今为止取得的进步是不可能的。
鸡作为抗体宿主和鸡 IgY如何产生抗体？制造抗体所需要做的就是挑战 h大多数带有抗原的动物，它会认为是外来的。反复接触抗原（免疫）会在宿主动物体内引发抗体。这些抗体可以通过免疫学方法如 ELISA 和 Western 印迹技术在血清中检测。显然，如果注射物质与宿主相同或相似，则其免疫原性差，导致抗体低或无抗体。许多高度保守的蛋白质，如胰岛素和细胞色素-C，在宿主（如兔子或山羊）中是弱抗原。在这些情况下，将宿主改为鸡可能会有所帮助，因为鸟类在进化上比哺乳动物更遥远。事实上，许多哺乳动物蛋白质在鸟类中不太保守，因此，鸡可能更适合作为抗体宿主。
IgY 的结构和用途IgG 是由哺乳动物产生的。低等脊椎动物（爬行动物、两栖动物和鸟类）产生与哺乳动物 IgG 相当的物质，称为 IgY。 IgY 仅表示该抗体来源于蛋黄。 IgY 具有与哺乳动物 IgG 相同的一般结构，具有 2 条称为\"nu”（~65-70 kDa）的重链和 2 条轻链（22-30 kDa）。 IgY，mol wt ~ 180 kDa，由于存在大量碳水化合物（约 3%），所以呈宽带运行。 nu 链有 4 个恒定域和 1 个可变域。但是IgY缺少\"Fc”结构域，不能固定补体，不能与protein-A或G结合。因此Protein A/G不能直接用于纯化IgY或用于免疫沉淀。因此，有必要修改 IP 测定并使用另一种哺乳动物衍生（兔/山羊等）抗 IgY，然后使用蛋白 A/G 进行 IP。尽管如此，使用适当的二抗（抗鸡 IgY-过氧化物酶或磷酸酶或 FITC 偶联物），鸡抗体可用于大多数免疫学检测。
因为鸡抗体不与哺乳动物 IgG 发生交叉反应，与 Fc 受体结合，与类风湿因子或与 HAMA（人抗鼠抗体）反应，在大多数免疫学测定中，鸡抗体的非特异性结合大大降低。此外，与大多数哺乳动物二抗-酶结合物不同，鸡抗体-酶结合物在大多数免疫分析中不需要吸附哺乳动物蛋白来降低背景。免疫从蛋黄中提取鸡抗体 (IgY)
使用与使用兔子或山羊时相同的一般方法对鸡进行免疫。在胸肌的多个部位进行注射。启动免疫反应至少需要 2 周或更长时间。抗体产生并释放到血清中。在随后的免疫过程中抗体滴度会增加。尽管可以收集鸡血清，但最好不要给鸡造成压力，因为蛋鸡也会将抗体集中在蛋黄中。蛋鸡几乎每天都产蛋收集鸡蛋是一种非常无创的收集抗体的方法。平均而言，单个鸡蛋可能含有相当于标准兔子的血液，收集鸡蛋大大增加了可以从一只鸡身上收集到的抗体的数量。通常兔子会被抽血每 2 周产生约 15-20 ml 血清，而鸡在同一 2 周内可产下 12-15 个蛋。因此，鸡的抗体产量可以是该血清的 15-20 倍ined 兔子。蛋黄中的抗体浓度高于鸡血清中的抗体浓度。这种高浓度的抗体可能被用来赋予新孵化的小鸡被动免疫力。据估计，单个鸡蛋可能含有约 100 毫克的总抗体，其中 1-10 毫克 (1-10%) 可能代表特异性抗体。
从蛋黄中纯化鸡 IgY 并储存抗体蛋黄含有大量脂质（脂蛋白和磷高蛋白颗粒与 livetins 和低密度脂蛋白混合）使得它们直接用于免疫测定存在问题。 IgY 可以通过逐步使用硫酸铵和聚乙二醇 (PEG) 沉淀法从蛋黄中分离出来。部分纯化的 IgY 在 4oC 下相当稳定多年，提供抑菌剂（叠氮化物或 Merthiolate) 已被添加以防止微生物生长。鸡的核心体温约为 41oC，鸡抗体的半衰期以月为单位。因此，鸡抗体在室温下几个月也相当稳定。但是，建议以适当的等分试样冷冻抗体并避免冻融。与将抗体置于 4oC 数周和数月相比，冷冻和解冻对抗体的危害更大。
ADI 可以从蛋黄中纯化 IgY 作为可以购买额外服务或试剂盒用于抗体的内部分离和纯化（鸡 IgY 纯化试剂盒 # 60100）。
How关于二抗（抗鸡 IgY 酶或 -FITC 偶联物）。
防鸡有没有真正的区别值得商榷区分鸡血清 IgG 或蛋黄 IgY（源自蛋黄的抗体）的抗体。最常用的抗鸡 IgG 抗体或酶偶联物可同时检测鸡血清 IgG 和蛋黄 IgY。最常用的抗鸡二抗可从 ADI 和其他公司获得制造商。
兔抗鸡 IgG/Y-HRP 偶联物，目录号 60320；兔抗鸡 IgG/Y-生物素偶联物，目录号 60321 兔抗鸡 IgG/Y-Alk。磷酸酶，Cat # 60322Rabbit Anti-Chicken IgG/Y-FITC conjugate, Cat # 60323检测鸡（血清或 IgY）抗体的 ELISA 试剂盒（试剂盒包含，涂层缓冲液、封闭缓冲液、洗涤缓冲液、抗鸡-HRP 偶联物、TMB 底物和终止液）。提供的试剂足以进行 1000-2000 次测试。目录号 80176.
进一步阅读.......Warr WG 等人 (1995) Immunology Today 16, 392。（评论）Larsson A 等人 (1993) Poultry Sci. 72, 1807（评论）PuffinbargerNK (1995) 摩尔。药效学。 47, 1126Akita EM 等人 (1993) J Immunol.方法 162、155.Danielpour, D (1993) J Immunol。方法 158, 17.Larson A 等人 (1993) Hybridoma 12, 143Lee SC 等人 (1997) Prep.生化。生物技术。 27, 227.Fortgens PH 等人 (1997) Immunopharmacol。 36, 305.Gassman M et al (1990) FASEB J 4, 2528
伙计们，吃鸡蛋时想想抗体。
鸡蛋可能值它的黄金重量，甚至超过很多倍...
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