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我们正在使用 PacBio 测序来分析末端连接底物上 DNA 连接酶的底物特异性。我们的单分子序列方法使我们能够研究 DNA 连接酶区分酶的错配（保真度）和序列偏好（偏差）的能力。我们正在扩展此分析以分析各种 DNA 连接酶和末端类型，并加深对连接动力学和热力学的理解。

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产品描述

1）DH5αTM 衍生物

2）无动物来源产品

3）抗T1噬菌体感染 ( fhuA2 )

4）该产品还同时提供电转级感受态细胞

概述：NEB 5-alpha E.coli 感受态细胞，广泛应用于多种高效级转化。

基因型：fhuA2Δ(argF-lacZ)U169  phoA  glnV44  Ø80Δ(lacZ)M15 gyrA96 recA1 endA1 thi-1 hsdR17

特性：

1）针对来源于PCR、cDNA及其他来源（hsdR）的未甲基化DNA进行转化

2）可用于蓝/白斑筛选

3）缺失非特异性核酸内切酶I（endA1）活性，可用于制备高质量质粒

4）可减少克隆DNA的重组反应 （recA1）

转化效率：

高效级： 1–3 x 109 cfu/μg pUC19 DNA

亚克隆效级：> 1 x 106 cfu/μg pUC19 DNA

电转级： 1–3x 1010 cfu/μg pUC19 DNA

未被转化的细胞需要检测抗 φ 80 噬菌体感染的能力，这是检测抗T1噬菌体感染能力的标准检测法。此外，未转化细胞还要检测其抗链霉素抗性以及对氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素和四环素的敏感性。使用pUC19 质粒通过对β−半乳糖基因的 α-互补分析显示：这些细胞也适宜进行蓝/白斑筛选。

随产品提供：

25 ml  SOC Outgrowth 培养基（室温贮存）

0.025 ml  50 pg/μl pUC19 对照 DNA （–20°C贮存）

注意事项：感受态细胞应贮存于–80°C，一旦融化，就不能再被冻存。–20°C贮存会显著降低其转化效率。只要温度高于–80°C，即使未被融化，细胞转化效率也会降低为零。