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品牌介绍
Polysciences
Polysciences公司是一家成立于1961年,致力于特殊技精细化学试剂、实验室产品,单/多聚体等产品的研发供应,所提供的产品服务于组织学(显微技术)、生物技术、电子技术、护理及制药工程等多个领域。Polysciences公司成立之初的主要产品为电镜样品制备的相关产品,目前该产品线延伸为多种组织学研究产品,包括多种方式与用途的样品包埋、优秀的染料及诊断试剂盒。同时,
Polyscience 23966-1 线性聚乙烯亚胺(MW 25000)
  • Polyscience 23966-1 线性聚乙烯亚胺(MW 25000)
货号 23966-1
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产品名称:polyscience23966-1线性聚乙烯亚胺(MW25,000)
产品英文名称:Polyethylenimine,Linear(PEI)
CAS号:9002-98-6,26913-06-4
产品包装:1g
产品价格:
有效期:一年


品牌:Polyscience
产地:USA
保存条件:
纯度规格:1g
产品类别:转染试剂


PEI转染手册

转染操作流程:
 
  1、细胞传代:

转染前24h内分离293T细胞至含10%胎牛血清的DMEM培养基中进行传代培养,接种密度如下:
        6孔板:0.5x106细胞
        10cm培养皿:4.0x106细胞
        15cm培养皿:9.0x106细胞

2、转染

转染前将所有试剂置于室温。

2.1质粒DNA的稀释

在无菌试管中,用无血清的DMEMW/O酚红培养基(浓度为10%)稀释质粒DNA(ug)。病毒包装体(psPAX2):病毒包膜(pMD2G)和重组质粒DNA的稀释比例分别为4:2:1。
       

6孔板:200ul+3ug的DNA
        10cm培养皿:1ml+7-8ug的DNA
        15cm培养皿:2ml+11-12ug的DNA

  2.2转染复合体形成

将PEI(1ug/uL)加入已稀释的总DNA中,PEI与DNA(ug)的混合比率为3:1。加入后立即涡旋混合。
      

 6孔板:9ulPEI复合体(1ug/ul)=9ug
        10cm培养皿:21ulPEI复合体(1ug/ul)=21ug
        15cm培养皿:33ulPEI复合体(1ug/ul)=33ug
将添加到细胞的DNA/PEI的混合物在室温下孵育15分钟。


4、收获转染细胞

转染后48小时内收获转染细胞/或病毒上清。
 
试剂的配制:
PEI(1ug/ul)polysciences(CAT#23966-2配制成储液:)
1、将无内毒素的无菌水加热至80℃左右溶解PEI,冷却到室温。
2、调整pH值至7.0,用0.22um的滤器过滤消毒,分装后储存在-20℃。工作液可保持在4℃


polyscience,inc,成立于1961年,起家于化学但超越化学领域的美国制造商,总部位于宾夕法尼亚州沃灵顿,公司业务主要涵盖三大块:1.实验用产品:a)成千上万种具品牌特色的化合物和试剂,应用于实验室研究,组织学,电镜和解剖病理学以及其他诊断和生命科学研究;b)种类极其宽广的单体和聚合体,满足各方研究领域;c)有机/无机化合物,生物可降解材料,磁珠,荧光素,染料和特定抗体,以及常规蛋白包被颗粒(直径范围40nm~10mm)的全球首要制造工厂;d)顶端多聚化合物的供货中心,满足各种高性能工业领域需求,包括替代能源,汽车电子,国防&航空电子,便携式通信和计算机,医疗器械组装。2.定制合成;3.cgmp生产服务。

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  • 文爷说鑦鰌喞 2018-02-09
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    用于制备胶体金探针蛋白需要进行前处理才能与金颗粒更结合未经处理蛋白质般说均含较高浓度盐高浓度盐往往干扰蛋白与胶体金吸附结合或导致胶体金粒凝聚所首先要除蛋白质溶液盐冻干蛋白或高浓度蛋白溶液蛋白凝聚聚同与胶体金粒结合影响探针灵敏度散蛋白单体蛋白前处理重要项处理标记使其蛋白具适量蛋白量(30kD)形蛋白复合体往往稳定量蛋白与其蛋白(BSA牛血清蛋白等)结合能制备稳定性更佳探针量影响探针灵敏度已知蛋白结构与性前提除性影响结构部提高标记灵敏度
    二、免疫胶体金产品原理及应用
    胶体金探针用单克隆抗体标记应用免疫层析制快速诊断产品具较高特异性且相稳定性高检测般5-10min读结相比其(ELISA需1-2hPCR需要间更)缩短检测间检测(组织液、血清、尿液、粪便等)需做非简单处理或做前处理即进行检测结颜色变化读取需要特别仪器设备
    免疫胶体金快速检测试纸利用层析原理、双抗体夹或免疫竞争或间接应用检测物质特异性能与其发特异反应抗原或抗体并金颗粒显色剂达快速检测目
    使用快速检测产品卡加孔加入待测利用层析原理断向另端层析随着层析进行本待测固定于测试线(T线)并颜色变化显示并照线(即控制线C线)确保检测效性
    建议 这没有意义
    也可以自己查阅资料   收起
    cn#aGffupQGfV 1517931333
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    肾功:

    肾小球滤过功能包括肾小球率过滤(菊粉,内生肌酐清除率);血液中物质浓度的测定(血肌酐,血尿素,血尿酸,血胱抑素C,氨甲酰血红蛋白,中分子物质);肾血流量测定(以前用对氨基马尿酸清除率,现在常规用放射性核素肾图)其中内生肌酐清除率是早期肾小球损伤的指标,要早于血肌酐和尿素

    肾小管功能包括浓缩稀释功能(莫氏实验),尿渗量测定,渗透溶质清除率测定,自由水清除率测定,这四个实验越晚后越精确

    在微量蛋白尿中,肾小球标志物(微量白蛋白和转铁蛋白),转铁蛋白比白蛋白更敏感,但是由于其在酸性尿中不稳定,所以临床上还是采用白蛋白作为糖尿病肾病早期指标的首选

    肾小管标志物为尿α1微球蛋白和β2微球蛋白,其中β2微球蛋白在酸性尿中易分解,所以肾小管指标中,尿α1微球蛋白是首选,但血β2微球蛋白升高还可见于恶性肿瘤及自身免疫性疾病


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    yuxiaochen 1487287790
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    海藻酸钠微球的制备方法
    微球的制备方法是给药途径选择和控制药物释放的关键。目前,海藻酸钠微球的制备方法主要有乳化离子交联法、微乳法、复凝聚法、锐孔凝固浴法、静电滴法,以及对上述方法的改良制法等。
    1.乳化离子交联法该法系指将药物与海藻酸钠溶液混合均匀后滴加至一定的油相中搅拌,制得W/O乳剂,然后加入离子交联剂交联固化,搅拌,分离得载药微球[4]。刘善奎等[5]利用此法制备了DNA疫苗海藻酸钠微球,李国明等[6]在交联固化后,继续与壳聚糖溶液反应制备了盐酸阿米替林海藻酸钠-壳聚糖微球。Ramesh等[7]改良此法,制备了利心平海藻酸钠-甲基纤维素(MC)共混微球,研究表明,随着微球中MC量的增加,微球的吸水性降低,MC的量与微球的释药速率有一定的关系,这类微球密度较低,可以在胃环境下保留12h以上,有效地提高了利心平的生物利用度。
    2.微乳法此法系将一定量的海藻酸钠、药物溶于蒸馏水中搅拌互混,在超声和高速搅拌的条件下将一定量混合液逐滴加入到油相中,形成微乳体系。再将CaCl2溶液逐滴加入到上述混合液中,继续搅拌,进行洗涤,冷冻干燥保存,即得海藻酸钠载药微球。该法多用于磁性微球的制备,以获得粒径小、均匀、靶向性强的载药磁微球。颜秋平等[8]应用该法制得具强磁响应性和缓释效果的阿霉素磁性纳米微球,研究发现此微球粒径小,分散性好,具磁靶向功能,有望成为一种优良靶向肿瘤的药物载体。苏科等[9]对此法进行了进一步改良,在已获得的阿霉素磁性微球基础上,又加入水溶性二亚胺和单抗人转蛋白进行旋转混合,分离、冷冻干燥后获得了人转铁蛋白修饰海藻酸钠载阿霉素药物纳米微球(TDA)。此外,Chuah等[10]在此基础上改进,应用甲基纤维素乳化法联合外部凝胶法制得了大小均一的海藻酸钠微球。
    3.复凝聚法由于海藻酸钠为阴离子聚合物,可与阳离子聚合物用复凝聚法制备复合微球。目前常用来与海藻酸盐复凝聚成球的主要有壳聚糖,此外还常与聚赖氨酸一起制备复合微球。这样得到的微球的膜壁强度较强,适合实际应用。此法系将海藻酸钠固体用蒸馏水溶解并分散均匀,加入表面活性剂,继续搅拌形成W/O型乳液。将壳聚糖以乙酸溶解,再加入CaCl2及药物于分液漏斗中,搅拌下逐滴加入到上述W/O型乳液中。加入戊二醛固化后,加正丁醇,充分振摇后放置,离心得沉淀物,即为壳聚糖-海藻酸钠载药微球。李柱来等[11]以壳聚糖-海藻酸钠为基质材料,在乳化体系中以复凝聚法制备头孢曲松微球,该微球具有良好的溶胀和缓释性能。王津等[12]应用复凝聚法制备了出球形度好,均匀圆整,粒径小,包封率较高,稳定性较好和具明显缓释作用的布洛芬壳聚糖-海藻酸钠缓释微球。
    4.锐孔凝固浴法该法系将药物加入到海藻酸钠溶液中,搅拌均匀,将混合物通过注射器或微孔硅胶管滴入到CaCl2溶液中,搅拌固化,分离微球移至壳聚糖溶液中,继续搅拌交联,分离微球并用蒸馏水洗涤干燥后得载药微球。高春凤等[13]应用此法制得雷公藤多苷提取物壳聚糖-海藻酸钠缓释微球,研究表明海藻酸钠浓度、壳聚糖浓度、CaCl2浓度以及海藻酸钠和药物质量之比对包埋率、载药量和体外释放均有影响,而交联固化时间对包埋率和载药量有影响,对体外释放影响不明显。黄岚等[14]将阳离子-β环糊精聚合物(CP-β-CD)与胰岛素形成复合物后,制备了含有此复合物的海藻酸钠/壳聚糖微球系统,并应用于胰岛素口服系统,结果表明CP-β-CD的加入,能有效的提高胰岛素的包封率以及在模拟肠液中的释放,是一种非常有前景的胰岛素口服制剂的助剂。
    5.静电滴法该法系将囊材与药液搅拌混合,搅拌条件下加进海藻酸钠溶液,在注射器推动力和电场力作用下,原料液滴入低温CaCl2溶液,
    迅速固化,形成海藻酸钙凝胶微球,浸泡,清洗,真空避光室温干燥。谷继伟等[15]用此法制得粒径小于1mm的奥沙普秦壳聚糖-海藻酸钠缓释微球。
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    争朝曦 1517717789
  • 睫毛膏和继父回家
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  • 追梦赤子心boy
    3、国家药典中规定的有机溶剂残留限度并没有说是针对口服剂型还是注射剂型,我这个是注射剂,拿这个(国家药典有机溶剂残留规定:二氯甲烷残留限度为0.06%;乙醇残留限度为0.5%;正庚烷残留限度0.5%)作为参考合不合理?   显示更多
    追梦赤子心boy
    3、国家药典中规定的有机溶剂残留限度并没有说是针对口服剂型还是注射剂型,我这个是注射剂,拿这个(国家药典有机溶剂残留规定:二氯甲烷残留限度为0.06%;乙醇残留限度为0.5%;正庚烷残留限度0.5%)作为参考合不合理?

    期待哪位大神能给小弟指点一下迷津。   收起
    PLGA微球工匠 1493599802
  • 微球用途广泛比方过去开发出玻璃微球用于涂料方面可以制作反光放映银幕,用在交通标志牌方面可以提高反光性能。
    把微球制作为海绵体可以用来吸收携带药物。
    用途不同就需要用不同材料制作。想细致了解可以选择专业书籍阅读。
    侯政 1517537111
  • 不是同一专业帮不到你,抱歉

    xz20170905 1512582244
  • 光年一夏 2017-02-17
    光年一夏

    结合物垫在层析时荧光微球在T线前面凝集的现象怎么解决呢,结合物垫增加了吐温和糖的含量还是有这种现象的


    有可能偶联的时候相互之间交联了
    简浩 1488236994
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