胶体金与标记蛋白简介
同原剂作用由氯金酸（HAuCL4）制备金颗粒直径0.8-500nm胶体金制备胶体金保存间较4℃保存6月或室温保存1-2月
胶体金做标记探针同用途选用胶体金直径范围同用于免疫快速检测胶体金颗粒直径范围般3-40nm间
胶体金粒表面层AuC12—粒表面带负电荷金颗粒表面包层物（蛋白）稳定保护金颗粒维持胶体稳定防止外电解质影响使粒相互凝聚
胶体金粒蛋白吸附作用取决于溶液pH值蛋白氨基酸净电荷取决于溶液pH值pH=pI蛋白溶液呈性pH=pI蛋白溶解度水化程度更容易吸附疏水金粒表面实际胶体金探针制备般胶体金调整pH=pI+0.5更利于结合更稳定
胶体金探针所用蛋白通三种机制于吸附于金颗粒表面：、金粒所带负电荷与蛋白部碱性氨基酸（赖氨酸精氨酸pH均于10）所带阳性电荷初相互吸引；二、蛋白通某些疏水性氨基酸残基（包括色氨酸）与金粒表面间疏水吸附作用；三、蛋白半胱氨酸或甲硫氨酸硫基与金粒间电共用共价键结合
用于制备胶体金探针蛋白需要进行前处理才能与金颗粒更结合未经处理蛋白质般说均含较高浓度盐高浓度盐往往干扰蛋白与胶体金吸附结合或导致胶体金粒凝聚所首先要除蛋白质溶液盐冻干蛋白或高浓度蛋白溶液蛋白凝聚聚同与胶体金粒结合影响探针灵敏度散蛋白单体蛋白前处理重要项处理标记使其蛋白具适量蛋白量（30kD）形蛋白复合体往往稳定量蛋白与其蛋白（BSA牛血清蛋白等）结合能制备稳定性更佳探针量影响探针灵敏度已知蛋白结构与性前提除性影响结构部提高标记灵敏度
二、免疫胶体金产品原理及应用
胶体金探针用单克隆抗体标记应用免疫层析制快速诊断产品具较高特异性且相稳定性高检测般5-10min读结相比其(ELISA需1-2hPCR需要间更)缩短检测间检测(组织液、血清、尿液、粪便等)需做非简单处理或做前处理即进行检测结颜色变化读取需要特别仪器设备
免疫胶体金快速检测试纸利用层析原理、双抗体夹或免疫竞争或间接应用检测物质特异性能与其发特异反应抗原或抗体并金颗粒显色剂达快速检测目
使用快速检测产品卡加孔加入待测利用层析原理断向另端层析随着层析进行本待测固定于测试线（T线）并颜色变化显示并照线（即控制线C线）确保检测效性
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肾功：

肾小球滤过功能包括肾小球率过滤（菊粉，内生肌酐清除率）；血液中物质浓度的测定（血肌酐，血尿素，血尿酸，血胱抑素C，氨甲酰血红蛋白，中分子物质）；肾血流量测定（以前用对氨基马尿酸清除率，现在常规用放射性核素肾图）其中内生肌酐清除率是早期肾小球损伤的指标，要早于血肌酐和尿素

肾小管功能包括浓缩稀释功能（莫氏实验），尿渗量测定，渗透溶质清除率测定，自由水清除率测定，这四个实验越晚后越精确

在微量蛋白尿中，肾小球标志物（微量白蛋白和转铁蛋白），转铁蛋白比白蛋白更敏感，但是由于其在酸性尿中不稳定，所以临床上还是采用白蛋白作为糖尿病肾病早期指标的首选

肾小管标志物为尿α1微球蛋白和β2微球蛋白，其中β2微球蛋白在酸性尿中易分解，所以肾小管指标中，尿α1微球蛋白是首选，但血β2微球蛋白升高还可见于恶性肿瘤及自身免疫性疾病

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【聚苯乙烯微球的粒径的级别】聚苯乙烯微球就是聚苯乙烯小颗粒，尺寸是微米级的，再小就是纳米球了，微球可以是纯球，也可以不是规则的球，椭圆的也可以。聚苯乙烯微球就是利用搅拌乳化，电喷雾，共轴液流（气流），膜乳化等方法将聚苯乙烯制备成微米尺寸的颗粒。【聚苯乙烯】是指由苯乙烯单体经自由基加聚反应合成的聚合物，它是一种无色透明的热塑性塑料，具有高于100℃的玻璃转化温度，因此经常被用来制作各种需要承受开水的温度的一次性容器，以及一次性泡沫饭盒等。   收起

海藻酸钠微球的制备方法
微球的制备方法是给药途径选择和控制药物释放的关键。目前，海藻酸钠微球的制备方法主要有乳化离子交联法、微乳法、复凝聚法、锐孔凝固浴法、静电滴法，以及对上述方法的改良制法等。
1.乳化离子交联法该法系指将药物与海藻酸钠溶液混合均匀后滴加至一定的油相中搅拌，制得W/O乳剂，然后加入离子交联剂交联固化，搅拌，分离得载药微球[4]。刘善奎等[5]利用此法制备了DNA疫苗海藻酸钠微球，李国明等[6]在交联固化后，继续与壳聚糖溶液反应制备了盐酸阿米替林海藻酸钠-壳聚糖微球。Ramesh等[7]改良此法，制备了利心平海藻酸钠-甲基纤维素（MC）共混微球，研究表明，随着微球中MC量的增加，微球的吸水性降低，MC的量与微球的释药速率有一定的关系，这类微球密度较低，可以在胃环境下保留12h以上，有效地提高了利心平的生物利用度。
2.微乳法此法系将一定量的海藻酸钠、药物溶于蒸馏水中搅拌互混，在超声和高速搅拌的条件下将一定量混合液逐滴加入到油相中，形成微乳体系。再将CaCl2溶液逐滴加入到上述混合液中，继续搅拌，进行洗涤，冷冻干燥保存，即得海藻酸钠载药微球。该法多用于磁性微球的制备，以获得粒径小、均匀、靶向性强的载药磁微球。颜秋平等[8]应用该法制得具强磁响应性和缓释效果的阿霉素磁性纳米微球，研究发现此微球粒径小，分散性好，具磁靶向功能，有望成为一种优良靶向肿瘤的药物载体。苏科等[9]对此法进行了进一步改良，在已获得的阿霉素磁性微球基础上，又加入水溶性二亚胺和单抗人转蛋白进行旋转混合，分离、冷冻干燥后获得了人转铁蛋白修饰海藻酸钠载阿霉素药物纳米微球（TDA）。此外，Chuah等[10]在此基础上改进，应用甲基纤维素乳化法联合外部凝胶法制得了大小均一的海藻酸钠微球。
3.复凝聚法由于海藻酸钠为阴离子聚合物，可与阳离子聚合物用复凝聚法制备复合微球。目前常用来与海藻酸盐复凝聚成球的主要有壳聚糖，此外还常与聚赖氨酸一起制备复合微球。这样得到的微球的膜壁强度较强，适合实际应用。此法系将海藻酸钠固体用蒸馏水溶解并分散均匀，加入表面活性剂，继续搅拌形成W/O型乳液。将壳聚糖以乙酸溶解，再加入CaCl2及药物于分液漏斗中，搅拌下逐滴加入到上述W/O型乳液中。加入戊二醛固化后，加正丁醇，充分振摇后放置，离心得沉淀物，即为壳聚糖-海藻酸钠载药微球。李柱来等[11]以壳聚糖-海藻酸钠为基质材料，在乳化体系中以复凝聚法制备头孢曲松微球，该微球具有良好的溶胀和缓释性能。王津等[12]应用复凝聚法制备了出球形度好，均匀圆整，粒径小，包封率较高，稳定性较好和具明显缓释作用的布洛芬壳聚糖-海藻酸钠缓释微球。
4.锐孔凝固浴法该法系将药物加入到海藻酸钠溶液中，搅拌均匀，将混合物通过注射器或微孔硅胶管滴入到CaCl2溶液中，搅拌固化，分离微球移至壳聚糖溶液中，继续搅拌交联，分离微球并用蒸馏水洗涤干燥后得载药微球。高春凤等[13]应用此法制得雷公藤多苷提取物壳聚糖-海藻酸钠缓释微球，研究表明海藻酸钠浓度、壳聚糖浓度、CaCl2浓度以及海藻酸钠和药物质量之比对包埋率、载药量和体外释放均有影响，而交联固化时间对包埋率和载药量有影响，对体外释放影响不明显。黄岚等[14]将阳离子-β环糊精聚合物（CP-β-CD）与胰岛素形成复合物后，制备了含有此复合物的海藻酸钠/壳聚糖微球系统，并应用于胰岛素口服系统，结果表明CP-β-CD的加入，能有效的提高胰岛素的包封率以及在模拟肠液中的释放，是一种非常有前景的胰岛素口服制剂的助剂。
5.静电滴法该法系将囊材与药液搅拌混合，搅拌条件下加进海藻酸钠溶液，在注射器推动力和电场力作用下，原料液滴入低温CaCl2溶液，
迅速固化，形成海藻酸钙凝胶微球，浸泡，清洗，真空避光室温干燥。谷继伟等[15]用此法制得粒径小于1mm的奥沙普秦壳聚糖-海藻酸钠缓释微球。
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追梦赤子心boy
3、国家药典中规定的有机溶剂残留限度并没有说是针对口服剂型还是注射剂型，我这个是注射剂，拿这个（国家药典有机溶剂残留规定：二氯甲烷残留限度为0.06%；乙醇残留限度为0.5%；正庚烷残留限度0.5%）作为参考合不合理？

期待哪位大神能给小弟指点一下迷津。   收起