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用于识别 - ProImmune - 掌握免疫 _ MHC 五聚体、CD1d 四聚体、定制肽合成、免疫测定、T 细胞表位发现、HLA 组织分型、细胞分析、配体结合测定、免疫应答
案例研究:ProImmune REVEAL® 和 ProVE® 用于识别第一个 HTLV-2 MHC I 类表位

奥利维拉,阿拉巴马州。等人。 (2009)。人类 T 淋巴细胞病毒 2 型感染中出现高频率的功能正常的循环 Tax 特异性 CD8+ T 细胞。 J免疫学杂志。 183(5):2957-65。 [PubMed ID:19657093]

HTLV-2 是一种与 HTLV-1 密切相关的逆转录病毒,但人们对该感染的免疫学特征知之甚少。 Oliveira 等人使用 ProImmune 的 REVEAL® 和 ProVE® 快速表位发现系统绘制了针对 HTLV-2 Tax2 蛋白的反应图谱。

跨越整个 Tax2 蛋白的重叠 9 聚体肽是作为 Prospector PEPscreen® 定制合成的肽库。使用这些肽,针对 A*02:01、A*03:01 和 B*35:01 等位基因进行 MHC 肽结合测定,这些等位基因在研究的人群中普遍表达。合成了在 MHC 肽结合测定和 PBMC 染色中被视为阳性的肽的 ProVE® 五聚体从 HTLV-2 感染的捐赠者中,可以清楚地识别出 Tax2 (11-19) (LLYGYPVYV) 的单个 A*02:01 限制性表位,该表位在几乎所有无症状携带者中都以高频率被发现。这是任何 MHC I 类 HTLV-2 表位的第一份报告。

图 1:候选肽与 A*02:01 组装,并使用 MHC 肽结合测定进行分析,以确定其掺入 MHC 分子的水平。结合信号显示为相对于通过/失败控制(黄色条)的百分比;肽 11,LLYGYPVYV(红条)通过五聚体染色进一步验证。

用 Tax2 (11-19) (LLYGYPVYV) 肽刺激后,使用一组CD8+ T 细胞功能标记。作为对照,细胞还用含有已知 CMV、EBV 和流感表位的 ProMix™ CEF 扩展肽池进行刺激。大多数抗原特异性细胞仅对组中使用的标记物表现出单一反应,其中表达 IFN-γ 或 MIP-1 β 的细胞最为普遍。此外,通过将定制的 Pro5®五聚体染色与颗粒酶 B 和穿孔素的细胞内细胞因子染色相结合,细胞的溶细胞活性保持完整。

ProImmune 提供的服务和试剂对于鉴定至关重要第一个 HTLV-2 Tax2 MHC I 类表位的序列。 MHC-肽结合分析可以快速鉴定许多感兴趣的等位基因的潜在表位,同时五聚体染色确认并验证了表位。 ProImmune 肽用于通过细胞内细胞因子染色对抗原特异性细胞进行进一步的功能分析。