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分析试剂盒 Anatrace经销商
SELECTOR KITSELECTOR: SELECTORPart #DescriptionUnit SizePrice (USD)Qty AL-SEL-DP Analytic Selector Detergent Panel (94 x 150 µl each detergent) 1 PLATE 352UnitsAdd to cart AL-SEL Analytic Selector Kit 1 KT 563UnitsAdd to cart AL-SEL-5 分析型选择器套件(5 件装)5KT 1967 单位添加到购物车产品说明技术文档所需/相关产品分析选择器:洗涤剂相容性的快速测定选择器是一种快速、高通量测定,可探索洗涤剂空间以识别最适合稳定目标膜蛋白的那些下游蛋白质结晶试验。该测定在 94 种不同的洗涤剂中使用差异过滤来生成有关蛋白质-洗涤剂复合物的稳定性和大小的信息。该测定的步骤很简单:首先,将蛋白质结合到亲和树脂上,用新的洗涤剂洗涤和洗脱。然后洗脱液通过两个不同的过滤板环截留分子量 (MWCO)。 .过滤曲线提供稳定性和相对大小信息,允许选择最有可能以与结晶和结构确定相称的方式稳定蛋白质的去污剂。我为什么要探索如此多种去污剂?整合膜蛋白呈现出独特的对蛋白质化学家和结构生物学家的挑战。在它们的自然环境中,这些蛋白质存在于一个动态复杂环境的马赛克脂质双层中。然而,在结构研究之前,必须将这些从细胞膜中提取出来并溶解,以满足跨膜区域的疏水性,同时确保亲水域与水相接触。虽然大量去污剂可能能够使蛋白质保持可溶形式,但任何给定膜蛋白的稳定性、同质性和活性都可能受到极大影响。受增溶组分特性的影响。沉积在蛋白质数据库中的膜蛋白包括范围广泛的洗涤剂和洗涤剂-脂质复合物,作为导致衍射质量晶体的蛋白质制剂的一部分。因此,虽然某些洗涤剂(例如 DM、DDM 或 OG)以其在结构研究中稳定完整膜蛋白的成功而闻名,并且被频繁报道,但需要付出大量努力来探索洗涤剂空间,甚至涵盖以前的洗涤剂成功用于蛋白质结晶。此套件包含什么?1 x 洗涤剂筛选板,包含 150 µl 94 洗涤剂,工作浓度为 2 倍,一个空白和一个位置用于目前稳定待筛选蛋白质样品的洗涤剂 1 x 0.22 µm 过滤板,带容器洗涤剂更换板 1 x 容器板,蛋白质和新更换的洗涤剂将洗脱到其中 1 x 300 MWCO 过滤板带匹配的容器板1 x 100 MWCO 过滤板和匹配的容器板。 Analytic Extractor 是一种快速启动试剂盒,其中包含常用于从原核和真核细胞膜中提取和/或结晶整合膜蛋白 (IMP) 的去垢剂。Analytic Selector 提供了一种快速测定法,用于鉴定保持溶解度的去垢剂完整的膜蛋白,最大限度地减少聚集并提高稳定性。分析结晶器是一种独特的膜蛋白结晶两步方案,旨在帮助您减少第一次通过时要筛选的条件数量并增加结晶成功的可能性。用户指南MSDSFAQsDoes选择器适用于所有类型的膜蛋白?任何目前在洗涤剂中溶解并稳定的膜蛋白都可以通过 Selector 试剂盒运行,以确定下游应用的其他洗涤剂。这包括所有类别的膜在任何系统中表达的蛋白质(转运蛋白、酶、通道等)。洗涤剂板解冻使用什么温度范围是安全的?洗涤剂可以在室温下解冻,也可以在高达 50 摄氏度的温和加热和混合下解冻,对于持续时间短我的蛋白质表达很差,我可以使用多少蛋白质才能成功进行 Selector 检测?此检测所需的最小蛋白质量将取决于您的检测方法的灵敏度。可以在整个建议的方案中调整缓冲液、洗涤液和树脂体积,以进一步小型化方案并生成更浓缩的样品用于检测。哪些亲和树脂与 Selector 兼容?任何已被证明能结合目标蛋白质并且可以结合的亲和树脂从树脂中洗脱是相容的。与蛋白质共价结合的树脂(即 IgG 树脂),需要通过亲和标签的蛋白水解去除蛋白质的树脂不兼容。我可以使用吗A280 来量化我的蛋白质?由于面板中某些洗涤剂的吸光度在此范围内,因此通常不建议使用 A280 吸光度来量化您的蛋白质以进行完整的洗涤剂采样。如果用户满足于错过套件中的 Anapoe 系列洗涤剂,那么这是一种可以接受的方法。请联系 Microlytic Support 了解有关洗涤剂面板吸光度行为的更多详细信息。此外,频繁使用组氨酸标记蛋白及其用咪唑洗脱也会影响该范围内的吸光度测量。如果您的蛋白质具有结合辅因子,例如血红素或黄素,则可以使用这些波长下的吸光度。在高 MWCO 和低 MWCO 洗脱板中都没有可量化的蛋白质。这可能是由于蛋白质与亲和树脂,亲和树脂洗脱很少,或蛋白质样品在所有去污剂中严重聚集。第一步是检查蛋白质是否通过从洗脱板的几个孔中运行样品的凝胶(或进行蛋白质印迹),从亲和树脂(步骤 2)中洗脱。如果不存在蛋白质,则表明与亲和树脂的结合不良,或者蛋白质没有洗脱。来自 0.22 um 过滤板的亲和树脂样品可以在凝胶上运行以查看蛋白质是否仍然结合。左上象限中有多种洗涤剂,我应该选择哪一种进行进一步研究?缩小范围的一种方法在有前途的洗涤剂列表中,进行小规模洗涤剂交换,然后进行进一步的生物物理分析。我们建议使用尺寸排阻层析来确保新的蛋白质-洗涤剂复合物是非聚集和单分散的。其他分析包括动态光散射、热稳定性测定(即 CPM)或分析 SEC。Selector 确定了许多可供尝试的洗涤剂。我如何订购大量的每种洗涤剂?所有 94 洗涤剂panel 中的 ts 可从 Anatrace 获得,每个产品的目录号都列在用户手册中。Analytic Extractor 是一种快速启动套件,包含通常用于从细胞膜中提取和/或结晶整合膜蛋白 (IMP) 的洗涤剂原核和真核细胞。Analytic Selector 提供了一种快速检测方法,用于鉴定保持整体膜蛋白溶解度的去污剂,最大限度地减少聚集并促进稳定性。Analytic Crystallizer 是一种独特的膜蛋白结晶两步方案,旨在帮助您减少第一次通过时要筛选的条件数量,增加结晶成功的可能性。提取器套件选择器套件