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动物细胞培养7-资讯wiki版
无Ca2+和Mg2+的 Dulbecco 磷酸盐缓冲液(D-PBSA)的制备与灭菌实验方法原理目的在常压下使用的等渗盐溶液的制备。应用用于稀释浓缩液.如稀释2.5%腆蛋白酶;胰蛋自酶消化前的预漂洗,收集细胞或换试剂时的清洗溶液。因为它不含Can+和Mg汁,NaHCO3或葡萄糖,所以不适合长时间孵育。训练目标简单盐溶液的构成。渗透压.缓冲液和pH控制。利用高压灭菌锅消毒热稳定溶液。监督:在培养溶液过程中连续监督,在质鼠控制步骤可以间歇监借。在灭菌的开始和完成阶段连续监督,在质旦控制数据阶段间歇监督。时间:2 h背景信息盐平衡溶液(见9.3节;表9-2):缓冲液(见9.2.3节)。示范材料和操作:渗压计或传钵率仪的使用。高压灭菌锅或台式高压灭菌器的指导使用。安全提示:燕汽灭菌锅有很高的灼伤风险和可能的爆炸风险(见7.5.2,7.5.7节)。简单的台式高压火曲锅可能会F烧,因此有着火的风险,除非用自动的沮度控制切断器来保护。实验步骤练......阅读全文 细胞培养方法

一、准备工作 准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献。 二、取材

细胞培养的一般过程:准备、取材、培养、冻存及复苏 一、准备工作 准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文 生物反应器悬浮培养关键技术有哪些

一、生物反应器在生物制药中的应用及现状 21世纪初,随着流加培养、灌流培养、基因工程等技术的发展,作为大规模培养主要设备的生物反应器规模也趋向大型化和自动化。当前生物制药的主流技术是在大型机械搅拌式反应器中,用无血清培养基和灌流工艺悬浮培养细胞进行生产。 生物反应器大规模培养在生物

细胞培养实验室需要配备的仪器设备

细胞培养实验室除了配备一般实验室的普通常规设备外,还有一些特殊需要的设备,本文将详细介绍。细胞培养实验室.png一、常用的仪器设备(1)仪器a)显微镜:倒置显微镜——是细胞培养实验室所必需的日常工作常规使用设备之一,便于掌握细胞的生长情况并观察有无污染等。b)培养箱:体外培养的细胞和体内细胞一样,需

细胞系错误鉴定:终结的开始

2010年5月ATCC SDO(Standards Development Organization)工作组在Nature review cancer杂志上发表了题为《Cell line misidentification:the beginning of the end》前瞻性报道。以下是全文

细胞培养的一般过程

一、准备工作准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行.准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献. 二、取材在无

干细胞实验技术入门

《Science》刚刚公布的十大科学突破中,占据首位就是细胞重新编程技术(iPS,induced pluripotent stem cells),这一才初初\"面世”一年的干细胞技术引发了生命科学研究领域的极大震动,引用《科学》杂志负责新闻的副主编Robert Coontz的话就是\"这项研

小鼠神经干细胞(C17.2)的培养操作规程及注意事项

小鼠神经干细胞(C17.2)细胞接受后的处理:1) 收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。2) 在显微镜下确认细胞生长状态时,在低倍镜(4或5X物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下,同时给细胞拍照各2

细胞衰老如何应对

近年来,细胞体外培养造成细胞衰老的报导中指出,所有动物细胞皆有其本身的『海佛烈克极限』,影响其生物寿命长短。从细胞代数学说(也称细胞分裂次数学说)认为,人体细胞在培养条件下平均可培养60代。也就是说,无论是原代细胞或是细胞株,在细胞培养过程中细胞衰老现象是存在且常见,但却容易被操作人员忽略,往往在细

建立细胞系或细胞株

各种已被命名和经过细胞生物学鉴定的细胞系或细胞株,都是一些形态比较均一、生长增殖比较稳定的和生物性状清楚的细胞群。因此凡符合上述情况的细胞群也可给以相应的名称,即文献中常称之为已鉴定的细胞(Certified Cells)。已鉴定的细胞可用于各种实验研究和生产生物制品。当前世界上已建的各种细胞系(株

细胞的营养:水、糖类、氨基酸、脂类、无机盐、维生素和...-1

离体细胞与体内的细胞在营养代谢上是有区别的。机体内的细胞营养可受神经和激素等进行一系列的统一调节,而离体的细胞则不受其调节。离体培养细胞与体内细胞在营养要求上的主要差别如下:体外长期培养的细胞大多需要血浆、血清或胚胎浸出液,而这类培养基都可能含有微量的激素、维生素及必要的氨基酸,足以供给细胞营养的需

原代细胞培养之——取材技术

细胞的来源多样,培养方法也各不相同,凡是来源于胚胎、组织器官及外周血,经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。原代细胞经分散接种之手段称为传代。凡能经传代方式进行再次培养的细胞称为传代细胞。若能稳定生长传至10~20代以上的细胞可确立为细胞系。若有条件能开展单细胞克隆、纯化,经大量扩增

肿瘤细胞的培养(四)

四、提高肿瘤细胞培养存活率和生长率措施 根据人们的经验,肿瘤细胞在体外不易培养,建立能传代的肿瘤细胞系更为困难。当肿瘤组织或细胞初代接种培养后,常出现以下几种情况: 完全无细胞游出或移动; 有细胞移动和游出,但无细胞增殖,细胞长时间处于停滞状态以致难以传代; 有细胞增殖,传若干代后停止生长或衰退死亡

原代细胞的培养与建系-1

细胞的来源多样,培养方法也各不相同,凡是来源于胚胎、组织器官及外周血,经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。原代细胞经分散接种之手段称为传代。凡能经传代方式进行再次培养的细胞称为传代细胞。若能稳定生长传至10~20代以上的细胞可确立为细胞系。若有条件能开展单细胞克隆、纯化,经大量扩增

细胞培养的一般过程

一、准备工作准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行.准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与

蓝色荧光染色体核型分析试剂盒使用说明

YIJI蓝色荧光染色体核型分析试剂盒产品说明书(中文版) 主要用途 YIJI蓝色荧光(DAPI)染色体核型分析试剂是一种旨在通过使用荧光染料DAPI与染色体DNA的结合并发出荧光检测信号来显示染色体带型特征而构成细胞染色体核型的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的

平滑肌细胞培养方法-2

1 材料与方法1.1 材料 9~12d新生健康清洁级KM小鼠,雌雄不限,购自重庆医科大学实验动物中心。RPMI-1640干粉培养基,D-Hanks粉,标准胎牛血清,胰蛋白酶粉(1∶250)均购自Hy-Clone公司;青霉素钠、硫酸链霉素购自华北制药厂;鼠抗兔平滑肌α肌动蛋白单克隆抗体,购自Zymed

动物细胞培养及外源基因导入的原理和操作步骤

实验概要通过本实验掌握传代细胞培养的基本方法,了解无菌操作的基本原则。掌握磷酸钙介导的贴壁细胞的通用转染方法。了解细胞凋亡的形态特征,掌握细胞凋亡DNA梯度(\"DNA Ladder”)电泳检测法。实验原理细胞培养是现代生物学研究中应用最为广泛的技术之一。它的突出优点,一是研究对象是活的细胞,可长时期

动物细胞线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒的使用方法

动物细胞线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒产品说明书(中文版) 主要用途 动物细胞线粒体可溶性总蛋白制备试剂是一种旨在从动物细胞中分离出完整而纯化的线粒体细胞器,并在蛋白酶抑制混合剂的帮助下,使已纯化的线粒体膜结构破裂而获得线粒体内活性蛋白酶系统的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、

动物细胞线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒的使用方法

主要用途动物细胞线粒体可溶性总蛋白制备试剂是一种旨在从动物细胞中分离出完整而纯化的线粒体细胞器,并在蛋白酶抑制混合剂的帮助下,使已纯化的线粒体膜结构破裂而获得线粒体内活性蛋白酶系统的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种动物细胞(动物和人体的原代细胞、培养细胞等)中线

血清替代品:XerumFree XF205培养基添加物使用说明(一)

以下翻译仅供参考!最终使用者请参看英文原文说明书。使细胞能在无血清环境中生长确保无动物成分且经过GMP认证的细胞培养添加物细胞的无血清培养具有一定的挑战性。这篇文章的目的是指导终端使用者平稳过渡到无血清环境中,且避免所有不足的或不恰当的努力。理想的过渡到无血清环境下应该经历几个阶段,逐渐

体内组织细胞的体外培养-2

培养方法如下:1、从手术室无菌取脑髓灰质或白质后,仔细剥除脑膜、血管和纤维成分,置Hanks液中漂洗一、二次。2、置于30―50倍体积的Hanks液中,此时脑组织比较柔软,反复吹打即制成细胞悬液。3、把悬液注入离心管室温中直立5-10分钟后,细胞或细胞团快自然下沉,脂肪等杂物易漂浮,可吸除上层、反复

你的实验室用的是哪种生物反应器?

动物细胞培养技术能否大规模工业化、商业化,关键在于能否设计出合适的生物反应器(bioreactor)。由于动物细胞与微生物细胞有很大差异,传统的微生物反应器显然不适用于动物细胞的大规模培养。首先必须满足在低剪切力及良好的混合状态下,能够提供充足的氧以供细胞生长及细胞进行产物的合成。 尽管近年来

细胞培养培养基

绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和代谢添加剂(例如

高亲和力高纯度零污染的细胞培养级抗体制备指南

单克隆抗体(monoclonal antibody,MAb),是针对专一的抗原决定簇产生的抗体,单克隆技术又名杂交瘤技术起源于1975年,主要原理是利用产生抗体的B细胞与骨髓瘤细胞杂交融合成杂交瘤细胞,生产抗体。目前大量制备单抗的方法主要有两种方法:一种是动物体内生产法(腹水制备),在小鼠腹腔内接种

细胞实验技术及细胞培养基本知识-1

细胞培养技术细胞周期的测定一、原理细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。 单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法,但它不能代表细胞群体的周期,故现多采用其他方法测群体周期。 测定细胞周期的方法很多,有同位素标记法、细胞计数法